| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-22页 |
| ·决明研究现状 | 第14-16页 |
| ·决明的特性 | 第14页 |
| ·决明的主要活性成分 | 第14-16页 |
| ·决明子的功效及应用 | 第16-17页 |
| ·调脂减肥 | 第16页 |
| ·利尿导泻 | 第16页 |
| ·保肝降压 | 第16-17页 |
| ·明目护眼 | 第17页 |
| ·抗菌免疫 | 第17页 |
| ·其它功效 | 第17页 |
| ·胰蛋白酶抑制剂简介 | 第17-19页 |
| ·胰蛋白酶抑制剂的定义 | 第17-18页 |
| ·胰蛋白酶抑制剂的分类 | 第18页 |
| ·发现的植物蛋白酶抑制剂 | 第18-19页 |
| ·决明胰蛋白酶抑制剂的前期研究 | 第19页 |
| ·蛋白酶抑制剂的应用 | 第19-20页 |
| ·农业抗虫 | 第19页 |
| ·抗肿瘤、抗感染 | 第19-20页 |
| ·抗病毒、抗真菌 | 第20页 |
| ·研究意义及内容 | 第20-22页 |
| 第2章 决明Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因(CoTI2)的克隆 | 第22-34页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·其他重要试剂 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·提取决明种子总RNA | 第23页 |
| ·反转录合成cDNA | 第23-24页 |
| ·CoTI2的3’端RACE | 第24-26页 |
| ·CoTI2的5’端RACE | 第26页 |
| ·CoTI2的全长克隆 | 第26-27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-32页 |
| ·提取决明种子总RNA | 第27-28页 |
| ·CoTI2的3’端RACE | 第28-29页 |
| ·CoTI2的5’端RACE | 第29-30页 |
| ·决明CoTI2的全长克隆 | 第30-32页 |
| ·本章小结 | 第32-34页 |
| 第3章 决明CoTI2的生物信息学分析 | 第34-54页 |
| ·决明CoTI2的信号肽及亚细胞定位 | 第34-36页 |
| ·决明CoTI2的信号肽分析 | 第34-35页 |
| ·决明CoTI2的细胞定位分析 | 第35-36页 |
| ·CoTI2蛋白质的基本性质预测 | 第36-40页 |
| ·决明CoTI2的等电点和分子量 | 第36页 |
| ·决明CoTI2的亲/疏水性预测 | 第36-38页 |
| ·决明CoTI2的氨基酸组成 | 第38-39页 |
| ·决明CoTI2的酶切位点分析 | 第39页 |
| ·决明CoTI2的跨膜结构域分析 | 第39-40页 |
| ·决明CoTI2的密码子偏好性分析 | 第40-48页 |
| ·Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因(KTI)密码子偏好性分析 | 第40-45页 |
| ·决明CoTI2的密码子偏好性分析 | 第45页 |
| ·决明CoTI2基因组与酵母、大肠杆菌的基因组密码子偏好性比较 | 第45-48页 |
| ·决明CoTI2蛋白的二级结构预测 | 第48页 |
| ·决明CoTI2的同源性与进化关系分析 | 第48-53页 |
| ·决明CoTI2氨基酸序列的同源性 | 第48-49页 |
| ·决明CoTI2与其他植物Kunitz型胰蛋白酶抑制剂的进化关系 | 第49-53页 |
| ·本章小结 | 第53-54页 |
| 第4章 决明CoTI2的表达模式分析 | 第54-62页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·其他重要试剂及试剂盒 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-57页 |
| ·决明植株胁迫处理 | 第55页 |
| ·决明RNA的提取与cDNA的合成 | 第55-56页 |
| ·特异引物的设计与检测 | 第56页 |
| ·决明CoTI2基因的RT-qPCR扩增 | 第56-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-60页 |
| ·决明总RNA的提取 | 第57页 |
| ·特异引物的检测 | 第57-58页 |
| ·CoTI2基因的表达模式分析 | 第58-60页 |
| ·本章小结 | 第60-62页 |
| 第5章 决明CoTI2的原核表达及真核表达载体的构建 | 第62-76页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·植物材料 | 第62-63页 |
| ·所用试剂 | 第63页 |
| ·菌种与质粒 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-68页 |
| ·含酶切位点的引物设计 | 第63页 |
| ·加酶切位点 | 第63-64页 |
| ·构建原核表达载体 | 第64-65页 |
| ·决明CoTI2的原核表达与检测 | 第65页 |
| ·原核表达条件的优化 | 第65-66页 |
| ·表达可溶性鉴定 | 第66页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第66-68页 |
| ·转化拟南芥 | 第68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-74页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第68-70页 |
| ·CoTI2的原核表达与检测 | 第70页 |
| ·CoTI2的表达条件优化 | 第70-72页 |
| ·CoTI2的可溶性鉴定 | 第72-73页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第73-74页 |
| ·转化拟南芥 | 第74页 |
| ·本章小结 | 第74-76页 |
| 结论 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-84页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及科研成果 | 第84页 |
