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低强度聚焦超声激活原卟啉IX诱导人白血病细胞凋亡和细胞自噬的机制探讨

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
英文缩略词表第12-17页
第1章 绪论第17-35页
   ·声动力学疗法第17-18页
   ·自噬第18-22页
     ·自噬分子机制第19-22页
   ·自噬在细胞存活和死亡中的作用第22-23页
     ·自噬与细胞存活第22-23页
     ·自噬与凋亡第23页
   ·自噬与肿瘤第23-24页
   ·自噬在声动力学疗法中的作用第24页
 参考文献第24-35页
第2章 原卟啉Ⅸ在K562白血病细胞中代谢及亚细胞定位第35-43页
   ·前言第35页
   ·材料与方法第35-38页
     ·实验用细胞系第35-36页
     ·主要试剂及配制第36-37页
     ·实验用主要仪器第37页
     ·流式细胞仪检测原卟啉Ⅸ在K562细胞中代谢第37-38页
     ·激光共聚焦显微镜观察原卟啉Ⅸ在K562细胞中亚细胞定位第38页
     ·数据分析第38页
   ·实验结果第38-40页
     ·PpⅨ在K562细胞中的药物含量变化第38-39页
     ·共聚焦显微镜观察原卟啉Ⅸ在K562细胞中亚细胞定位第39-40页
   ·讨论第40页
 参考文献第40-43页
第3章 PpⅨ-SDT对K562细胞生长抑制及诱导其凋亡和自噬的研究第43-65页
   ·前言第43-44页
   ·材料与方法第44-54页
     ·实验用细胞系第44页
     ·主要试剂及配制第44-47页
     ·主要仪器第47页
     ·超声处理装置第47-48页
     ·声动力处理第48页
     ·扫描电镜观察第48页
     ·MTT检测细胞毒效应第48-49页
     ·细胞存活率测定第49页
     ·细胞凋亡定量测定第49页
     ·DAPI染色第49-50页
     ·DNA损伤检测第50页
     ·EGFP-LC3定位试验第50-51页
     ·MDC染色检测自噬活性第51页
     ·吖啶橙染色第51页
     ·免疫荧光观察第51-52页
     ·蛋白免疫印迹法(Western blotting,WB)检测凋亡和自噬相关蛋白第52-53页
     ·细胞内活性氧含量检测第53-54页
     ·数据分析第54页
   ·实验结果第54-57页
     ·SDT诱导K562细胞凋亡第54-55页
     ·SDT诱导K562细胞自噬第55-56页
     ·SDT诱发的自噬作为K562细胞的存活机制第56-57页
     ·PpⅨ介导的SDT诱导自噬和凋亡K562细胞中活性氧的积累有关第57页
   ·讨论第57-59页
 参考文献第59-65页
第4章 Beclin 1在PpⅨ-SDT诱导K562细胞自噬及凋亡中的作用第65-79页
   ·前言第65页
   ·材料与方法第65-73页
     ·实验用细胞系第65-66页
     ·主要试剂及配制第66-68页
     ·主要仪器第68-69页
     ·超声处理装置第69页
     ·声动力处理第69-70页
     ·MTT检测细胞毒效应第70页
     ·MDC染色检测自噬活性第70页
     ·细胞存活率测定第70-71页
     ·DAPI染色第71页
     ·免疫印迹分析第71页
     ·shRNA干扰实验第71-73页
     ·数据分析第73页
   ·实验结果第73-74页
     ·Viacount检测SDT处理后K562细胞存活率第73页
     ·SDT诱导K562细胞自噬第73-74页
     ·对shRNA Beclin 1干扰Beclin 1效果的评价第74页
     ·干扰Beclin 1对PpⅨ-SDT诱导K562细胞自噬和凋亡的影响第74页
   ·结果讨论第74-75页
 参考文献第75-79页
第5章 PpⅨ-SDT对K562细胞Bcr-Abl磷酸化的影响第79-87页
   ·前言第79-80页
   ·材料与方法第80-84页
     ·实验用细胞系第80页
     ·主要试剂及配制第80-82页
     ·主要仪器第82页
     ·超声处理装置第82-83页
     ·声动力处理第83页
     ·克隆形成检测细胞增殖第83页
     ·MTT检测细胞毒效应第83页
     ·免疫印迹分析第83-84页
     ·数据分析第84页
   ·实验结果第84-85页
     ·克隆形成检测细胞增殖第84页
     ·Western blot检测SDT对K562细胞BCR-ABL蛋白表达的影响第84页
     ·SDT诱导K562细胞死亡与BCR-ABL的关系探讨第84-85页
   ·讨论第85页
 参考文献第85-87页
第6章 PpⅨ-SDT与阿霉素的协同抗癌效应分析及机制初探第87-99页
   ·前言第87-88页
   ·材料与方法第88-92页
     ·实验用细胞系第88页
     ·主要试剂及配制第88页
     ·主要仪器第88-89页
     ·超声处理装置第89页
     ·声动力处理第89-90页
     ·MTT检测细胞毒效应第90页
     ·评价阿霉素-US+PpⅨ之间的相互作用第90页
     ·细胞凋亡定量测定第90-91页
     ·DNA损伤检测第91页
     ·细胞内活性氧含量检测第91页
     ·P-糖蛋白表达的检测第91-92页
     ·数据分析第92页
   ·结果第92-94页
     ·PpⅨ-SDT处理组对K562/DOX细胞毒作用第92页
     ·PpⅨ+超声增强细胞内阿霉素对K562/DOX细胞毒性作用第92页
     ·超声联合PpⅨ和DOX诱导K562/DOX细胞凋亡第92-93页
     ·超声联合PpⅨ和DOX处理后K562/DOX细胞内活性氧的产量变化第93页
     ·超声联合PpⅨ和DOX处理后K562/DOX细胞P糖蛋白外排功能的变化第93-94页
   ·讨论第94-95页
 参考文献第95-99页
总结第99-101页
图版及说明第101-135页
致谢第135-137页
攻读博士学位期间研究成果第137-139页

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