| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-27页 |
| 第一章 植物抗病性与病原菌MAMPs的研究 | 第14-23页 |
| 1 LPS与植物天然免疫 | 第14-18页 |
| ·LPS作为MAMP的作用 | 第14-15页 |
| ·HR的预防和LPS引发的植物防御应答 | 第15-16页 |
| ·植物对LPS的识别 | 第16-17页 |
| ·LPS结构的差异 | 第17-18页 |
| 2 PGN与植物抗病 | 第18-20页 |
| ·PGN作为MAMP的作用 | 第18-19页 |
| ·植物对PGN的识别作用 | 第19-20页 |
| 3 细菌硫酸化的axY~s22与植物抗病 | 第20-21页 |
| 4 其他常见MAMPs的识别 | 第21-23页 |
| 第二章 不同生物磺基转移酶的研究进展 | 第23-25页 |
| 1 动物磺基转移酶的研究进展 | 第23页 |
| 2 植物磺基转移酶的研究进展 | 第23-24页 |
| 3 微生物磺基转移酶的研究进展 | 第24-25页 |
| 第三章 本研究的目的及意义 | 第25-27页 |
| 第二部分 实验内容 | 第27-65页 |
| 第一章 RaxST在PXO99中的表达纯化及活性分析 | 第27-48页 |
| 1 前言 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-42页 |
| ·实验材料及试剂 | 第28-30页 |
| ·菌株及载体 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·常用药品的配置 | 第29-30页 |
| ·实验方法与内容 | 第30-34页 |
| ·水稻白叶枯病菌RaxST的克隆 | 第30页 |
| ·水稻白叶枯病菌基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| ·PCR扩增条件及电泳检测 | 第31-32页 |
| ·PCR产物纯化及处理 | 第32-33页 |
| ·克隆菌株E.coli DH5α的感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33-34页 |
| ·阳性克隆筛选及测序 | 第34页 |
| ·pET24a-KanP-RaxST表达载体的构建 | 第34-37页 |
| ·pET24a-KanP-RaxST表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·质粒提取 | 第35页 |
| ·酶切及产物回收 | 第35-36页 |
| ·^ETlAdi-KanP-RaxST 电转化 PX099 | 第36-37页 |
| ·pET24a-KanP-RaxST蛋白的表达和纯化 | 第37-42页 |
| ·pET24a-KanP-RaxST蛋白的表达 | 第37-38页 |
| ·pET24a-KanP-RaxST蛋白纯化 | 第38-42页 |
| ·His-Tag蛋白纯化原理 | 第38页 |
| ·菌体的预处理 | 第38-39页 |
| ·Ni-NTA-His Bind Superflow Resin亲和层析 | 第39页 |
| ·蛋白的透析 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第40-41页 |
| ·蛋白浓度的测定方法 | 第41-42页 |
| 3 实验结果 | 第42-47页 |
| ·载体pET24a-KanP-RaxST的构建 | 第42-44页 |
| ·pET24a-KanP-RaxST质粒载体的PCR及酶切验证 | 第42页 |
| ·pET24a-KanP-RaxST单交换重组到PXO99基因组后的酶切和PCR检验 | 第42-44页 |
| ·pET24a-KanP-RaxST蛋白的表达及纯化 | 第44-45页 |
| ·蛋白定量及活性测定 | 第45-47页 |
| 4. 分析与讨论 | 第47-48页 |
| 第二章 不同长度RaxST在E. coli中的表达纯化及活性分析 | 第48-58页 |
| 1 前言 | 第48页 |
| 2 材料与方法 | 第48-53页 |
| ·实验材料及试剂 | 第48-49页 |
| ·菌株及载体 | 第48页 |
| ·仪器与试剂 | 第48-49页 |
| ·实验内容和方法 | 第49页 |
| ·pMALC2E-fRaxST、pMALC2E-tRaxST表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·pMALC2E-fRaxST表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·pMALC2E-tRaxST表达载体的构建 | 第50页 |
| ·pMALC2E-fRaxST、pMALC2E-tRaxST的诱导表达和纯化 | 第50-53页 |
| ·pMALC2E-fRaxST等的诱导表达 | 第50-51页 |
| ·pMALC2E-fRaxST等的纯化 | 第51-53页 |
| ·蛋白纯化的原理 | 第51-52页 |
| ·纯化蛋白前菌体的预处理 | 第52页 |
| ·Amylose Resin亲和层析 | 第52页 |
| ·蛋白的透析 | 第52-53页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第53页 |
| ·蛋白浓度的测定方法 | 第53页 |
| 3 实验结果 | 第53-57页 |
| ·pMALC2E-fRaxST的载体构建 | 第53-54页 |
| ·pMALC2E-tRaxST的载体构建 | 第54-55页 |
| ·pMALC2E-fRaxST的诱导表达及纯化结果 | 第55页 |
| ·pMALC2E-tRaxST的诱导表达及纯化结果 | 第55-56页 |
| ·蛋白定量与活性测定 | 第56-57页 |
| 4 分析与讨论 | 第57-58页 |
| 第三章 PAPS合成相关酶的克隆纯化及活性分析 | 第58-65页 |
| 1 前言 | 第58-59页 |
| 2 材料与方法 | 第59-61页 |
| ·实验材料及试剂 | 第59页 |
| ·菌株及载体 | 第59页 |
| ·仪器 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59页 |
| ·实验方法与内容 | 第59-61页 |
| ·S.cerevisias中ATPS的克隆和表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·S.cerevisias ATPS的原核表达 | 第60页 |
| ·S.cerevisias ATPS的纯化 | 第60页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第60-61页 |
| 3 实验结果 | 第61-64页 |
| ·His9-ATPS表达载体的构建 | 第61-62页 |
| ·重组His9-ATPS的诱导表达及纯化 | 第62页 |
| ·活性测定 | 第62-64页 |
| 4 结果与讨论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
