| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 缩略词表 | 第11-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-44页 |
| 一、 狂犬病 | 第16-19页 |
| （一） 全球疫情概况 | 第16-17页 |
| （二） 中国疫情概况 | 第17-19页 |
| 二、 狂犬病毒概述 | 第19-20页 |
| 三、 抗体工程及单克隆抗体 | 第20-27页 |
| （一） 抗体 | 第20-22页 |
| （二） 人用单克隆抗体的发展现状 | 第22-23页 |
| （三） 抗狂犬病毒单克隆抗体发展现状 | 第23-25页 |
| （四） 小分子抗体概述 | 第25-27页 |
| 四、 大肠杆菌表达体系的特点应用现状 | 第27-29页 |
| 五、 蛋白纯化与复性概述 | 第29-38页 |
| （一） 蛋白纯化 | 第29-30页 |
| （二） 蛋白质色谱纯化技术的主要类型 | 第30-31页 |
| （三） 大肠杆菌表达包涵体蛋白的纯化与复性 | 第31-38页 |
| 六、 分析方法的验证 | 第38-41页 |
| 七、 试验设计 | 第41-44页 |
| （一） 论文目的 | 第41-42页 |
| （二） 试验设计 | 第42-44页 |
| 第二章 检测方法的建立与验证 | 第44-58页 |
| 一、 材料、试剂和仪器 | 第44-45页 |
| （一） 主要试剂 | 第44页 |
| （二） 主要缓冲液 | 第44-45页 |
| （三） 主要仪器与设备 | 第45页 |
| 二、 实验方法 | 第45-51页 |
| （一） 蛋白含量测定（BCA 法）及方法验证 | 第45-47页 |
| （二） DNA 含量的测定及方法验证 | 第47-48页 |
| （三） 中和抗体效价测定（RFFIT）及方法验证 | 第48-51页 |
| 三、 实验结果 | 第51-55页 |
| （一） BCA 蛋白含量测定方法验证 | 第51-52页 |
| （二） DNA 含量测定方法验证 | 第52-53页 |
| （三） RFFIT 活性测定方法验证 | 第53-55页 |
| 四、 分析讨论 | 第55-57页 |
| 五、 小结 | 第57-58页 |
| 第三章 发酵与包涵体洗涤工艺初步研究 | 第58-70页 |
| 一、 培养基与主要仪器 | 第58-59页 |
| （一） 培养基 | 第58页 |
| （二） 主要仪器 | 第58-59页 |
| 二、 实验方法 | 第59-61页 |
| （一） 表达菌株的筛选 | 第59页 |
| （二） 发酵 PH 值选择 | 第59-60页 |
| （三） PH 调控方式选择 | 第60页 |
| （四） 发酵体积放大到 14L | 第60页 |
| （五） 包涵体洗涤 | 第60-61页 |
| 三、 实验结果 | 第61-67页 |
| （一） 菌种传代稳定性研究 | 第61-62页 |
| （二） 培养基筛选 | 第62-63页 |
| （三） 发酵 pH 筛选及调节方式选择 | 第63页 |
| （四） 发酵放大 | 第63-65页 |
| （五） 包涵体洗涤 | 第65-67页 |
| 四、 讨论 | 第67-68页 |
| 五、 小结 | 第68-70页 |
| 第四章 单链抗体 SCFV98H 的纯化复性工艺研究 | 第70-88页 |
| 一、 材料、试剂和仪器 | 第70-72页 |
| （一） 材料、试剂和试剂盒 | 第70页 |
| （二） 主要溶液 | 第70-71页 |
| （三） 主要仪器 | 第71-72页 |
| 二、 实验方法 | 第72-76页 |
| （一） scFv98H 变性蛋白的纯化 | 第72-75页 |
| （二） scFv98H 变性蛋白透析复性最适 pH 选择 | 第75页 |
| （三） scFv98H 变性蛋白柱上复性 | 第75-76页 |
| （四） 分析检测方法 | 第76页 |
| 三、 实验结果 | 第76-84页 |
| （一） scFv98H 变性蛋白的吸附洗脱模式纯化 | 第76-78页 |
| （二） scFv98H 变性蛋白流穿模式纯化 | 第78-80页 |
| （三） scFv98H 变性蛋白透析复性最适 pH 筛选 | 第80-81页 |
| （四） scFv98H 变性蛋白柱上复性 | 第81-84页 |
| 四、 讨论 | 第84-86页 |
| 五、 小结 | 第86-88页 |
| 第五章 单链抗体 SCFV98H 的诊断应用研究 | 第88-102页 |
| 一、 材料、试剂和仪器 | 第88-89页 |
| （一） 材料和试剂 | 第88页 |
| （二） 主要溶液 | 第88页 |
| （三） 主要仪器 | 第88-89页 |
| 二、 实验方法 | 第89-91页 |
| （一） 包涵体的纯化与复性 | 第89-90页 |
| （二） scFv98H 的表征与应用 | 第90-91页 |
| 三、 实验结果 | 第91-100页 |
| （一） 包涵体的纯化与复性 | 第91-93页 |
| （二） scFv98H 抗体的表征及应用 | 第93-100页 |
| 四、 讨论 | 第100-101页 |
| 五、 小结 | 第101-102页 |
| 第六章 单链抗体 SCFV98H 的治疗应用研究 | 第102-124页 |
| 一、 材料、试剂和仪器 | 第102-106页 |
| （一） scFv98H 的制备与应用 | 第102-104页 |
| （二） scFv98N（无 His 标签）的制备与应用 | 第104-106页 |
| 三、 实验结果 | 第106-119页 |
| （一） scFv98H 的制备与应用 | 第106-112页 |
| （二） scFv98N（无 His 标签）的制备与应用 | 第112-119页 |
| 四、 讨论 | 第119-121页 |
| 五、 小结 | 第121-124页 |
| 结论 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-134页 |
| 作者简介及攻读博士学位期间发表的论文 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135页 |
