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利用胚胎干细胞小体研究GATA-6通过上调骨形成蛋白-2对胚胎发育早期凋亡的抑制作用

中文摘要第1-7页
Abstract第7-11页
目录第11-14页
第1章 绪论第14-24页
   ·腭裂等颌面部先天畸形的发生,与凋亡的失调控密切相关第15-16页
   ·BMP 作为一个与凋亡和增殖密切相关的基因,已被证实与腭裂的发生存在着直接的关系第16-18页
   ·GATA-6 能够调节三胚层的发育,对于胚胎多个器官的发育具有非常重要的影响第18-19页
   ·BMP-2 常常做为 GATA-6 的下游基因,对胚胎发育、细胞分化等也具有非常重要的影响第19-20页
   ·胚胎干细胞小体能够模拟受精卵着床前后胚胎发育的情况,是研究胚胎早期发育特点的理想模型第20-24页
第2章 实验方法和实验结果第24-66页
   ·主要细胞、试剂及来源第24-26页
     ·主要细胞和 cDNA第24页
     ·抗体第24-25页
     ·主要试剂第25-26页
   ·主要实验方法第26-36页
     ·细胞培养第26-27页
     ·胚胎干细胞转化为 EB:第27页
     ·免疫印迹(Western Blot)第27-28页
     ·免疫荧光染色(切片)第28-29页
     ·免疫荧光染色(Whole-amount staining)第29页
     ·稳定表达 noggin 和 BMPR1b 的 EB 构建第29-30页
     ·微阵列分析(Microarray)第30页
     ·RT-PCR(逆转录 PCR)第30-32页
     ·免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)第32页
     ·内胚层移植第32-33页
     ·染色质免疫共沉淀第33页
     ·常用实验溶液配制方法第33-36页
   ·实验结果第36-66页
     ·GATA-6 通过影响内胚层和基底膜的形成调节 EB 内细胞的凋亡第36-45页
     ·GATA-6 通过调节 BMP2 控制凋亡第45-52页
     ·通过转染抑制 BMP 能够促进 EB 发生凋亡第52-58页
     ·GATA-6 调节BMP2 是通过经典SMAD 磷酸化途径发挥作用。第58-66页
第3章 讨论第66-72页
   ·GATA-6 通过调节内胚层表达 BMP-2 和基底膜蛋白来影响细胞的存活第66-67页
   ·GATA-6 直接与 Bmp2 的启动子相结合,通过调节凋亡,对胚胎的发育产生影响第67-68页
   ·BMP 信号能够通过经典 Smad 通路促进胚胎上皮细胞的存活,进而对组织形态发生产生影响第68-69页
   ·GATA-6 上调 BMP-2 的表达能够构成自动调节正反馈循环,进而促进内胚层分化和成熟。各种生长因子在这一过程中可能发挥着重要的作用第69-72页
第4章 结论第72-74页
参考文献第74-81页
作者简介及在学期间科研成果第81-83页
致谢第83页

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