| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-33页 |
| 1 我国贝类养殖现状 | 第15-16页 |
| 2 海水养殖贝类大规模死亡的相关因素 | 第16-23页 |
| ·环境胁迫 | 第16-17页 |
| ·扇贝病害爆发与病原鉴定 | 第17-22页 |
| ·贝类病害研究历史 | 第18-20页 |
| ·引发海洋贝类大规模死亡的病原生物种类 | 第20-22页 |
| ·细菌类 | 第20页 |
| ·病毒类 | 第20-21页 |
| ·寄生虫类 | 第21页 |
| ·原核生物类 | 第21-22页 |
| ·贝类自身体质因素 | 第22-23页 |
| ·大规模的累代繁育导致养殖扇贝抗逆性下降 | 第22页 |
| ·生殖周期对扇贝体质状况及抗逆性的影响 | 第22-23页 |
| 3 生物体综合体质状态与机体稳态的相关研究 | 第23-31页 |
| ·机体衰老与细胞凋亡等相关研究 | 第24-25页 |
| ·全基因组稳定性维持的相关研究 | 第25-26页 |
| ·自由基学说与机体抗氧化机制的相关研究 | 第26-27页 |
| ·能量稳态与机体能量平衡维持相关的研究 | 第27-28页 |
| ·机体生长、代谢、衰老及繁殖的基因调控通路 | 第28-31页 |
| ·通路作用机制 | 第30页 |
| ·通路活性对机体衰老速率的影响 | 第30-31页 |
| 小结 | 第31-33页 |
| 第二章 栉孔扇贝(Chlamays farreri)抗逆相关评价指标体系的构建 | 第33-89页 |
| 0 前言 | 第33-34页 |
| 第一节 栉孔扇贝端粒长度、端粒酶活性测定及相关基因的表达分析 | 第34-50页 |
| ·材料与方法 | 第34-41页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-40页 |
| ·末端限制性酶切(TRF)法检测端粒长度 | 第34-36页 |
| ·实时定量法(quantitative real-time PCR)检测端粒长度 | 第36-37页 |
| ·TRAP(telomeric repeat amplification protocol)法检测端粒酶活性 | 第37-38页 |
| ·端粒相关基因mRNA表达测定 | 第38-40页 |
| ·数据分析 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-47页 |
| ·端粒长度 | 第41-44页 |
| ·末端限制性酶切法检测结果 | 第41-42页 |
| ·实时定量PCR法检测结果 | 第42-44页 |
| ·端粒酶活性 | 第44-46页 |
| ·端粒相关基因表达量检测结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| ·海洋双壳贝类端粒重复序列分析 | 第47页 |
| ·端粒长度测定法的比较及其在海洋双壳贝类中的研究 | 第47-48页 |
| ·端粒酶活性及相关基因的表达分析 | 第48-50页 |
| 第二节 栉孔扇贝全基因组DNA甲基化水平分析 | 第50-55页 |
| ·材料与方法 | 第50-51页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-51页 |
| ·全基因组DNA甲基化水平检测 | 第50-51页 |
| ·Realtime PCR检测DNMT1基因表达 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-53页 |
| ·栉孔扇贝全基因组甲基化水平差异分析 | 第51-52页 |
| ·DNMT1表达分析 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第三节 栉孔扇贝自由基调控相关的指标测定及基因表达 | 第55-68页 |
| ·材料与方法 | 第55-58页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-58页 |
| ·Bradford法检测样品蛋白含量 | 第55-56页 |
| ·活性氧ROS测定 | 第56页 |
| ·总超氧化物歧化酶SOD活性检测 | 第56-57页 |
| ·过氧化氢酶CAT活力检测 | 第57页 |
| ·丙二醛MDA含量检测 | 第57-58页 |
| ·SOD、CAT基因表达测定 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-63页 |
| ·栉孔扇贝SOD、CAT酶活性测定结果及基因表达分析 | 第58-61页 |
| ·栉孔扇贝ROS与MDA含量检测结果及分析 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-68页 |
| ·海洋贝类抗氧化能力与衰老速率的关系 | 第64-66页 |
| ·栉孔扇贝不同年龄组间抗氧化能力及氧化损伤清除能力差异分析 | 第66-68页 |
| 第四节 栉孔扇贝能量代谢相关指标测定及基因表达 | 第68-79页 |
| ·材料与方法 | 第68-72页 |
| ·材料 | 第68页 |
| ·实验方法 | 第68-72页 |
| ·Bradford法检测样品蛋白含量 | 第68页 |
| ·谷草转氨酶(AST/GOT)以及谷丙转氨酶(ALT/GPT)活力检测 | 第68-69页 |
| ·Realtime PCR法检测栉孔扇贝谷草转氨酶(AST/GOT)以及谷丙转氨酶(ALT/GPT)基因的表达 | 第69-70页 |
| ·乳酸脱氢酶LDH活力检测 | 第70页 |
| ·ATP含量测定 | 第70-71页 |
| ·栉孔扇贝闭壳肌、性腺及肝胰腺组织糖原含量测定 | 第71-72页 |
| ·结果 | 第72-77页 |
| ·栉孔扇贝GOT、GPT酶活性水平检测及相应基因表达分析 | 第72-75页 |
| ·栉孔扇贝LDH酶活性水平以及ATP、糖原含量的检测结果 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| 第五节 栉孔扇贝能量代谢与抗氧化能力评价综合指标的构建 | 第79-89页 |
| ·材料与方法 | 第79-80页 |
| ·材料 | 第79页 |
| ·实验方法 | 第79-80页 |
| ·结果 | 第80-86页 |
| ·PCA法构建栉孔扇贝组织特异性综合指标 | 第80-84页 |
| ·不同年龄组栉孔扇贝个体综合指数分析 | 第84-86页 |
| ·讨论 | 第86-89页 |
| 第三章 繁殖周期、高温胁迫对栉孔扇贝(Chlamys farreri)能量代谢与抗氧化胁迫能力的影响 | 第89-119页 |
| 0 前言 | 第89-91页 |
| 第一节 栉孔扇贝(Chlamys farreri)繁殖前后能量代谢及抗氧化胁迫能力评价指标的测定分析 | 第91-101页 |
| ·材料与方法 | 第91页 |
| ·材料 | 第91页 |
| ·实验方法 | 第91页 |
| ·结果 | 第91-99页 |
| ·栉孔扇贝繁殖周期中生理生化指标的测定及基因表达分析 | 第91-98页 |
| ·自由基调控相关指标测定 | 第91-94页 |
| ·能量代谢相关指标测定 | 第94-96页 |
| ·生理指标相应基因的表达变化 | 第96-98页 |
| ·栉孔扇贝繁殖周期中能量代谢及抗氧化能力评价综合指数的测定 | 第98-99页 |
| ·讨论 | 第99-101页 |
| 第二节 高温胁迫下栉孔扇贝(Chlamys farreri)组织能量代谢及抗氧化胁迫能力评价指标的测定分析 | 第101-119页 |
| ·材料与方法 | 第101页 |
| ·材料 | 第101页 |
| ·实验方法 | 第101页 |
| ·结果 | 第101-117页 |
| ·30℃高温刺激生存曲线分析 | 第101-102页 |
| ·高温胁迫下不同年龄组扇贝能量代谢及抗氧化能力的比较分析 | 第102-107页 |
| ·基础生理指标测定及相应基因表达分析 | 第102-107页 |
| ·高温胁迫下扇贝综合指数变化 | 第107页 |
| ·栉孔扇贝能量代谢水平及抗氧化能力在高温胁迫前后的差异分析 | 第107-117页 |
| ·高温胁迫前后基础指标及相应基因的表达测定分析 | 第107-113页 |
| ·高温胁迫前后栉孔扇贝综合指数及糖原含量的测定分析 | 第113-117页 |
| ·讨论 | 第117-119页 |
| ·高温胁迫对海洋贝类代谢率及抗氧化能力的影响 | 第117页 |
| ·高温繁殖过程中海洋贝类的能量分配机制 | 第117-119页 |
| 第四章 栉孔扇贝(Chlamys farreri)PI3K-AKT-TOR、IGF-1r-AMPK-FOX #0以及P53-Sestrin通路调控基因的表达分析 | 第119-145页 |
| 0 前言 | 第119-121页 |
| ·材料与方法 | 第121-125页 |
| ·材料 | 第121页 |
| ·实验方法 | 第121-125页 |
| ·通路基因的全长cDNA克隆 | 第121-124页 |
| ·通路目标基因的Realtime PCR表达分析 | 第124-125页 |
| ·结果 | 第125-142页 |
| ·栉孔扇贝生长过程中PI3K-AKT-TOR、IGF-1r-MPK-FOXO及P53-Sestrin通路调控基因的表达分析 | 第125-131页 |
| ·PI3K-AKT-TOR通路基因表达差异分析 | 第125-127页 |
| ·IGF-1r-AMPK-FOXO通路基因表达差异分析 | 第127-130页 |
| ·P53-Sestrin通路基因表达差异分析 | 第130-131页 |
| ·栉孔扇贝繁殖周期中PI3K-AKT-TOR、IGF-1r-MPK-FOXO及P53-Sestrin通路调控基因的表达变化 | 第131-134页 |
| ·高温胁迫前后栉孔扇贝PI3K-AKT-TOR、IGF-1r-AMPK-FOXO及P53-Sestrin通路调控基因的表达变化 | 第134-142页 |
| ·高温胁迫下栉孔扇贝通路调控基因的表达分析 | 第134-137页 |
| ·高温胁迫前后栉孔扇贝通路调控基因的表达差异 | 第137-142页 |
| ·讨论 | 第142-145页 |
| ·PI3K/AKT/TOR、IGF-1r/AMPK/FOXO通路对生物体能量代谢及抗氧化能力的影响 | 第142-143页 |
| ·P53/Sestrin通路与PI3K/AKT/TOR、IGF-1r/AMPK/FOXO通路间的相互作用及胞内氧化压力对通路相关基因的影响 | 第143-145页 |
| ·糖原含量相关分子调控机制 | 第145页 |
| 结语 | 第145-147页 |
| 参考文献 | 第147-179页 |
| 附录 | 第179-180页 |
| 学术成果 | 第180-181页 |
| 致谢 | 第181-182页 |
