| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 前言 | 第17-27页 |
| 1 口服疫苗与纳米技术 | 第17-21页 |
| ·大分子药物与口服疫苗 | 第17-18页 |
| ·纳米技术 | 第18-19页 |
| ·纳米材料 | 第19页 |
| ·纳米载体 | 第19-21页 |
| 2 生物材料与壳聚糖 | 第21-23页 |
| ·生物材料 | 第21页 |
| ·壳聚糖简述 | 第21-22页 |
| ·壳聚糖基纳米药物载体的制备 | 第22-23页 |
| 3 本论文的选题依据以及研究内容 | 第23-27页 |
| ·选题依据 | 第23-25页 |
| ·研究内容 | 第25-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 第一章 油酰羧甲基壳聚糖(OCMCS)的制备和理化性质研究 | 第27-38页 |
| 引言 | 第27页 |
| 1 材料 | 第27-28页 |
| ·药品与试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 2 方法 | 第28-30页 |
| ·油酰羧甲基壳聚糖(OCMCS)的合成 | 第28-29页 |
| ·油酰羧甲基壳聚糖(OCMCS)的理化性质检测 | 第29页 |
| ·荧光标记产物的合成及荧光标记效率的测定 | 第29-30页 |
| 3 结果与讨论 | 第30-37页 |
| ·油酰羧甲基壳聚糖(OCMCS)的合成 | 第30-31页 |
| ·油酰羧甲基壳聚糖(OCMCS)的理化性质检测 | 第31-35页 |
| ·荧光标记OCMCS | 第35-37页 |
| 4 小结 | 第37-38页 |
| 第二章 OCMCS纳米材料的制备、表征及生物相容性评价 | 第38-53页 |
| 引言 | 第38页 |
| 1 材料 | 第38-39页 |
| ·药品与试剂 | 第38-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-42页 |
| ·超声自组装制备OCMCS纳米颗粒 | 第39页 |
| ·平均粒径与zeta电位的测定 | 第39页 |
| ·透射电镜(TEM)与扫描电镜(SEM)观察 | 第39-40页 |
| ·OCMCS纳米颗粒稳定性的测定 | 第40页 |
| ·溶血率的测定 | 第40-41页 |
| ·细胞毒性试验(MEFs、Caco-2) | 第41页 |
| ·组织病理学分析(鲤鱼) | 第41-42页 |
| ·Caco-2细胞对FITC-OCMCS纳米颗粒的摄取 | 第42页 |
| 3 结果与讨论 | 第42-51页 |
| ·纳米材料的制备与表征 | 第42-45页 |
| ·纳米材料的生物相容性评价 | 第45-48页 |
| ·Caco-2细胞对FITC-OCMCS纳米颗粒的摄取 | 第48-51页 |
| 4 小结 | 第51-53页 |
| 第三章 OCMCS纳米粒的黏膜粘附性与通透性研究 | 第53-70页 |
| 引言 | 第53页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| ·药品与试剂 | 第53-54页 |
| ·主要仪器设备 | 第54页 |
| 2 方法 | 第54-57页 |
| ·FD4荧光标记OCMCS纳米颗粒的合成及FD4标记效率的测定 | 第54-55页 |
| ·FD4-OCMCS纳米颗粒的性质检测 | 第55页 |
| ·FD4从荧光纳米颗粒上解离测定 | 第55页 |
| ·离体肠组织黏膜黏附性实验 | 第55页 |
| ·离体肠组织黏膜通透性试验 | 第55-56页 |
| ·Caco-2细胞致密单层模型的构建 | 第56页 |
| ·跨膜转运实验 | 第56-57页 |
| ·口服FD4-OCMCS纳米颗粒在鲤鱼体内的分布情况 | 第57页 |
| 3 结果与讨论 | 第57-68页 |
| ·荧光标记产物的合成及荧光标记效率的测定 | 第57-59页 |
| ·纳米材料对离体肠组织黏膜黏附性实验 | 第59-60页 |
| ·纳米材料对离体肠组织黏膜通透性试验 | 第60-62页 |
| ·Caco-2细胞致密单层模型的构建 | 第62-64页 |
| ·跨膜转运实验 | 第64-66页 |
| ·口服FD4-OCMCS纳米颗粒在鲤鱼体内的分布情况 | 第66-68页 |
| 4 小结 | 第68-70页 |
| 第四章 OCMCS纳米粒对气溶素的包载及对鲤鱼的口服免疫 | 第70-82页 |
| 引言 | 第70页 |
| 1 材料 | 第70-71页 |
| ·药品与试剂 | 第70-71页 |
| ·主要仪器设备 | 第71页 |
| 2 方法 | 第71-74页 |
| ·气溶素的粗提及浓度测定 | 第71-72页 |
| ·气溶素溶血价的测定 | 第72页 |
| ·载气溶素的OCMCS纳米颗粒的制备 | 第72-73页 |
| ·包封率的计算 | 第73页 |
| ·气溶素的体外释放 | 第73页 |
| ·载气溶素的OCMCS纳米颗粒对鲤鱼进行口服免疫 | 第73-74页 |
| ·ELISA实验检测鲤鱼血清中的抗体水平 | 第74页 |
| 3 结果与讨论 | 第74-80页 |
| ·气溶素的粗提及浓度测定 | 第74-75页 |
| ·气溶素溶血价的测定 | 第75-76页 |
| ·载气溶素的OCMCS纳米颗粒性质检测 | 第76-77页 |
| ·包封率的计算 | 第77-78页 |
| ·气溶素的体外释放 | 第78-80页 |
| ·ELISA实验检测鲤鱼血清中的抗体水平 | 第80页 |
| 4 小结 | 第80-82页 |
| 第五章 OCMCS纳米粒对pEGFP的包载及体外转染实验 | 第82-100页 |
| 引言 | 第82页 |
| 1 材料 | 第82-83页 |
| ·药品与试剂 | 第82-83页 |
| ·主要仪器设备 | 第83页 |
| 2 方法 | 第83-86页 |
| ·pEGFP-N_2的提取及电泳检测 | 第83页 |
| ·载pEGFP-N_2的OCMCS/DNA纳米粒及OCMCS-HA/DNA纳米粒的制备 | 第83-84页 |
| ·OCMCS/DNA纳米颗粒及OCMCS-HA/DNA纳米颗粒性质检测 | 第84页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第84页 |
| ·pEGFP-N_2的稳定性与完整性检测(双酶切实验与电泳检测) | 第84页 |
| ·pEGFP-N_2的包封率测定及体外释放 | 第84-85页 |
| ·细胞毒性实验 | 第85-86页 |
| ·Caco-2细胞对两种载基因纳米粒的吞噬实验 | 第86页 |
| ·体外转染实验 | 第86页 |
| 3 结果与讨论 | 第86-98页 |
| ·pEGFP-N_2的提取及电泳检测 | 第86-88页 |
| ·载pEGFP-N_2的OCMCS/DNA纳米粒及OCMCS-HA/DNA纳米粒的制备 | 第88-90页 |
| ·pEGFP-N_2的稳定性与完整性检测(双酶切实验与电泳检测) | 第90-91页 |
| ·pEGFP-N_2的包封率测定及体外释放 | 第91-93页 |
| ·细胞毒性实验 | 第93页 |
| ·Caco-2细胞对两种载基因纳米粒的吞噬实验 | 第93-95页 |
| ·体外转染实验 | 第95-98页 |
| 4 小结 | 第98-100页 |
| 第六章 载气溶素基因的OCMCS纳米颗粒对鲤鱼的口服免疫 | 第100-112页 |
| 引言 | 第100页 |
| 1. 材料 | 第100-101页 |
| ·药品与试剂 | 第100页 |
| ·主要仪器设备 | 第100-101页 |
| 2 方法 | 第101-103页 |
| ·pCDNA3.1-aerA的提取及电泳检测 | 第101页 |
| ·载aerA的OCMCS纳米颗粒及OCMCS-HA纳米颗粒的制备 | 第101页 |
| ·OCMCS/aerA纳米颗粒及OCMCS-HA/aerA纳米颗粒性质检测 | 第101页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第101页 |
| ·pCDNA3.1-aerA的稳定性与完整性检测(双酶切实验与电泳检测) | 第101-102页 |
| ·aerA的包封率测定及体外释放 | 第102-103页 |
| ·两种载基因纳米粒对鲤鱼进行口服免疫 | 第103页 |
| ·ELISA实验检测鲤鱼血清中的抗体水平 | 第103页 |
| 3 结果与讨论 | 第103-110页 |
| ·aerA的提取及电泳检测 | 第103-104页 |
| ·载aerA的OCMCSNPs及OCMCS-HANPs的制备 | 第104-105页 |
| ·aerA的稳定性与完整性检测(双酶切实验与电泳检测) | 第105-108页 |
| ·aerA的包封率测定及体外释放 | 第108-109页 |
| ·ELISA实验检测鲤鱼血清中的抗体水平 | 第109-110页 |
| 4 小结 | 第110-112页 |
| 全文总结 | 第112-116页 |
| 创新点 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-133页 |
| 附录 | 第133-135页 |
| 个人简历 | 第135页 |
| 所获荣誉及奖励 | 第135-136页 |
| 发表的学术论文 | 第136-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |