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枸杞LmP5CS基因克隆及表达分析

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 文献综述第8-19页
   ·植物抗逆基因工程研究进展第8-13页
     ·植物抗逆机制第8-10页
     ·植物抗逆相关基因克隆及转化研究进展第10-13页
   ·脯氨酸代谢作用的研究进展第13-16页
     ·脯氨酸代谢途径第13-15页
     ·脯氨酸合成酶基因克隆及转化研究进展第15-16页
   ·枸杞简介第16页
   ·本研究的目的意义、研究内容与技术路线第16-19页
     ·研究的目的意义第16-17页
     ·研究内容第17-18页
     ·技术路线第18-19页
第二章 枸杞 LmP5CS 基因的克隆第19-41页
   ·实验材料第19-21页
     ·植物材料第19页
     ·质粒和菌株第19页
     ·酶与其他试剂第19页
     ·主要实验仪器第19-20页
     ·实验所用培养基第20页
     ·实验所用主要试剂第20-21页
   ·实验方法第21-27页
     ·大肠杆菌 Top 10 感受态细胞的制备第21页
     ·质粒转化第21-22页
     ·质粒 DNA 的提取第22页
     ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳第22-23页
     ·琼脂糖凝胶 DNA 回收第23页
     ·枸杞叶片总 RNA 的提取第23-24页
     ·3′RACE 实验第24页
     ·枸杞 P5CS 基因的克隆第24-27页
     ·生物信息学分析第27页
   ·结果分析第27-37页
     ·枸杞总 RNA 提取第27-28页
     ·枸杞 LmP5CS 的克隆及序列分析第28-37页
   ·讨论第37-40页
     ·克隆技术第37-38页
     ·克隆过程常见问题第38-39页
     ·LmP5CS 基因克隆第39-40页
   ·小结第40-41页
第三章 枸杞 LmP5CS 基因的表达分析第41-56页
   ·实验材料第41-42页
     ·质粒和菌株第41页
     ·主要仪器第41页
     ·实验所用培养基第41-42页
     ·实验所用主要溶液第42页
   ·实验方法第42-47页
     ·LmP5CS 基因在枸杞盐处理下的表达和分析第42页
     ·脯氨酸的测定第42-43页
     ·表达载体 pH7m24GW,3 rc-LmP5CS 的构建第43-45页
     ·转化农杆菌 C58第45-46页
     ·烟草转化及分子鉴定第46-47页
   ·结果与分析第47-54页
     ·盐胁迫下 LmP5CS 基因在枸杞叶片中的表达第47页
     ·表达载体 pH7m24GW,3rc-LmP5CS 的构建第47-51页
     ·植物表达载体电击转化农杆菌 C58第51页
     ·转基因烟草的 PCR 检测第51-52页
     ·转基因烟草的 RT-PCR 检测第52-53页
     ·转基因烟草脯氨酸含量的测定第53-54页
   ·讨论第54-55页
     ·Prd29A 诱导启动子第54页
     ·载体构建第54-55页
   ·小结第55-56页
第四章 结论与展望第56-58页
   ·研究总结第56-57页
   ·展望第57-58页
参考文献第58-63页
发表论文和科研情况说明第63-64页
致谢第64页

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