中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-19页 |
·植物抗逆基因工程研究进展 | 第8-13页 |
·植物抗逆机制 | 第8-10页 |
·植物抗逆相关基因克隆及转化研究进展 | 第10-13页 |
·脯氨酸代谢作用的研究进展 | 第13-16页 |
·脯氨酸代谢途径 | 第13-15页 |
·脯氨酸合成酶基因克隆及转化研究进展 | 第15-16页 |
·枸杞简介 | 第16页 |
·本研究的目的意义、研究内容与技术路线 | 第16-19页 |
·研究的目的意义 | 第16-17页 |
·研究内容 | 第17-18页 |
·技术路线 | 第18-19页 |
第二章 枸杞 LmP5CS 基因的克隆 | 第19-41页 |
·实验材料 | 第19-21页 |
·植物材料 | 第19页 |
·质粒和菌株 | 第19页 |
·酶与其他试剂 | 第19页 |
·主要实验仪器 | 第19-20页 |
·实验所用培养基 | 第20页 |
·实验所用主要试剂 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-27页 |
·大肠杆菌 Top 10 感受态细胞的制备 | 第21页 |
·质粒转化 | 第21-22页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第22页 |
·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第22-23页 |
·琼脂糖凝胶 DNA 回收 | 第23页 |
·枸杞叶片总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
·3′RACE 实验 | 第24页 |
·枸杞 P5CS 基因的克隆 | 第24-27页 |
·生物信息学分析 | 第27页 |
·结果分析 | 第27-37页 |
·枸杞总 RNA 提取 | 第27-28页 |
·枸杞 LmP5CS 的克隆及序列分析 | 第28-37页 |
·讨论 | 第37-40页 |
·克隆技术 | 第37-38页 |
·克隆过程常见问题 | 第38-39页 |
·LmP5CS 基因克隆 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
第三章 枸杞 LmP5CS 基因的表达分析 | 第41-56页 |
·实验材料 | 第41-42页 |
·质粒和菌株 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·实验所用培养基 | 第41-42页 |
·实验所用主要溶液 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-47页 |
·LmP5CS 基因在枸杞盐处理下的表达和分析 | 第42页 |
·脯氨酸的测定 | 第42-43页 |
·表达载体 pH7m24GW,3 rc-LmP5CS 的构建 | 第43-45页 |
·转化农杆菌 C58 | 第45-46页 |
·烟草转化及分子鉴定 | 第46-47页 |
·结果与分析 | 第47-54页 |
·盐胁迫下 LmP5CS 基因在枸杞叶片中的表达 | 第47页 |
·表达载体 pH7m24GW,3rc-LmP5CS 的构建 | 第47-51页 |
·植物表达载体电击转化农杆菌 C58 | 第51页 |
·转基因烟草的 PCR 检测 | 第51-52页 |
·转基因烟草的 RT-PCR 检测 | 第52-53页 |
·转基因烟草脯氨酸含量的测定 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
·Prd29A 诱导启动子 | 第54页 |
·载体构建 | 第54-55页 |
·小结 | 第55-56页 |
第四章 结论与展望 | 第56-58页 |
·研究总结 | 第56-57页 |
·展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
发表论文和科研情况说明 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |