| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-22页 |
| ·酿酒酵母TOR途径研究概况 | 第8-13页 |
| ·酿酒酵母TOR复合物结构 | 第9-10页 |
| ·雷帕霉素敏感途径——TORC1 | 第10-13页 |
| ·蛋白激酶Sch9p的研究概述 | 第13-19页 |
| ·Sch9p与cAMP-PKA途径间的作用关系 | 第14页 |
| ·Sch9p是TORC1 的直接磷酸化靶蛋白 | 第14-16页 |
| ·Sch9p参与调节细胞营养利用和生长趋势 | 第16页 |
| ·Sch9p调控细胞应激反应 | 第16-19页 |
| ·Sch9p与自噬作用 | 第19页 |
| ·白念珠菌TOR途径研究进展 | 第19-21页 |
| ·本论文的研究内容及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-36页 |
| ·实验材料 | 第22-27页 |
| ·主要实验仪器 | 第22-23页 |
| ·主要使用的生化试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·常用溶液与缓冲液 | 第25-27页 |
| ·实验菌株、质粒及引物 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-36页 |
| ·菌株培养及保存方法 | 第28页 |
| ·质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第28-29页 |
| ·SDS碱裂解法小量制备质粒DNA | 第29页 |
| ·玻璃珠法提取酵母菌基因组DNA | 第29-30页 |
| ·PCR扩增DNA片断 | 第30页 |
| ·酶切 | 第30-31页 |
| ·乙醇沉淀纯化DNA片断 | 第31页 |
| ·DNA片断柱纯化 | 第31-32页 |
| ·连接 | 第32页 |
| ·乙酸锂法转化白念珠菌细胞 | 第32-33页 |
| ·白念珠菌细胞计数法 | 第33页 |
| ·生长曲线测定 | 第33页 |
| ·倍比稀释实验 | 第33-34页 |
| ·液体及固体菌丝发育实验方法 | 第34页 |
| ·小鼠毒力实验方法 | 第34页 |
| ·小鼠肾脏CFU实验方法 | 第34-35页 |
| ·生物信息学方法 | 第35-36页 |
| 第三章 CaSCH9 基因缺失株构建及基因克隆 | 第36-50页 |
| ·白念珠菌CaSCH9 基因生物信息学分析 | 第36-40页 |
| ·白念珠菌CaSCH9 基因敲除 | 第40-46页 |
| ·CaSCH9 基因敲除盒构建 | 第40-43页 |
| ·使用URA-Blaster法敲除CaSCH9 基因 | 第43-46页 |
| ·CaSCH9 基因的克隆及整合菌株的构建 | 第46-48页 |
| ·CaSCH9 基因克隆后连至载体pRC2312 上 | 第46-47页 |
| ·整合菌株的构建 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-50页 |
| 第四章 CaSCH9 基因缺失株的功能研究 | 第50-64页 |
| ·缺失CaSCH9 基因会影响白念珠菌细胞生长 | 第50-55页 |
| ·CaSCH9 基因缺失株的菌落及细胞偏小 | 第50-52页 |
| ·CaSCH9 基因缺失会影响细胞周期 | 第52-55页 |
| ·CaSCH9 基因缺失会导致白念珠菌对TOR途径抑制剂敏感 | 第55-56页 |
| ·CaSCH9 基因缺失株对不同条件的生长状况 | 第56-62页 |
| ·CaSCH9 缺失株对H_2O_2敏感，但对其他氧化胁迫条件不敏感 | 第56-57页 |
| ·CaSCH9 基因缺失株对高浓度Li~+敏感，而非对高渗胁迫敏感 | 第57-58页 |
| ·缺失CaSCH9 基因不影响菌株在不同碳源上的生长 | 第58-59页 |
| ·CaSCH9 基因缺失株对细胞壁完整性破坏剂不敏感 | 第59-60页 |
| ·CaSCH9 缺失株对温度不敏感 | 第60-62页 |
| ·小结及讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 白念珠菌CaSCH9 基因对菌丝发育的影响 | 第64-71页 |
| ·CaSCH9 基因缺失株在液体菌丝诱导剂中表型 | 第64-68页 |
| ·CaSCH9 基因缺失导致在Lee氏培养基中菌丝发育速度变慢 | 第65-66页 |
| ·CaSCH9 基因缺失株在SLAD培养基中菌丝生成速度更快 | 第66-67页 |
| ·结果小结 | 第67-68页 |
| ·CaSCH9 基因缺失株在固体菌丝诱导剂中表型 | 第68-70页 |
| ·小结与讨论 | 第70-71页 |
| 第六章 CaSCH9 基因影响白念珠菌致病性和抗药性 | 第71-80页 |
| ·缺失CaSCH9 基因会导致全身念珠菌症致病力下降 | 第71-74页 |
| ·感染小鼠肾脏白念珠菌CFU实验 | 第71-72页 |
| ·小鼠存活率实验 | 第72-73页 |
| ·小鼠肾脏切片PAS染色 | 第73-74页 |
| ·小结与讨论 | 第74页 |
| ·CaSCH9 基因缺失株对抗真菌药物的耐受情况 | 第74-75页 |
| ·CaSCH9 基因缺失株对Ca~(2+)、Mg~(2+)不敏感 | 第75-76页 |
| ·白念珠菌TOR途径相关缺失株对抗真菌药的敏感性 | 第76-78页 |
| ·小结与讨论 | 第78-80页 |
| 第七章 总结与展望 | 第80-82页 |
| ·主要工作总结 | 第80-81页 |
| ·展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-94页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
