摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 前言 | 第12-28页 |
·兔病毒性出血症概况 | 第12页 |
·病原学 | 第12-15页 |
·临床症状及病理变化 | 第15-16页 |
·临床症状 | 第15-16页 |
·病理变化 | 第16页 |
·流行病学特点 | 第16-17页 |
·病毒生活周期 | 第17-18页 |
·诊断方法 | 第18-20页 |
·电镜法 | 第18-19页 |
·反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第19页 |
·凝(HA)和血凝抑制(HI)试验 | 第19页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第19页 |
·环介导恒温快速扩增(LAMP) | 第19-20页 |
·实时荧光定量PCR(real-time PCR) | 第20页 |
·防控和疫苗 | 第20-21页 |
·研究蛋白质相互作用的方法 | 第21-24页 |
·酵母双杂交 | 第21-23页 |
·免疫共沉淀 | 第23页 |
·GST-pull down | 第23页 |
·表达克隆系统技术 | 第23-24页 |
·病毒铺覆蛋白试验(VOPBA) | 第24页 |
·铁蛋白研究进展 | 第24-25页 |
·本研究的目的和意义 | 第25-28页 |
第二章 兔铁蛋白重链截短基因的克隆及序列分析 | 第28-36页 |
·材料 | 第28页 |
·实验动物与病毒 | 第28页 |
·菌株及载体 | 第28页 |
·酶及主要试剂 | 第28页 |
·方法 | 第28-32页 |
·基因扩增的策略 | 第28-29页 |
·扩增引物的设计 | 第29页 |
·细胞总RNA的提取 | 第29页 |
·重组质粒的构建 | 第29-31页 |
·克隆质粒的提取与测序鉴定 | 第31页 |
·表达载体的构建 | 第31页 |
·重组蛋白的表达 | 第31-32页 |
·重组蛋白的纯化 | 第32页 |
·结果 | 第32-33页 |
·序列分析及表达载体的鉴定 | 第32页 |
·FTH截短重组蛋白表达纯化 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-36页 |
第三章 兔铁蛋白重链与RHDV相互作用位点的鉴定 | 第36-54页 |
·材料和方法 | 第36-44页 |
·质粒、毒株及菌株 | 第36页 |
·主要化学试剂 | 第36页 |
·主要设备 | 第36-37页 |
·诱饵载体pGBKT7-X的构建及鉴定 | 第37-40页 |
·捕获载体pGBKT7-Y的构建及鉴定 | 第40-43页 |
·捕获载体pGADT7-Y的自激活检测和毒性检测 | 第43页 |
·pGBKT7-X与pGADT7-Y共转化酵母菌AH109 | 第43页 |
·ELISA验证FTH截短重组蛋白与RHDV具有相互作用 | 第43-44页 |
·FTH截短重组蛋白中和RHDV的血凝试验 | 第44页 |
·结果 | 第44-49页 |
·RHDV病毒蛋白基因的扩增 | 第44-45页 |
·诱饵载体pGBKT7-X的构建及鉴定 | 第45页 |
·诱饵载体pGBKT7-X的毒性检测分析 | 第45-46页 |
·诱饵载体pGBKT7-X的自激活检测分析 | 第46页 |
·捕获载体pGADT7-Y的构建及鉴定 | 第46-47页 |
·捕获载体pGADT7-Y的自激活和毒性检测 | 第47页 |
·酵母双杂交验证结果 | 第47-48页 |
·ELISA验证结果 | 第48-49页 |
·血凝活性实验验证结果 | 第49页 |
·讨论 | 第49-54页 |
第四章 全文结论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
附录 | 第64-66页 |
作者简历 | 第66页 |