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与兔出血症病毒相互作用的截短兔肝脏铁蛋白重链鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 前言第12-28页
   ·兔病毒性出血症概况第12页
   ·病原学第12-15页
   ·临床症状及病理变化第15-16页
     ·临床症状第15-16页
     ·病理变化第16页
   ·流行病学特点第16-17页
   ·病毒生活周期第17-18页
   ·诊断方法第18-20页
     ·电镜法第18-19页
     ·反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)第19页
     ·凝(HA)和血凝抑制(HI)试验第19页
     ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第19页
     ·环介导恒温快速扩增(LAMP)第19-20页
     ·实时荧光定量PCR(real-time PCR)第20页
   ·防控和疫苗第20-21页
   ·研究蛋白质相互作用的方法第21-24页
     ·酵母双杂交第21-23页
     ·免疫共沉淀第23页
     ·GST-pull down第23页
     ·表达克隆系统技术第23-24页
     ·病毒铺覆蛋白试验(VOPBA)第24页
   ·铁蛋白研究进展第24-25页
   ·本研究的目的和意义第25-28页
第二章 兔铁蛋白重链截短基因的克隆及序列分析第28-36页
   ·材料第28页
     ·实验动物与病毒第28页
     ·菌株及载体第28页
     ·酶及主要试剂第28页
   ·方法第28-32页
     ·基因扩增的策略第28-29页
     ·扩增引物的设计第29页
     ·细胞总RNA的提取第29页
     ·重组质粒的构建第29-31页
     ·克隆质粒的提取与测序鉴定第31页
     ·表达载体的构建第31页
     ·重组蛋白的表达第31-32页
     ·重组蛋白的纯化第32页
   ·结果第32-33页
     ·序列分析及表达载体的鉴定第32页
     ·FTH截短重组蛋白表达纯化第32-33页
   ·讨论第33-36页
第三章 兔铁蛋白重链与RHDV相互作用位点的鉴定第36-54页
   ·材料和方法第36-44页
     ·质粒、毒株及菌株第36页
     ·主要化学试剂第36页
     ·主要设备第36-37页
     ·诱饵载体pGBKT7-X的构建及鉴定第37-40页
     ·捕获载体pGBKT7-Y的构建及鉴定第40-43页
     ·捕获载体pGADT7-Y的自激活检测和毒性检测第43页
     ·pGBKT7-X与pGADT7-Y共转化酵母菌AH109第43页
     ·ELISA验证FTH截短重组蛋白与RHDV具有相互作用第43-44页
     ·FTH截短重组蛋白中和RHDV的血凝试验第44页
   ·结果第44-49页
     ·RHDV病毒蛋白基因的扩增第44-45页
     ·诱饵载体pGBKT7-X的构建及鉴定第45页
     ·诱饵载体pGBKT7-X的毒性检测分析第45-46页
     ·诱饵载体pGBKT7-X的自激活检测分析第46页
     ·捕获载体pGADT7-Y的构建及鉴定第46-47页
     ·捕获载体pGADT7-Y的自激活和毒性检测第47页
     ·酵母双杂交验证结果第47-48页
     ·ELISA验证结果第48-49页
     ·血凝活性实验验证结果第49页
   ·讨论第49-54页
第四章 全文结论第54-56页
参考文献第56-62页
致谢第62-64页
附录第64-66页
作者简历第66页

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