| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·引言 | 第12页 |
| ·奶牛乳房炎链球菌致病因子研究进展 | 第12-14页 |
| ·链球菌 GapC 蛋白的研究进展 | 第14-16页 |
| ·奶牛乳房炎链球菌的疫苗研究进展 | 第16-17页 |
| ·全菌体灭活疫苗 | 第16页 |
| ·荚膜多糖疫苗 | 第16页 |
| ·基因工程亚单位疫苗 | 第16-17页 |
| ·大肠杆菌表面展示系统研究进展 | 第17-18页 |
| ·基于外膜蛋白的展示系统 | 第17页 |
| ·基于细菌表面附属物的展示系统 | 第17-18页 |
| ·基于脂蛋白的展示系统 | 第18页 |
| ·基于毒力因子的展示系统 | 第18页 |
| ·大肠杆菌基因 RED 重组技术研究进展 | 第18-21页 |
| ·研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 表面展示链球菌 GapC1-150aa大肠杆菌的构建 | 第22-42页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·菌种、质粒及宿主 | 第22页 |
| ·主要试验用试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-34页 |
| ·引物的设计与合成 | 第24-26页 |
| ·模板质粒 pKD3 和 pQE30/lpp‘ompA-gapC1 的制备 | 第26页 |
| ·打靶片段 H1-Lpp’ompA’gapC1-linker-cm-H2 制备 | 第26-28页 |
| ·对照菌株打靶片段 H1-Lpp’ompA -linker-cm-H2 制备 | 第28-30页 |
| ·Dpn I 处理打靶片段 | 第30页 |
| ·表达 RED 重组酶菌株的制备和同源重组 | 第30-32页 |
| ·重组菌株 Western-blotting 检测 GapC1-150蛋白表达 | 第32页 |
| ·重组大肠杆菌生长曲线的测定 | 第32-33页 |
| ·GapC1-150aa蛋白表面定位的鉴定 | 第33-34页 |
| ·实验数据处理 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-42页 |
| ·基因打靶片段构建结果 | 第34-36页 |
| ·重组子的鉴定结果 | 第36-38页 |
| ·重组蛋白的 Western blot 检测结果 | 第38页 |
| ·全菌体 ELISA 检测结果 | 第38-39页 |
| ·流式细胞术检测结果 | 第39页 |
| ·间接免疫荧光观察结果 | 第39-40页 |
| ·重组菌的生长曲线结果 | 第40-42页 |
| 第三章 重组菌 GapC1-150aa免疫原性研究 | 第42-52页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·菌株和实验动物 | 第42页 |
| ·工具酶和化学试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-45页 |
| ·免疫原的制备 | 第42-43页 |
| ·试验动物分组及免疫接种 | 第43-44页 |
| ·攻毒试验 | 第44页 |
| ·间接 ELISA 测定抗体水平、亚类 | 第44页 |
| ·细胞因子检测 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-52页 |
| ·GapC1-150aa蛋白的纯化结果 | 第45-46页 |
| ·抗体水平检测结果 | 第46-47页 |
| ·抗体亚类检测结果 | 第47-48页 |
| ·细胞因子检测结果 | 第48-50页 |
| ·重组菌的免疫保护结果 | 第50-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 附录 | 第62-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 作者简历 | 第74页 |
