| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表（Abbreviation) | 第10-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-23页 |
| ·猪链球菌病的概述 | 第11页 |
| ·毒力相关因子研究进展 | 第11-19页 |
| ·定植：粘附＆侵入上皮表面 | 第11-13页 |
| ·血液中存活&扩散 | 第13-16页 |
| ·炎性反应激活&败血性休克 | 第16-17页 |
| ·中枢神经系统的侵入&脑膜炎 | 第17-19页 |
| ·细菌双组分信号转导系统功能的研究进展 | 第19-23页 |
| ·双组分信号转导系统的组成元件和信号模式 | 第19-20页 |
| ·细菌双组分信号转导系统与细菌致病性 | 第20-21页 |
| ·双组份信号转导系统NisKR和BceRS功能的研究进展 | 第21-23页 |
| 2. 研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 3. 材料与方法 | 第24-41页 |
| ·材料 | 第24-31页 |
| ·菌株、质粒和培养条件 | 第24-25页 |
| ·动物和细胞 | 第25-26页 |
| ·主要药品、试剂、试剂盒与仪器 | 第26页 |
| ·主要培养基及抗生素配制 | 第26-27页 |
| ·主要溶液配制 | 第27-29页 |
| ·引物 | 第29-31页 |
| ·方法 | 第31-41页 |
| ·猪链球菌2型基因组DNA的提取 | 第31页 |
| ·PCR扩增 | 第31页 |
| ·PCR产物或酶切产物的回收与纯化 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第32页 |
| ·DNA与载体的连接反应 | 第32页 |
| ·连接产物的转化 | 第32页 |
| ·质粒的小量制备(碱裂解法) | 第32-33页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第33页 |
| ·链球菌电转化 | 第33-34页 |
| ·基因缺失突变株的蹄选和鉴定 | 第34-35页 |
| ·生长特性 | 第35-36页 |
| ·溶血活性 | 第36页 |
| ·细胞粘附和侵入实验 | 第36-37页 |
| ·猪中性粒细胞(PMN)介导的杀菌实验 | 第37页 |
| ·RAW264.7吞噬实验&吞噬后存活实验 | 第37-38页 |
| ·小鼠存活实验 | 第38页 |
| ·组织载菌量 | 第38页 |
| ·蛋白质的诱导表达 | 第38页 |
| ·蛋白质的鉴定(SDS-PAGE) | 第38-39页 |
| ·蛋白纯化 | 第39页 |
| ·DAP-seq | 第39-40页 |
| ·猪链球菌RNA的提取&RNA-seq | 第40页 |
| ·统计分析 | 第40-41页 |
| 4. 结果与分析 | 第41-50页 |
| ·突变株△nisKR和△bceRS的构建与鉴定 | 第41-42页 |
| ·反应调控因子NisR和BceR的表达 | 第42-43页 |
| ·突变株△nisKR和△bceRS生物学特性研究 | 第43-48页 |
| ·生长速率分析 | 第43页 |
| ·溶血活性分析 | 第43-44页 |
| ·细胞粘附和侵入实验 | 第44页 |
| ·猪中性粒细胞(PMN)介导的杀菌实验 | 第44-45页 |
| ·RAW264.7吞噬实验&吞噬后存活实验 | 第45-46页 |
| ·小鼠存活实验 | 第46页 |
| ·组织载菌量 | 第46-48页 |
| ·对猪链球菌2型毒力调控的初步研究 | 第48-50页 |
| ·RNA-seq结果 | 第48-49页 |
| ·DAP-seq结果 | 第49-50页 |
| 5. 讨论 | 第50-52页 |
| ·双组分信号转导系统NisKR和BceRS的选择 | 第50页 |
| ·双组分信号转导系统与细菌致病性 | 第50-51页 |
| ·双组分信号转导系统调控机制初步研究 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-65页 |
| Publications | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |