猪嗜血支原体的猪体感染试验和小鼠感染试验研究
| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-30页 |
| 第一章 猪嗜血支原体病研究进展 | 第12-24页 |
| 1 猪嗜血支原体病研究概况 | 第12页 |
| 2 猪嗜血支原体的病原学 | 第12-15页 |
| ·形态 | 第12-13页 |
| ·分类 | 第13页 |
| ·分子病原学 | 第13-15页 |
| 3 猪嗜血支原体病流行病学 | 第15-16页 |
| ·流行概况 | 第15页 |
| ·传播途径 | 第15-16页 |
| ·感染宿主 | 第16页 |
| 4 猪嗜血支原体病的临床症状及病理变化 | 第16-17页 |
| 5 猪嗜血支原体病的血液学研究 | 第17页 |
| 6 猪嗜血支原体病的致病机理 | 第17-19页 |
| 7 猪嗜血支原体病的诊断 | 第19-21页 |
| ·猪嗜血支原体病的临床诊断 | 第19页 |
| ·猪嗜血支原体病的实验室诊断 | 第19-21页 |
| 8 猪嗜血支原体的防治 | 第21页 |
| 9 猪嗜血支原体病动物模型研究 | 第21-24页 |
| 参考文献 | 第24-30页 |
| 第二篇 试验研究 | 第30-76页 |
| 第二章 猪嗜血支原体荧光定量PCR检测方法的建立 | 第30-44页 |
| 摘要 | 第30页 |
| 1 材料和方法 | 第30-35页 |
| ·菌种 | 第30-31页 |
| ·试剂和菌株 | 第31页 |
| ·引物 | 第31页 |
| ·提取猪嗜血支原体DNA | 第31-32页 |
| ·荧光定量PCR扩增 | 第32页 |
| ·目的片段的回收和克隆 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的提取 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定及测序分析 | 第34页 |
| ·荧光定量PCR条件优化 | 第34页 |
| ·熔解曲线分析 | 第34页 |
| ·荧光定量PCR的敏感性和标准曲线的建立 | 第34-35页 |
| ·实时荧光定量PCR重复性 | 第35页 |
| ·数据分析 | 第35页 |
| 2 结果 | 第35-38页 |
| ·构建标准阳性质粒 | 第35-36页 |
| ·实时荧光定量PCR体系的优化 | 第36页 |
| ·实时荧光定量PCR的特异性 | 第36-37页 |
| ·实时荧光定量PCR的敏感性和标准曲线的建立 | 第37-38页 |
| ·实时荧光定量PCR的重复性试验 | 第38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| ABSTRACT | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 第三章 猪嗜血支原体猪体感染试验 | 第44-60页 |
| 摘要 | 第44-45页 |
| 1 材料和方法 | 第45-47页 |
| ·试剂、菌株和实验动物 | 第45页 |
| ·动物试验及分组 | 第45-46页 |
| ·菌血症 | 第46页 |
| ·液学和生物化学指标变化 | 第46页 |
| ·抗体和细胞因子 | 第46页 |
| ·病理剖检和组织病理学检查 | 第46-47页 |
| ·数据分析 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-53页 |
| ·临床表现 | 第47-48页 |
| ·体温 | 第48页 |
| ·体重 | 第48-49页 |
| ·菌血症检测 | 第49-50页 |
| ·液学和生物化学指标检测 | 第50-51页 |
| ·猪嗜血支原体血液中含量和血液动力学参数的相关性 | 第51-52页 |
| ·抗体和细胞因子检测结果 | 第52-53页 |
| ·组织病理学变化 | 第53页 |
| 3 讨论 | 第53-56页 |
| ABSTRACT | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-60页 |
| 第四章 小鼠细胞因子荧光定量PCR检测方法的建立 | 第60-76页 |
| 摘要 | 第60-61页 |
| 1 材料和方法 | 第61-66页 |
| ·试剂和菌株以及实验动物 | 第61页 |
| ·细胞因子引物的设计 | 第61-62页 |
| ·RNA的提取和cDNA的合成 | 第62页 |
| ·脾脏淋巴细胞的分离 | 第62页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第62-63页 |
| ·目的片段的扩增 | 第63-64页 |
| ·重组质粒提取 | 第64页 |
| ·酶切鉴定重组质粒及测序分析 | 第64-65页 |
| ·熔解曲线分析 | 第65页 |
| ·实时荧光定量PCR敏感性和标准曲线的建立 | 第65页 |
| ·实时荧光定量PCR重复性 | 第65页 |
| ·小鼠攻毒试验 | 第65页 |
| ·数据分析 | 第65-66页 |
| 2 结果 | 第66-72页 |
| ·构建标准阳性质粒 | 第66-67页 |
| ·特异性 | 第67-68页 |
| ·敏感性和标准曲线 | 第68页 |
| ·实时荧光定量PCR的重复性试验 | 第68-72页 |
| ·小鼠感染试验 | 第72页 |
| 3 讨论 | 第72-74页 |
| ABSTRACT | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-76页 |
| 全文总结 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |