中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-16页 |
缩略词表 | 第16-17页 |
第一章 引言 | 第17-33页 |
第一节 海水中胃肠道感染病毒的种类及其危害 | 第17-24页 |
·胃肠道感染病毒的种类 | 第17-20页 |
·胃肠道感染病毒的主要危害 | 第20-21页 |
·胃肠道感染病毒的来源及其在水环境中的存活迁移 | 第21-24页 |
第二节 水环境中胃肠道感染病毒的检测 | 第24-28页 |
·水环境中病毒的浓缩方法 | 第24-26页 |
·水环境中病毒的检测方法 | 第26-28页 |
第三节 病原微生物的风险评价 | 第28-30页 |
·水环境中病原微生物风险评价概述 | 第29页 |
·水环境中病原微生物风险评价步骤 | 第29-30页 |
第四节 本论文的选题依据、研究目的、主要内容及技术路线 | 第30-33页 |
·选题依据 | 第30页 |
·研究目的、意义及主要内容 | 第30-32页 |
·技术路线 | 第32-33页 |
第二章 胃肠道感染病毒 ICC-qPCR 方法的建立 | 第33-56页 |
第一节 研究背景 | 第33-34页 |
第二节 肠道病毒 ICC-qPCR 技术的建立 | 第34-48页 |
·试验材料 | 第34页 |
·试验试剂及仪器 | 第34-36页 |
·主要试剂配制 | 第36-37页 |
·脊髓灰质炎病毒细胞培养 | 第37-39页 |
·PV 探针法 real-time PCR 方法的建立 | 第39-45页 |
·肠道病毒 ICC-qPCR 技术方法学评价 | 第45-48页 |
第三节 轮状病毒 ICC-qPCR 方法的建立 | 第48-55页 |
·试验材料 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48-49页 |
·主要试剂配制 | 第49页 |
·轮状病毒(SA11、Wa)细胞培养 | 第49-50页 |
·RV 探针法 real-time PCR 方法的建立 | 第50-54页 |
·轮状病毒 ICC-qPCR 技术方法学评价 | 第54-55页 |
第四节 小结 | 第55-56页 |
第三章 胃肠道感染病毒 ELISA 和特异性 RT-PCR 方法的建立 | 第56-69页 |
第一节 研究背景 | 第56-57页 |
第二节 脊髓灰质炎病毒研究方法的建立 | 第57-65页 |
·参考病毒株 | 第57页 |
·试验试剂及仪器 | 第57-58页 |
·主要试剂配制 | 第58-59页 |
·双抗夹心法 ELISA 方法的建立 | 第59-63页 |
·PV 特异性 RT-PCR 方法的建立 | 第63-65页 |
第三节 轮状病毒研究方法的建立 | 第65-68页 |
·参考病毒株 | 第65页 |
·试验试剂及仪器 | 第65页 |
·RV 检测的 ELISA 法建立 | 第65-66页 |
·RV 的特异性 RT-PCR 方法的建立 | 第66-68页 |
第四节 小结 | 第68-69页 |
第四章 海水中胃肠道感染病毒浓缩方法的建立 | 第69-78页 |
第一节 研究背景 | 第69-70页 |
第二节 研究方法 | 第70-74页 |
·试验材料 | 第70页 |
·试验试剂及仪器 | 第70-71页 |
·主要试剂配制 | 第71页 |
·超滤浓缩法的建立 | 第71-72页 |
·膜吸附-洗脱法的建立 | 第72-73页 |
·病毒回收率的计算 | 第73页 |
·浓缩过程对病毒感染性的损伤检测 | 第73-74页 |
第三节 试验结果 | 第74-75页 |
·病毒回收率 | 第74-75页 |
·组织培养结果 | 第75页 |
第四节 轮状病毒回收率的测定 | 第75-76页 |
·试验材料 | 第75页 |
·RV 回收率测定 | 第75-76页 |
·RV 回收率的计算 | 第76页 |
第五节 讨论 | 第76-77页 |
·回收方法的选择 | 第76页 |
·前处理对病毒回收率的影响 | 第76-77页 |
·浓缩体积的选择 | 第77页 |
第六节 小结 | 第77-78页 |
第五章 方法实例—渤海湾天津近岸海域表层海水中胃肠道感染病毒的检测 | 第78-101页 |
第一节 研究背景 | 第78页 |
第二节 ICC-qPCR 方法在海水中胃肠道感染病毒检测的应用 | 第78-87页 |
·参考病毒株 | 第78页 |
·试验试剂及仪器 | 第78-79页 |
·水样采集 | 第79-80页 |
·病毒浓缩 | 第80页 |
·ICC-qPCR 方法的影响因素条件优化 | 第80-83页 |
·海水中感染性肠道病毒的 ICC-qPCR 方法检测 | 第83-86页 |
·海水中感染性轮状病毒的 ICC-qPCR 方法检测 | 第86-87页 |
第三节 ELISA 和特异性 PCR 方法的联合对海水的检测 | 第87-90页 |
·参考病毒株 | 第87页 |
·试验试剂及仪器 | 第87-88页 |
·海水中 PV 的 ELISA 和特异性 RT-PCR 方法检测 | 第88-89页 |
·海水中 RV 的 ELISA 和特异性 RT-PCR 方法检测 | 第89-90页 |
第四节 个例研究-未知病毒的鉴定 | 第90-95页 |
·电镜检测 | 第91-92页 |
·分子生物学方法鉴定 | 第92-95页 |
·个例验证结果 | 第95页 |
第五节 讨论 | 第95-99页 |
·病毒滴度的影响因素 | 第95-96页 |
·ICC-qPCR 方法对渤海湾表层海水中 EV 和 RV 的污染分析 | 第96-98页 |
·主要胃肠道感染病毒在渤海湾海水中的流行趋势 | 第98页 |
·渤海湾海水 ELISA 结合特异性 PCR 技术与 ICC-qPCR 检测结果的对比 | 第98-99页 |
第六节 小结 | 第99-101页 |
第六章 肠道病毒在自然海水中的存活规律初探 | 第101-112页 |
第一节 研究背景 | 第101-102页 |
第二节 病毒的存活规律初探 | 第102-111页 |
·参考病菌株 | 第102页 |
·试验试剂及耗材 | 第102页 |
·主要试剂配制 | 第102-103页 |
·PV 核酸转染方法的建立 | 第103-104页 |
·PV 大片段逐步步移 PCR 方法的建立 | 第104-106页 |
·存活试验设计 | 第106-107页 |
·试验结果 | 第107-108页 |
·讨论 | 第108-111页 |
第三节 小结 | 第111-112页 |
第七章 水环境中胃肠道感染病毒的人体健康风险评价 | 第112-130页 |
第一节 研究背景 | 第112页 |
第二节 水样中病毒阳性样品的验证 | 第112-121页 |
·水样中脊髓灰质炎病毒阳性样品的验证 | 第112-118页 |
·水样中轮状病毒阳性样品的验证 | 第118-121页 |
第三节 胃肠道感染病毒引起的人体健康风险评价 | 第121-128页 |
·常用的风险评价模型 | 第121-122页 |
·常用风险评价模型参数的确定 | 第122-124页 |
·脊髓灰质炎病毒潜在的人体健康风险 | 第124-125页 |
·轮状病毒潜在的人体健康风险 | 第125-126页 |
·讨论 | 第126-128页 |
第四节 小结 | 第128-130页 |
第八章 综合分析与总结 | 第130-135页 |
第一节 综合分析 | 第130-132页 |
第二节 创新点 | 第132-133页 |
第三节 研究建议与展望 | 第133-135页 |
·海洋环境中肠道病毒存活机理的探讨 | 第133页 |
·胃肠道感染病毒人体健康安全建议值的提出 | 第133页 |
·两种病毒在同一细胞系中增殖的可能性 | 第133页 |
·ELISA 和特异性 RT-PCR 联合定性反映不可培养病毒的感染性 | 第133-135页 |
参考文献 | 第135-147页 |
致谢 | 第147-148页 |
个人简历及发表文章 | 第148-149页 |
附录 A | 第149-151页 |
附录 B | 第151-154页 |