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间充质干细胞在海藻酸钠水凝胶中生长、分化及其与软骨细胞共培养的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第1章 绪论第10-22页
   ·关节软骨组织损伤第10-12页
     ·软骨组织简介第10页
     ·关节软骨的组成、结构和功能第10-11页
     ·关节软骨组织损伤第11-12页
   ·关节软骨损伤的临床治疗第12-13页
   ·软骨组织工程第13-21页
     ·软骨组织工程基本概念第13-14页
     ·种子细胞第14-16页
     ·生物支架材料第16-17页
     ·可溶性因子第17-18页
     ·体外构建软骨组织第18-19页
     ·共培养在软骨组织工程研究中的应用第19-21页
   ·本文研究的内容、目的与意义第21-22页
第2章 兔骨髓间充质干细胞和关节软骨细胞的分离与鉴定第22-39页
   ·引言第22页
   ·材料与方法第22-28页
     ·实验材料及试剂第22-23页
     ·兔骨髓间充质干细胞(rMSCs)的分离步骤第23-24页
     ·兔关节软骨细胞(rACs)的分离步骤第24页
     ·鬼笔环肽染色第24-25页
     ·细胞流式仪检测MSCs表面特征抗原第25页
     ·rMSCs的生长曲线第25页
     ·rMSCs三向诱导分化实验第25-27页
     ·rACs的鉴定第27-28页
   ·结果第28-36页
     ·rMSCs的分离第28-30页
     ·rMSCs的鉴定第30-34页
     ·关节软骨组织的酶消化过程第34-35页
     ·rACs的鉴定第35-36页
   ·讨论第36-38页
   ·本章小结第38-39页
第3章 间充质干细胞在海藻酸钙水凝胶微球中生长特性的研究第39-52页
   ·引言第39页
   ·材料与方法第39-42页
     ·实验材料及试剂第39-40页
     ·细胞包埋第40页
     ·微球粒径的测定第40-41页
     ·细胞死活检测第41页
     ·MTT检测细胞活性第41页
     ·细胞代谢测定第41页
     ·显微镜观察第41页
     ·苏木素/伊红(H&E)染色第41-42页
     ·海藻酸凝胶微球的溶解及细胞回收第42页
   ·结果第42-49页
     ·不同粒径载细胞海藻酸凝胶微球的制备第42-43页
     ·不同粒径微球中的细胞死活染色第43-44页
     ·不同粒径微球中的细胞活性检测第44页
     ·长期培养过程中凝胶微球中细胞活性和代谢第44-46页
     ·长期培养过程中凝胶微球中细胞死活染色第46页
     ·载细胞微球的显微镜观察组织学鉴定第46-47页
     ·海藻酸微球中的细胞脱落现象第47-48页
     ·海藻酸钠支架溶解和细胞回收第48-49页
   ·讨论第49-51页
   ·本章小结第51-52页
第4章 海藻酸凝胶微球包埋的间充质干细胞与软骨细胞共培养初探第52-66页
   ·引言第52页
   ·材料与方法第52-55页
     ·实验材料及试剂第52-53页
     ·Transwell培养体系的建立第53页
     ·DNA含量测定第53-54页
     ·GAG/DNA量的测定第54页
     ·细胞死活检测第54页
     ·细胞活性测定第54页
     ·细胞周期测定第54-55页
     ·荧光实时定量PCR第55页
   ·结果第55-63页
     ·基于Transwell的共培养体系的建立第55-56页
     ·海藻酸水凝胶微球中的细胞形态第56-58页
     ·细胞活性第58-59页
     ·DNA和GAG含量第59-61页
     ·细胞周期第61页
     ·RNA检测第61-63页
   ·讨论第63-65页
   ·本章小结第65-66页
第5章 全文总结与展望第66-68页
参考文献第68-80页
致谢第80页

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