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猪圆环病毒2型捕获ELISA抗体检测方法的建立与临床应用

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-12页
1 文献综述第12-22页
   ·猪圆环病毒研究进展第12-17页
     ·猪圆环病毒的病原学研究进展第12-14页
     ·猪圆环病毒2型的流行病学研究第14-15页
     ·猪圆环病毒2型的致病机理研究第15-16页
     ·猪圆环病毒2型的致病性第16-17页
   ·猪圆环病毒2型检测方法研究进展第17-20页
     ·抗原的检测方法第17-19页
     ·抗体的检测方法第19-20页
   ·猪圆环病毒2型单克隆抗体研究进展第20-22页
2 研究的目的及意义第22-23页
3 实验材料与方法第23-34页
   ·实验材料第23-26页
     ·抗原、血清、细胞及实验动物第23页
     ·培养基及主要试剂第23页
     ·主要溶液及其配制第23-25页
     ·主要仪器设备第25-26页
   ·猪圆环病毒2型单克隆抗体的制备第26-31页
     ·单克隆抗体制备的技术流程第26页
     ·抗原的制备及SDS-PAGE电泳第26-27页
     ·动物免疫第27页
     ·SP2/0骨髓瘤细胞的制备第27-28页
     ·免疫脾细胞的制备第28页
     ·饲养细胞的制备第28页
     ·细胞融合第28-29页
     ·间接ELISA方法筛选阳性克隆第29页
     ·有限稀释法亚克隆第29-30页
     ·腹水的制备第30页
     ·腹水抗体的纯化第30页
     ·单克隆抗体的Western Blot鉴定第30-31页
   ·猪圆环病毒2型捕获ELISA抗体检测方法的建立第31-33页
     ·捕获ELISA程序第31页
     ·包被抗体最佳浓度与捕获抗原最佳浓度的确定第31-32页
     ·捕获抗原最佳温育时间的确定第32页
     ·按照已优化的条件包被96孔酶标板第32页
     ·被检血清最佳稀释度的确定第32页
     ·被检血清最佳反应时间的确定第32页
     ·酶标二抗最佳工作浓度的确定第32页
     ·酶标二抗最佳反应时间的确定第32-33页
     ·临界值的确定第33页
     ·敏感性试验第33页
     ·特异性试验第33页
     ·重复性试验第33页
   ·猪圆环病毒2型捕获ELISA抗体检测方法的临床应用第33-34页
4 结果与分析第34-53页
   ·猪圆环病毒2型单克隆抗体的制备第34-39页
     ·抗原的SDS-PAGE分析第34页
     ·抗原的最佳包被浓度第34-35页
     ·免疫小鼠抗体效价的测定第35-36页
     ·细胞融合结果及亚克隆第36页
     ·杂交瘤细胞培养上清的效价测定第36-37页
     ·腹水效价的测定第37-38页
     ·单克隆抗体的Western Blot鉴定第38-39页
   ·猪圆环病毒2型捕获ELISA抗体检测方法的建立第39-48页
     ·包被抗体最佳浓度与捕获抗原最佳浓度的确定第39-40页
     ·捕获抗原最佳温育时间的确定第40-41页
     ·被检血清最佳稀释度的确定第41-42页
     ·被检血清最佳反应时间的确定第42-43页
     ·酶标二抗最佳工作浓度的确定第43-44页
     ·酶标二抗最佳反应时间的确定第44-45页
     ·临界值的确定第45页
     ·敏感性试验第45-46页
     ·特异性试验第46页
     ·重复性试验第46-48页
   ·临床血清检测结果第48-53页
5 讨论与结论第53-56页
   ·讨论第53-55页
   ·结论第55-56页
参考文献第56-62页
致谢第62页

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