摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-22页 |
·猪圆环病毒研究进展 | 第12-17页 |
·猪圆环病毒的病原学研究进展 | 第12-14页 |
·猪圆环病毒2型的流行病学研究 | 第14-15页 |
·猪圆环病毒2型的致病机理研究 | 第15-16页 |
·猪圆环病毒2型的致病性 | 第16-17页 |
·猪圆环病毒2型检测方法研究进展 | 第17-20页 |
·抗原的检测方法 | 第17-19页 |
·抗体的检测方法 | 第19-20页 |
·猪圆环病毒2型单克隆抗体研究进展 | 第20-22页 |
2 研究的目的及意义 | 第22-23页 |
3 实验材料与方法 | 第23-34页 |
·实验材料 | 第23-26页 |
·抗原、血清、细胞及实验动物 | 第23页 |
·培养基及主要试剂 | 第23页 |
·主要溶液及其配制 | 第23-25页 |
·主要仪器设备 | 第25-26页 |
·猪圆环病毒2型单克隆抗体的制备 | 第26-31页 |
·单克隆抗体制备的技术流程 | 第26页 |
·抗原的制备及SDS-PAGE电泳 | 第26-27页 |
·动物免疫 | 第27页 |
·SP2/0骨髓瘤细胞的制备 | 第27-28页 |
·免疫脾细胞的制备 | 第28页 |
·饲养细胞的制备 | 第28页 |
·细胞融合 | 第28-29页 |
·间接ELISA方法筛选阳性克隆 | 第29页 |
·有限稀释法亚克隆 | 第29-30页 |
·腹水的制备 | 第30页 |
·腹水抗体的纯化 | 第30页 |
·单克隆抗体的Western Blot鉴定 | 第30-31页 |
·猪圆环病毒2型捕获ELISA抗体检测方法的建立 | 第31-33页 |
·捕获ELISA程序 | 第31页 |
·包被抗体最佳浓度与捕获抗原最佳浓度的确定 | 第31-32页 |
·捕获抗原最佳温育时间的确定 | 第32页 |
·按照已优化的条件包被96孔酶标板 | 第32页 |
·被检血清最佳稀释度的确定 | 第32页 |
·被检血清最佳反应时间的确定 | 第32页 |
·酶标二抗最佳工作浓度的确定 | 第32页 |
·酶标二抗最佳反应时间的确定 | 第32-33页 |
·临界值的确定 | 第33页 |
·敏感性试验 | 第33页 |
·特异性试验 | 第33页 |
·重复性试验 | 第33页 |
·猪圆环病毒2型捕获ELISA抗体检测方法的临床应用 | 第33-34页 |
4 结果与分析 | 第34-53页 |
·猪圆环病毒2型单克隆抗体的制备 | 第34-39页 |
·抗原的SDS-PAGE分析 | 第34页 |
·抗原的最佳包被浓度 | 第34-35页 |
·免疫小鼠抗体效价的测定 | 第35-36页 |
·细胞融合结果及亚克隆 | 第36页 |
·杂交瘤细胞培养上清的效价测定 | 第36-37页 |
·腹水效价的测定 | 第37-38页 |
·单克隆抗体的Western Blot鉴定 | 第38-39页 |
·猪圆环病毒2型捕获ELISA抗体检测方法的建立 | 第39-48页 |
·包被抗体最佳浓度与捕获抗原最佳浓度的确定 | 第39-40页 |
·捕获抗原最佳温育时间的确定 | 第40-41页 |
·被检血清最佳稀释度的确定 | 第41-42页 |
·被检血清最佳反应时间的确定 | 第42-43页 |
·酶标二抗最佳工作浓度的确定 | 第43-44页 |
·酶标二抗最佳反应时间的确定 | 第44-45页 |
·临界值的确定 | 第45页 |
·敏感性试验 | 第45-46页 |
·特异性试验 | 第46页 |
·重复性试验 | 第46-48页 |
·临床血清检测结果 | 第48-53页 |
5 讨论与结论 | 第53-56页 |
·讨论 | 第53-55页 |
·结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62页 |