摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
中英文缩写对照表 | 第16-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-37页 |
1 前言 | 第17-18页 |
2 脂肪细胞的分化与其相关的转录因子 | 第18-23页 |
·脂肪细胞的来源及分化 | 第18-19页 |
·间充质干细胞 | 第18页 |
·脂肪母细胞 | 第18页 |
·前体脂肪细胞 | 第18页 |
·成熟脂肪细胞 | 第18-19页 |
·影响脂肪细胞分化的转录因子 | 第19-23页 |
·过氧化物酶体增殖物激活受体家族 | 第20-21页 |
·CAAT/增强子结合蛋白家族 | 第21-22页 |
·固醇调节元件结合蛋白家族 | 第22-23页 |
3 Wnt/β-catenin信号通路概述 | 第23-28页 |
·Wnt/β-catenin信号通路的主要成员 | 第23-25页 |
·Wnt蛋白 | 第23-24页 |
·Frizzled蛋白 | 第24页 |
·β-catenin蛋白 | 第24页 |
·Dishevelled蛋白 | 第24页 |
·LEF-1/TCF转录因子家族 | 第24-25页 |
·Wnt/β-catenin信号通路与脂肪形成 | 第25-28页 |
·Wnt/β-catenin信号通路的信号传递 | 第25-26页 |
·Wnt/β-catenin信号通路与脂肪形成 | 第26-27页 |
·Wnt/β-catenin信号通路调控脂肪形成的机制 | 第27-28页 |
4 APC基因家族的研究进展 | 第28-31页 |
·APC基因家族概述 | 第28页 |
·APC蛋白的结构特征 | 第28-30页 |
·APC基因家族的功能特征 | 第30页 |
·APC基因家族与Wnt/β-catenin信号通路 | 第30-31页 |
5 脂肪组织源性间充质干细胞概述 | 第31-34页 |
·脂肪组织源性间充质干细胞的特征 | 第31-32页 |
·脂肪组织源性间充质干细胞的分化潜能 | 第32-33页 |
·成脂分化潜能 | 第32页 |
·成肌分化潜能 | 第32-33页 |
·成骨分化潜能 | 第33页 |
·其他类型细胞分化潜能 | 第33页 |
·脂肪组织源性间充质干细胞的应用 | 第33-34页 |
6 多不饱和脂肪酸概述 | 第34-36页 |
·多不饱和脂肪酸的分类 | 第34页 |
·多不饱和脂肪酸的生物学功能 | 第34-36页 |
·多不饱和脂肪酸与脂肪代谢 | 第34-35页 |
·多不饱和脂肪酸与肿瘤形成 | 第35-36页 |
·不饱和脂肪酸与系统免疫 | 第36页 |
7 研究的目的与意义 | 第36-37页 |
第二章 猪APC家族的分离克隆、生物信息学和组织表达分析 | 第37-58页 |
1 前言 | 第37页 |
2 试验材料和试剂 | 第37-39页 |
·试验材料 | 第37-38页 |
·试验动物 | 第37页 |
·组织样品 | 第37-38页 |
·载体和菌株 | 第38页 |
·试验主要试剂、仪器和主要溶液的配制 | 第38-39页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·主要溶液的配制 | 第38-39页 |
·主要分子生物学软件 | 第39页 |
·主要数据库 | 第39页 |
3 试验方法 | 第39-43页 |
·猪APC1和APC2基因的分离克隆 | 第39页 |
·RT-PCR扩增目的基因 | 第39-40页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第40页 |
·载体连接 | 第40页 |
·转化连接产物 | 第40页 |
·阳性克隆的鉴定和测序 | 第40页 |
·猪APC基因家族的生物信息学分析 | 第40-41页 |
·猪APC基因家族的染色体定位 | 第40-41页 |
·猪APC基因家族的序列分析 | 第41页 |
·猪APC基因家族氨基酸序列多重比对和进化分析 | 第41页 |
·猪APC基因家族的组织表达分析 | 第41-43页 |
·组织样品总RNA的提取 | 第41页 |
·总RNA的纯化 | 第41-42页 |
·反转录合成cDNA的第一条链 | 第42页 |
·组织表达分析 | 第42-43页 |
4 结果与分析 | 第43-54页 |
·猪APC基因家族的分离克隆与序列分析 | 第43-45页 |
·猪APC基因家族的生物信息学分析 | 第45-53页 |
·猪APC基因家族的染色体定位 | 第45页 |
·猪APC基因家族的氨基酸序列及其理化性质分析 | 第45-53页 |
·猪APC基因家族的组织表达分析 | 第53-54页 |
5 讨论 | 第54-58页 |
·猪APC基因家族的分离克隆与序列分析 | 第54-55页 |
·猪APC基因家族的生物信息学分析 | 第55-57页 |
·染色体定位 | 第55页 |
·保守结构域的预测 | 第55-56页 |
·蛋白进化分析 | 第56页 |
·启动子分析 | 第56-57页 |
·组织表达分析 | 第57-58页 |
第三章 多不饱和脂肪酸对猪ADSCs中APC基因家族表达的影响 | 第58-69页 |
1 前言 | 第58页 |
2 试验材料和试剂 | 第58-60页 |
·试验材料 | 第58-59页 |
·试验动物 | 第58页 |
·试验器械 | 第58-59页 |
·试验主要试剂、仪器和主要溶液的配制 | 第59-60页 |
·主要试剂 | 第59页 |
·主要仪器 | 第59页 |
·主要溶液的配制 | 第59-60页 |
3 试验方法 | 第60-63页 |
·猪ADSCs的分离培养 | 第60-61页 |
·猪ADSCs的分离 | 第60页 |
·猪ADSCs的传代培养 | 第60页 |
·猪ADSCs的冻存和复苏 | 第60-61页 |
·猪ADSCs的鉴定 | 第61-62页 |
·免疫组织化学 | 第61页 |
·分子生物学鉴定 | 第61-62页 |
·多不饱和脂肪酸的诱导处理 | 第62页 |
·细胞收集及总RNA的提取 | 第62页 |
·反转录合成cDNA的第一条链 | 第62页 |
·荧光定量PCR | 第62页 |
·荧光定量PCR引物的设计 | 第62页 |
·定量PCR体系及扩增条件 | 第62页 |
·统计分析 | 第62-63页 |
4 结果与分析 | 第63-67页 |
·猪ADSCs的分离培养 | 第63-64页 |
·猪ADSCs的鉴定 | 第64-65页 |
·免疫组织化学鉴定 | 第64页 |
·分子生物学鉴定 | 第64-65页 |
·多不饱和脂肪酸对猪ADSCs中APC基因家族表达的影响 | 第65-67页 |
·ω-3 PUFA对猪ADSCs中APC基因家族表达的影响 | 第65-66页 |
·ω-6 PUFA对猪ADSCs中APC基因家族表达的影响 | 第66-67页 |
5 讨论 | 第67-69页 |
·猪ADSCs的分离培养 | 第67页 |
·猪ADSCs的鉴定 | 第67页 |
·多不饱和脂肪酸对猪ADSCs中APC基因家族表达的影响 | 第67-69页 |
第四章 猪APC基因家族在脂肪细胞分化过程的作用 | 第69-80页 |
1 前言 | 第69-70页 |
2 试验材料和试剂 | 第70-71页 |
·试验材料 | 第70页 |
·试验动物 | 第70页 |
·试验器械 | 第70页 |
·试验主要试剂、仪器和主要溶液的配制 | 第70-71页 |
·主要试剂 | 第70页 |
·主要仪器 | 第70页 |
·主要溶液的配制 | 第70-71页 |
3 试验方法 | 第71-73页 |
·猪ADSCs细胞的分离培养 | 第71页 |
·猪ADSCs细胞的鉴定 | 第71页 |
·猪ADSCs诱导分化 | 第71-72页 |
·油红O染色 | 第72页 |
·细胞收集及总RNA的提取 | 第72页 |
·反转录合成cDNA的第一条链 | 第72页 |
·荧光定量PCR | 第72页 |
·荧光定量PCR引物的设计 | 第72页 |
·定量PCR体系及扩增条件 | 第72页 |
·Western Blot | 第72-73页 |
·细胞总蛋白提取 | 第72-73页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第73页 |
·免疫印迹 | 第73页 |
·统计分析 | 第73页 |
4 结果与分析 | 第73-77页 |
·猪ADSCs定向诱导分化为脂肪细胞 | 第73-75页 |
·形态学变化 | 第73-74页 |
·脂肪形成标志基因表达变化 | 第74-75页 |
·APC基因家族在脂肪细胞分化过程的作用 | 第75-76页 |
·Wnt/β-catenin信号通路相关基因在脂肪细胞分化过程中的表达 | 第76-77页 |
5 讨论 | 第77-80页 |
·猪ADSCs定向诱导分化为脂肪细胞 | 第77-78页 |
·APC基因家族在脂肪细胞分化过程的作用 | 第78-80页 |
主要创新点 | 第80页 |
下一步工作计划 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-91页 |
附录 | 第91-104页 |
致谢 | 第104页 |