摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
前言 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1 禽类的胚胎发育 | 第10-12页 |
·禽类的受精卵结构 | 第10页 |
·禽类胚胎发育 | 第10-11页 |
·鸡胚体外培养体系的发展 | 第11-12页 |
2 禽类胚胎期的转基因操作方法 | 第12-15页 |
·电转染法 | 第12-13页 |
·反转录病毒介导的转染法 | 第13页 |
·脂质体介导的转染方式 | 第13-15页 |
3 转基因动物检测方法 | 第15-16页 |
·感官水平识别 | 第15页 |
·分子水平的检测 | 第15页 |
·功能水平的检测 | 第15-16页 |
4 转基因动物研究的应用 | 第16-18页 |
·动物品种改良和抗病育种 | 第16页 |
·医用动物模型 | 第16-17页 |
·利用转基因动物作为生物反应器 | 第17-18页 |
5 本实验研究的目的意义 | 第18-19页 |
第二章 质粒的制备、脂质体与质粒的比例确定 | 第19-28页 |
1 材料与方法 | 第19-23页 |
·材料 | 第19-20页 |
·实验方法 | 第20-23页 |
2 结果与分析 | 第23-25页 |
·pEGFP-C2质粒载体的PCR鉴定 | 第23页 |
·质粒的线性化 | 第23-24页 |
·pEGFP-C2质粒-脂质体凝胶阻滞实验结果 | 第24-25页 |
3 讨论 | 第25-28页 |
·脂质体转染的原理及优越性 | 第25-26页 |
·影响脂质体介导的基因转染效率 | 第26页 |
·质粒与质粒的线性化 | 第26-28页 |
第三章 种蛋胚盘细胞转染实验及孵化 | 第28-34页 |
1 材料和方法 | 第28-29页 |
·材料 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-29页 |
2 结果与分析 | 第29-31页 |
·胚盘注射外源DNA结果 | 第29-30页 |
·胚盘注射外源DNA的PCR检查结果 | 第30-31页 |
·冰冻切片荧光检测 | 第31页 |
3 讨论 | 第31-34页 |
·胚盘注射转染方式 | 第31-32页 |
·胚盘注射效果的验证 | 第32-33页 |
·种蛋注射前的开口方式选择 | 第33-34页 |
第四章 转基因后代的生产与鉴定 | 第34-45页 |
1 材料和方法 | 第34-39页 |
·材料 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-39页 |
2 结果与分析 | 第39-42页 |
·PCR检测外源基因在未出壳G0代鹌鹑组织中的表达 | 第39页 |
·PCR检测外源基因在7日龄G0代鹌鹑组织中的表达 | 第39-40页 |
·PCR检测外源基因在成年G0代鹌鹑组织中的表达 | 第40-41页 |
·G0代鹌鹑内脏组织切片荧光观察 | 第41页 |
·杂交分析 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-45页 |
·转染效率的影响因素 | 第42-43页 |
·胚盘下腔的注射及开窗对鹌鹑胚发育的影响 | 第43页 |
·转基因G0代的生产和转基因G0代的杂交 | 第43-45页 |
全文结论与创新点 | 第45-46页 |
全文结论 | 第45页 |
创新点 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
附录 主要试剂的配制方法 | 第50-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53-54页 |
导师评阅表 | 第54页 |