缺镁胁迫下柑橘幼苗cDNA-AFLP分析
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| 1 植物缺镁的研究 | 第11-12页 |
| ·镁在植物中的传导和运输 | 第11-12页 |
| 2 缺镁对植物生长的影响 | 第12-13页 |
| 3 缺镁胁迫对植物生理生化的影响 | 第13-16页 |
| ·缺镁胁迫对植物同化物分配的影响 | 第13-14页 |
| ·缺镁对植物活性氧代谢的影响 | 第14-15页 |
| ·缺镁对植物基因表达的影响 | 第15页 |
| ·缺镁对其他离子吸收的影响 | 第15-16页 |
| 4 外源处理对缺镁植物适应性的影响 | 第16页 |
| 5 cDNA-AFLP 技术特点及应用 | 第16-17页 |
| 6 立项意义 | 第17-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-29页 |
| 1 试验材料与处理 | 第19页 |
| ·试验材料 | 第19页 |
| ·试验材料的培养及缺镁胁迫处理 | 第19页 |
| 2 方法 | 第19-29页 |
| ·根系和地上部干重及比叶重的测定 | 第19页 |
| ·Mg 离子含量的测定 | 第19页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第19-20页 |
| ·RNA 定量及纯度测定 | 第20页 |
| ·RNA 样品的电泳鉴定 | 第20页 |
| ·双链 cDNA 的合成 | 第20-21页 |
| ·cDNA 第一链的合成反应 | 第20-21页 |
| ·cDNA 第二链的合成反应 | 第21页 |
| ·双链 cDNA 的合成纯化 | 第21页 |
| ·cDNA 的酶切与接头连接 | 第21-22页 |
| ·cDNA-AFLP 预扩增 | 第22-23页 |
| ·cDNA-AFLP 选择性扩增 | 第23页 |
| ·扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23-24页 |
| ·电泳玻璃板的准备及组装 | 第23-24页 |
| ·银染 | 第24页 |
| ·相关试剂的制备 | 第24页 |
| ·具体流程 | 第24页 |
| ·差异片段回收和克隆 | 第24-26页 |
| ·差异片段回收及二次扩增 | 第24-25页 |
| ·特异基因片段的连接转化 | 第25-26页 |
| ·菌液 PCR 检测 | 第26页 |
| ·差异条带 DNA 阳性克隆的序列测定 | 第26页 |
| ·差异表达序列的生物信息学分析 | 第26页 |
| ·差异基因的荧光定量验证 | 第26-29页 |
| ·RNA 的提取 | 第26页 |
| ·单链 cDNA 的合成 | 第26页 |
| ·荧光定量 PCR | 第26-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-45页 |
| 1 缺 Mg 对柑橘实生苗生长的影响 | 第29-30页 |
| 2 缺 Mg 对柑橘根叶 Mg 含量的影响 | 第30页 |
| 3 总 RNA 的提取 | 第30-31页 |
| 4 双链 cDNA 的合成 | 第31页 |
| 5 cDNA-AFLP 结果 | 第31-32页 |
| ·预扩增结果检测 | 第31-32页 |
| ·选择性扩增结果检测 | 第32页 |
| 6 聚丙烯酰胺电泳结果 | 第32-34页 |
| 7 聚丙烯酰胺凝胶差异片段的选择 | 第34-35页 |
| 8 比对结果 | 第35-43页 |
| ·根尖差异片段比对结果分析 | 第40页 |
| ·叶片差异片段对比结果分析 | 第40-43页 |
| 9 荧光定量结果 | 第43-45页 |
| ·根尖荧光定量结果分析 | 第43页 |
| ·叶片荧光定量结果分析 | 第43-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-53页 |
| 1 缺 Mg 对柑橘生理生化指标的影响 | 第45页 |
| 2 应答缺镁胁迫逆境的特异基因的表达 | 第45-51页 |
| ·缺镁胁迫条件下根差异基因的表达 | 第45-48页 |
| ·生物调控与信号转导 | 第45-46页 |
| ·碳水化合物与能量代谢 | 第46-47页 |
| ·细胞运输 | 第47页 |
| ·细胞壁及骨架代谢 | 第47页 |
| ·蛋白质代谢 | 第47-48页 |
| ·胁迫响应相关蛋白 | 第48页 |
| ·缺镁胁迫条件下叶差异基因的表达 | 第48-51页 |
| ·碳水化合物与能量代谢 | 第49页 |
| ·蛋白质代谢 | 第49-50页 |
| ·胁迫响应相关蛋白 | 第50-51页 |
| 3 小结 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
