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反义3α-HSD/CR基因转化水稻的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-30页
   ·转基因水稻进展第12-14页
     ·转抗虫基因水稻第12-13页
     ·转抗病基因水稻第13-14页
     ·转抗逆性基因水稻第14页
     ·转高产优质基因水稻第14页
   ·基因沉默技术与反义 RNA 的研究第14-19页
     ·基因沉默技术第14-16页
     ·反义 RNA 技术的原理与应用第16-19页
   ·睾丸酮丛毛单胞菌关键酶基因 3α-HSD 研究进展第19-21页
     ·正义 3α-HSD 基因研究进展第19-21页
     ·反义 3α-HSD 基因研究进展第21页
   ·转基因植物的生物安全性第21-29页
     ·转基因植物食品安全性第22-25页
     ·转基因植物环境安全性第25-27页
     ·转基因植物安全性的管理防范途径第27-29页
   ·研究目的和意义第29-30页
2 材料和方法第30-38页
   ·材料第30页
     ·动植物材料第30页
     ·菌株第30页
     ·酶、生化试剂和试剂盒第30页
     ·主要实验设备第30页
   ·实验方法第30-38页
     ·明恢 86 水稻愈伤体系的建立第30-31页
     ·农杆菌介导转化水稻愈伤获得转基因苗第31-32页
     ·正反 3α-HSD/CR 基因特异引物的设计第32-33页
     ·目的基因 PCR 检测第33-34页
     ·GUS 组织化学染色检测第34页
     ·转基因植株后代的 ELISA 检测第34-35页
     ·转基因水稻降解胆固醇能力的测定第35页
     ·3α-HSD/CR 蛋白的诱导表达第35-37页
     ·3α-HSD/CR 蛋白的多克隆抗体制备第37-38页
3 结果分析第38-54页
   ·引物特异性检测第38页
   ·农杆菌介导的水稻愈伤受体系统条件优化第38-40页
   ·转基因水稻阳性植株的获得与检测第40-42页
   ·GUS 组织化学染色检测结果第42页
   ·ELISA 检测转基因水稻中 3α-HSD/CR 蛋白的表达第42-44页
   ·转基因水稻降解胆固醇能力的测定结果第44-47页
   ·3α-HSD/CR 蛋白抗体的制备第47-54页
     ·pET29a-3α-HSD/CR 载体的鉴定第47-51页
     ·3α-HSD/CR 蛋白的诱导条件优化第51-53页
     ·3α-HSD/CR 蛋白抗体的效价分析第53-54页
4 讨论第54-58页
   ·农杆菌介导的水稻愈伤转基因条件的优化第54-55页
   ·转反义基因植物的检测第55-56页
   ·转基因植物的转基因沉默在转基因植物安全中作用第56-58页
5 结论第58-59页
参考文献第59-67页
附录 1 缩写词第67-69页
附录 2 试验所用部分试剂配方第69-76页
致谢第76页

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