| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 前言 | 第7-19页 |
| ·微藻生物能源 | 第7-14页 |
| ·生物质能源的研究 | 第7页 |
| ·微藻生物能源的研究 | 第7-8页 |
| ·高油脂含量微藻的研究 | 第8-11页 |
| ·乙酰辅酶 A 羧化酶的研究现状 | 第11-14页 |
| ·三角褐指藻的研究 | 第14-15页 |
| ·叶绿体转化技术的研究 | 第15-17页 |
| ·研究目的及意义 | 第17-18页 |
| ·研究的创新点 | 第18-19页 |
| 2 三角褐指藻乙酰辅酶 A 羧化酶的功能特征的研究 | 第19-30页 |
| ·材料与方法 | 第19-22页 |
| ·实验材料与培养条件 | 第19页 |
| ·SMART 对 PtACC 蛋白进行功能域分析及系统进化分析 | 第19页 |
| ·PtACC-1 的同源克隆 | 第19-20页 |
| ·诱导 PtACC-1 在大肠杆菌细胞表达 | 第20页 |
| ·Western blot 检验 PtACC-1 的表达 | 第20-21页 |
| ·尼罗红荧光染色分析大肠杆菌细胞的中性脂含量 | 第21页 |
| ·ACCase 酶的活性分析与 GC-MS 分析脂肪酸成分 | 第21-22页 |
| ·结果与分析 | 第22-28页 |
| ·PtACC-1 的功能预测分析 | 第22-24页 |
| ·PtACC-1 的扩增和克隆 | 第24-25页 |
| ·Western blot 检测 PtACC-1 蛋白在大肠杆菌细胞的表达 | 第25-26页 |
| ·尼罗红荧光染色分析大肠杆菌细胞的中性脂含量 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌细胞脂肪酸成分的鉴定 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 3 三角褐指藻叶绿体高效表达载体的构建 | 第30-52页 |
| ·材料与方法 | 第30-37页 |
| ·实验材料与培养条件 | 第30页 |
| ·三角褐指藻叶绿体表达体系 pPtc-T 的构建 | 第30-31页 |
| ·三角褐指藻叶绿体表达体系 pPtc-eGFP 的构建 | 第31-32页 |
| ·三角褐指藻的电穿孔转化及抗生素筛选阳性藻株 | 第32-33页 |
| ·转化藻的 PCR 验证分析和 Southern blot 鉴定分析 | 第33-34页 |
| ·转化藻的荧光定量 PCR 分析 | 第34-35页 |
| ·转化藻的蛋白提取和 Western blot 分析 | 第35-36页 |
| ·转化藻的 ELISA 分析 | 第36页 |
| ·激光扫描共聚焦荧光显微镜分析转化藻的 eGFP 表达 | 第36页 |
| ·流式细胞仪分析转化藻的 eGFP 表达水平 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-50页 |
| ·三角褐指藻叶绿体表达体系 pPtc-T 的构建 | 第37-39页 |
| ·三角褐指藻叶绿体表达体系 pPtc-eGFP 的构建 | 第39-43页 |
| ·抗生素筛选阳性藻落 | 第43页 |
| ·转化藻的 PCR 验证分析和 Southern blot 分析 | 第43-45页 |
| ·转化藻的荧光定量分析 | 第45-46页 |
| ·转化藻的 eGFP 蛋白的 Western blot 及 Elisa 分析 | 第46-48页 |
| ·激光扫描共聚焦荧光显微镜分析转化藻的 eGFP 表达 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 4 三角褐指藻叶绿体表达乙酰辅酶 A 羧化酶 | 第52-63页 |
| ·材料与方法 | 第52-55页 |
| ·实验材料与培养条件 | 第52页 |
| ·三角褐指藻叶绿体表达体系 pPtc-PtACC-1 的构建 | 第52页 |
| ·大肠杆菌细胞中性脂含量的测定 | 第52-53页 |
| ·三角褐指藻的电穿孔转化及抗生素筛选阳性藻株 | 第53页 |
| ·转化藻的荧光定量分析 | 第53页 |
| ·转化藻的蛋白提取和 Western blot 分析 | 第53页 |
| ·激光扫描共聚焦荧光显微镜分析转化藻的脂质 | 第53-54页 |
| ·尼罗红荧光染色分析三角褐指藻细胞的中性脂含量 | 第54页 |
| ·ACCase 酶的活性分析与 GC-MS 分析脂肪酸成分 | 第54页 |
| ·傅里叶变换红外光谱仪分析多糖及脂质 | 第54-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-62页 |
| ·叶绿体表达载体 pPtc-PtACC-1 的构建 | 第55页 |
| ·大肠杆菌细胞中性脂含量的测定 | 第55-56页 |
| ·抗生素筛选阳性藻落 | 第56-57页 |
| ·转化藻的荧光定量分析 | 第57页 |
| ·转化藻 PtACC-1 蛋白的 Western blot 分析 | 第57-58页 |
| ·三转化藻细胞脂质的分析 | 第58-60页 |
| ·ACCase 酶的活性分析与 GC-MS 分析脂肪酸成分 | 第60-61页 |
| ·傅里叶变换红外吸收光谱仪分析多糖及脂质 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 附录 | 第72-73页 |
| 在校期间发表论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
