致谢 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
第一节 重要水产养殖甲壳类动物的病害防治 | 第12-20页 |
一、 重要水产养殖甲壳类动物的养殖现状及其主要病害 | 第12-15页 |
1、 重要水产养殖甲壳类动物的养殖现状 | 第12-13页 |
2、 重要水产养殖甲壳类动物的主要病害 | 第13-15页 |
二、 重要水产养殖甲壳类动物的病害防治 | 第15-20页 |
1、 甲壳类动物免疫防御机制的研究进展 | 第15-19页 |
2、 重要水产养殖甲壳类动物的主要病害防治措施 | 第19-20页 |
第二节 免疫增强剂CpG ODNs的研究概况 | 第20-27页 |
一、 CpG ODNs概况 | 第20-21页 |
1、 CpG ODNs的发现 | 第20页 |
2、 CpG ODNs的结构特征 | 第20-21页 |
二、 CpG ODNs在高等动物中的作用机制和应用研究 | 第21-25页 |
1、 CpG ODNs在脊椎动物中的作用机制 | 第21-24页 |
2、 CpG ODNs在脊椎动物中的应用研究 | 第24-25页 |
三、 CpG ODNs在重要水产养殖甲壳类动物中的研究进展 | 第25-27页 |
第三节 本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
第二章 实验材料及方法 | 第28-46页 |
第一节 实验材料 | 第28-30页 |
一、 实验动物、菌株和细胞 | 第28页 |
二、 实验用CpG ODNs的合成及鉴定 | 第28-29页 |
1、 用于个体实验的CpG ODNs的合成及鉴定 | 第28-29页 |
2、 用于细胞实验的CpG ODNs的合成及鉴定 | 第29页 |
三、主要的培养基和缓冲液 | 第29页 |
四、 主要化学试剂 | 第29-30页 |
五、 主要仪器设备 | 第30页 |
第二节 实验方法 | 第30-46页 |
一、 基因克隆及序列分析 | 第30-32页 |
二、 重组载体的构建 | 第32-33页 |
三、 蛋白质的原核重组表达、纯化及复性 | 第33-34页 |
四、 Western Blot | 第34-36页 |
五、 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第36-37页 |
六、 凡纳滨对虾血细胞原代培养及刺激 | 第37-38页 |
七、 亚细胞定位分析 | 第38页 |
八、 TNF-α的活性检测 | 第38-39页 |
九、 NO的含量检测 | 第39页 |
十、 双荧光系统报告基因检测实验 | 第39-40页 |
十一、凡纳滨对虾血细胞总数检测 | 第40页 |
十二、凡纳滨对虾新生循环血细胞数目的检测 | 第40-41页 |
十三、凡纳滨对虾血细胞吞噬能力的检测 | 第41-42页 |
十四、凡纳滨对虾血细胞凋亡比率检测 | 第42-43页 |
十五、凡纳滨对虾血细胞ROS水平的检测 | 第43页 |
十六、过氧化氢酶的活力检测 | 第43-44页 |
十七、溶菌酶的活力检测 | 第44-46页 |
第三章 实验结果 | 第46-66页 |
第一节 CpG ODNs免疫增强机制的探讨 | 第46-59页 |
一、 CpG ODNs诱发的免疫学效应及其细胞生物学特征 | 第46-50页 |
1、 CpG ODNs处理后凡纳滨对虾原代血细胞中TNF-α活力的变化 | 第46页 |
2、 CpG ODNs处理后凡纳滨对虾原代血细胞NO水平的变化 | 第46-47页 |
3、 CpG ODNs和氯喹处理后凡纳滨对虾原代血细胞中TNF-α活力的变化 | 第47-48页 |
4、 CpG ODNs和氯喹处理后凡纳滨对虾原代血细胞NO水平的变化 | 第48-49页 |
5、 CpG ODNs在凡纳滨对虾血细胞中的亚细胞定位 | 第49-50页 |
二、 CpG ODNs的免疫识别 | 第50-54页 |
1、 凡纳滨对虾LvTLRs-ECD的序列分析 | 第50-52页 |
2、 凡纳滨对虾LvTLRs-ECD与CpG ODNs的结合活性 | 第52-54页 |
三、 CpG ODNs免疫增强效果的评价 | 第54-59页 |
1、 CpG ODNs对凡纳滨对虾血细胞总数的影响 | 第54-55页 |
2、 CpG ODNs对凡纳滨对虾血细胞凋亡水平的影响 | 第55-56页 |
3、 CpG ODNs对凡纳滨对虾新生循环血细胞数目的影响 | 第56-57页 |
4、 CpG ODNs对凡纳滨对虾血细胞吞噬能力的影响 | 第57-58页 |
5、 CpG ODNs对凡纳滨对虾血细胞ROS水平的影响 | 第58-59页 |
第二节 CpG ODNs在甲壳类动物养殖中的初步应用 | 第59-66页 |
一、 CpG ODNs对中华绒螯蟹生长指标的影响 | 第59-60页 |
二、 CpG ODNs对中华绒螯蟹溶菌酶活力的影响 | 第60-61页 |
三、 CpG ODNs对中华绒螯蟹过氧化氢酶活力的影响 | 第61-62页 |
四、 CpG ODNs对中华绒螯蟹抗病力的影响 | 第62-63页 |
五、 CpG ODNs入胞机制及其细胞定位的探讨 | 第63-66页 |
第四章 分析与讨论 | 第66-73页 |
第一节 CpG ODNs的免疫增强作用与TLR信号通路相关 | 第66-68页 |
第二节 CpG ODNs可以调控凡纳滨对虾血细胞稳态及免疫力 | 第68-70页 |
第三节 CpG ODNs在甲壳类动物养殖中的应用前景广阔 | 第70-73页 |
第五章 结论 | 第73-75页 |
第六章 硕士在读期间完成的其他工作 | 第75-86页 |
第一节 研究背景 | 第75-76页 |
第二节 实验方法 | 第76-77页 |
第三节 实验结果 | 第77-83页 |
第四节 讨论 | 第83-86页 |
参考文献 | 第86-97页 |
作者简历及硕士在读期间完成和发表的论文 | 第97页 |