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CpG ODNs在水产养殖甲壳类动物中免疫增强作用机制及其应用的初步研究

致谢第1-5页
摘要第5-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-28页
 第一节 重要水产养殖甲壳类动物的病害防治第12-20页
  一、 重要水产养殖甲壳类动物的养殖现状及其主要病害第12-15页
   1、 重要水产养殖甲壳类动物的养殖现状第12-13页
   2、 重要水产养殖甲壳类动物的主要病害第13-15页
  二、 重要水产养殖甲壳类动物的病害防治第15-20页
   1、 甲壳类动物免疫防御机制的研究进展第15-19页
   2、 重要水产养殖甲壳类动物的主要病害防治措施第19-20页
 第二节 免疫增强剂CpG ODNs的研究概况第20-27页
  一、 CpG ODNs概况第20-21页
   1、 CpG ODNs的发现第20页
   2、 CpG ODNs的结构特征第20-21页
  二、 CpG ODNs在高等动物中的作用机制和应用研究第21-25页
   1、 CpG ODNs在脊椎动物中的作用机制第21-24页
   2、 CpG ODNs在脊椎动物中的应用研究第24-25页
  三、 CpG ODNs在重要水产养殖甲壳类动物中的研究进展第25-27页
 第三节 本研究的目的及意义第27-28页
第二章 实验材料及方法第28-46页
 第一节 实验材料第28-30页
  一、 实验动物、菌株和细胞第28页
  二、 实验用CpG ODNs的合成及鉴定第28-29页
   1、 用于个体实验的CpG ODNs的合成及鉴定第28-29页
   2、 用于细胞实验的CpG ODNs的合成及鉴定第29页
  三、主要的培养基和缓冲液第29页
  四、 主要化学试剂第29-30页
  五、 主要仪器设备第30页
 第二节 实验方法第30-46页
  一、 基因克隆及序列分析第30-32页
  二、 重组载体的构建第32-33页
  三、 蛋白质的原核重组表达、纯化及复性第33-34页
  四、 Western Blot第34-36页
  五、 酶联免疫吸附实验(ELISA)第36-37页
  六、 凡纳滨对虾血细胞原代培养及刺激第37-38页
  七、 亚细胞定位分析第38页
  八、 TNF-α的活性检测第38-39页
  九、 NO的含量检测第39页
  十、 双荧光系统报告基因检测实验第39-40页
  十一、凡纳滨对虾血细胞总数检测第40页
  十二、凡纳滨对虾新生循环血细胞数目的检测第40-41页
  十三、凡纳滨对虾血细胞吞噬能力的检测第41-42页
  十四、凡纳滨对虾血细胞凋亡比率检测第42-43页
  十五、凡纳滨对虾血细胞ROS水平的检测第43页
  十六、过氧化氢酶的活力检测第43-44页
  十七、溶菌酶的活力检测第44-46页
第三章 实验结果第46-66页
 第一节 CpG ODNs免疫增强机制的探讨第46-59页
  一、 CpG ODNs诱发的免疫学效应及其细胞生物学特征第46-50页
   1、 CpG ODNs处理后凡纳滨对虾原代血细胞中TNF-α活力的变化第46页
   2、 CpG ODNs处理后凡纳滨对虾原代血细胞NO水平的变化第46-47页
   3、 CpG ODNs和氯喹处理后凡纳滨对虾原代血细胞中TNF-α活力的变化第47-48页
   4、 CpG ODNs和氯喹处理后凡纳滨对虾原代血细胞NO水平的变化第48-49页
   5、 CpG ODNs在凡纳滨对虾血细胞中的亚细胞定位第49-50页
  二、 CpG ODNs的免疫识别第50-54页
   1、 凡纳滨对虾LvTLRs-ECD的序列分析第50-52页
   2、 凡纳滨对虾LvTLRs-ECD与CpG ODNs的结合活性第52-54页
  三、 CpG ODNs免疫增强效果的评价第54-59页
   1、 CpG ODNs对凡纳滨对虾血细胞总数的影响第54-55页
   2、 CpG ODNs对凡纳滨对虾血细胞凋亡水平的影响第55-56页
   3、 CpG ODNs对凡纳滨对虾新生循环血细胞数目的影响第56-57页
   4、 CpG ODNs对凡纳滨对虾血细胞吞噬能力的影响第57-58页
   5、 CpG ODNs对凡纳滨对虾血细胞ROS水平的影响第58-59页
 第二节 CpG ODNs在甲壳类动物养殖中的初步应用第59-66页
  一、 CpG ODNs对中华绒螯蟹生长指标的影响第59-60页
  二、 CpG ODNs对中华绒螯蟹溶菌酶活力的影响第60-61页
  三、 CpG ODNs对中华绒螯蟹过氧化氢酶活力的影响第61-62页
  四、 CpG ODNs对中华绒螯蟹抗病力的影响第62-63页
  五、 CpG ODNs入胞机制及其细胞定位的探讨第63-66页
第四章 分析与讨论第66-73页
 第一节 CpG ODNs的免疫增强作用与TLR信号通路相关第66-68页
 第二节 CpG ODNs可以调控凡纳滨对虾血细胞稳态及免疫力第68-70页
 第三节 CpG ODNs在甲壳类动物养殖中的应用前景广阔第70-73页
第五章 结论第73-75页
第六章 硕士在读期间完成的其他工作第75-86页
 第一节 研究背景第75-76页
 第二节 实验方法第76-77页
 第三节 实验结果第77-83页
 第四节 讨论第83-86页
参考文献第86-97页
作者简历及硕士在读期间完成和发表的论文第97页

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