| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-27页 |
| ·脂肪酶简介 | 第11-15页 |
| ·脂肪酶的来源和特点 | 第11-12页 |
| ·脂肪酶的结构及催化机理 | 第12-15页 |
| ·脂肪酶的应用 | 第15-18页 |
| ·食品工业 | 第15页 |
| ·医药领域 | 第15-16页 |
| ·洗涤剂行业 | 第16-17页 |
| ·制浆造纸工业 | 第17页 |
| ·化妆品行业 | 第17-18页 |
| ·皮革行业 | 第18页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第18-21页 |
| ·毕赤酵母表达系统的特点 | 第18-19页 |
| ·毕赤酵母表达系统的组成及构建 | 第19-21页 |
| ·影响重组蛋白在毕赤酵母中高效表达的因素 | 第21-24页 |
| ·外源基因内在特性 | 第21页 |
| ·信号肽分泌效率 | 第21-22页 |
| ·外源基因的基因量 | 第22页 |
| ·蛋白的翻译后加工 | 第22-24页 |
| ·ARL的研究进展 | 第24-25页 |
| ·ARL的分离和表征 | 第24页 |
| ·优化抗辐射不动杆菌发酵条件提高ARL产量 | 第24-25页 |
| ·ARL在毕赤酵母的表达 | 第25页 |
| ·本课题研究的意义和内容 | 第25-27页 |
| 第二章 N端延伸肽提高ARL在毕赤酵母中的表达水平 | 第27-51页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·材料与方法 | 第27-41页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·分子克隆用酶及试剂 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·实验仪器设备 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-49页 |
| ·重组质粒的构建 | 第41-43页 |
| ·分泌表达epARL毕赤酵母重组子的构建及筛选 | 第43-46页 |
| ·产epARL的毕赤酵母重组子发酵产酶分析 | 第46-49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第三章 构建epARL多拷贝重组毕赤酵母及产酶分析 | 第51-61页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·材料与方法 | 第51-53页 |
| ·菌株和质粒 | 第51页 |
| ·分子克隆用酶和试剂 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·实验仪器设备 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-60页 |
| ·构建质粒pHKA-epARL及多拷贝质粒 | 第53-54页 |
| ·多拷贝质粒双酶切鉴定 | 第54-55页 |
| ·重组酵母三丁酸甘油脂乳化板筛选 | 第55-56页 |
| ·重组菌拷贝数鉴定 | 第56-58页 |
| ·多拷贝重组菌摇瓶发酵产酶分析 | 第58-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 第四章 共表达HAC1s提高多拷贝epARL毕赤酵母的产量 | 第61-69页 |
| ·引言 | 第61页 |
| ·材料与方法 | 第61-64页 |
| ·实验菌株和质粒 | 第61页 |
| ·分子克隆用酶及试剂 | 第61-62页 |
| ·培养基 | 第62页 |
| ·实验仪器设备 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-67页 |
| ·重组子的筛选和鉴定 | 第64页 |
| ·多拷贝ARL重组菌胞内表达HAC1s对产酶的影响 | 第64-65页 |
| ·共表达HAC1s对多拷贝重组菌UPR相关基因mRNA水平的影响 | 第65-67页 |
| ·本章小结 | 第67-69页 |
| 结论与展望 | 第69-71页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 本论文的创新之处 | 第70页 |
| 展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 答辩委员会对论文的评定意见 | 第77页 |