绒山羊骨骼肌miRNAs及其靶基因表达谱分析
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| ·绒山羊简介 | 第10页 |
| ·骨骼肌的发育及其调控过程 | 第10-11页 |
| ·骨骼肌的发育 | 第10页 |
| ·骨骼肌发育的调控过程 | 第10-11页 |
| ·miRNA与骨骼肌发育 | 第11-16页 |
| ·miRNA的发现及特点 | 第12页 |
| ·miRNA的合成及作用过程 | 第12-13页 |
| ·miRNA的鉴定方法 | 第13-14页 |
| ·miRNA靶基因预测方法 | 第14-15页 |
| ·miRNA在骨骼肌中的表达及研究进展 | 第15-16页 |
| ·本研究的意义 | 第16-17页 |
| 2 绒山羊骨骼肌miRNA的表达分析 | 第17-24页 |
| ·试验材料 | 第17-18页 |
| ·试验样品 | 第17页 |
| ·试剂和仪器 | 第17页 |
| ·引物合成 | 第17-18页 |
| ·试验方法 | 第18-20页 |
| ·RNA提取 | 第18-19页 |
| ·miRNAcDNA合成 | 第19页 |
| ·反转录PCR | 第19页 |
| ·miRNA克隆测序 | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第20页 |
| ·结果分析 | 第20-22页 |
| ·miRNA反转录PCR检测结果 | 第20-21页 |
| ·miRNA实时定量荧光PCR结果 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22-24页 |
| 3 绒山羊骨骼肌miRNA靶基因的表达分析 | 第24-32页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·试验样品 | 第24页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第24页 |
| ·引物合成 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-28页 |
| ·RNA提取 | 第25页 |
| ·mRNAcDNA合成 | 第25-26页 |
| ·miRNA靶基因筛选及检测 | 第26-27页 |
| ·靶基因回收和克隆测序 | 第27-28页 |
| ·结果分析 | 第28-31页 |
| ·总RNA提取结果 | 第28页 |
| ·miRNA靶基因PAGE电泳结果 | 第28页 |
| ·miRNAMTFP图谱 | 第28-31页 |
| ·靶基因测序结果 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 4 绒山羊骨骼肌细胞培养 | 第32-36页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·试验样品 | 第33页 |
| ·试剂和仪器 | 第33页 |
| ·试验方法 | 第33-35页 |
| ·绒山羊胚胎骨骼肌细胞的分离和培养 | 第33页 |
| ·骨骼肌细胞纯化 | 第33-34页 |
| ·细胞传代 | 第34页 |
| ·细胞冷冻与复苏 | 第34页 |
| ·骨骼肌细胞鉴定 | 第34-35页 |
| ·结果分析 | 第35-36页 |
| ·绒山羊骨骼肌细胞的培养 | 第35页 |
| ·骨骼肌细胞鉴定 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36页 |
| 5 miR-133载体的构建及细胞转染 | 第36-45页 |
| ·前体miR-133载体的构建 | 第37-41页 |
| ·试验材料 | 第37-38页 |
| ·试验方法 | 第38-40页 |
| ·结果分析 | 第40-41页 |
| ·细胞转染 | 第41-44页 |
| ·试验材料 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-42页 |
| ·结果分析 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 6 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录 | 第52-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
