| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 绪论 | 第11-24页 |
| ·酶的定向进化 | 第11-13页 |
| ·酶的定向进化简介 | 第11页 |
| ·定向进化的步骤 | 第11-13页 |
| ·纤维素酶 | 第13-15页 |
| ·纤维素 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶 | 第14页 |
| ·内切纤维素酶 | 第14-15页 |
| ·细胞表面展示-释放系统 | 第15-23页 |
| ·细胞表面展示系统 | 第15-18页 |
| ·冰核蛋白（INP） | 第18-19页 |
| ·蛋白内含子（intein） | 第19-23页 |
| ·立题依据 | 第23-24页 |
| 2 实验材料 | 第24-29页 |
| ·菌种和质粒 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·主要试剂及配制方法 | 第26-29页 |
| 3 CPCEL 5A 表面展示-释放系统的构建 | 第29-43页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·扩增目的基因 | 第29-30页 |
| ·载体的制备 | 第30页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第30-31页 |
| ·感受态的制作与化学转化 | 第31-32页 |
| ·PCR 验证 | 第32页 |
| ·表达融合蛋白 | 第32-33页 |
| ·底物(短链 RAC)配制 | 第33页 |
| ·M9 平盘的配制方法 | 第33-34页 |
| ·透明圈实验 | 第34页 |
| ·实验结果与讨论 | 第34-42页 |
| ·CpCel 5A 细胞表面展示-释放系统的构建 | 第34-37页 |
| ·CpCel 5A 细胞表面展示释放效果检测 | 第37-42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 4 利用细胞表面展示-可控释放载体构建纤维素酶的突变库 | 第43-50页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·易错 PCR | 第43-44页 |
| ·载体的制备 | 第44页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第44页 |
| ·感受态的制作与转化 | 第44页 |
| ·PCR 验证 | 第44页 |
| ·透明圈方法进行筛选 | 第44-45页 |
| ·实验结果与讨论 | 第45-49页 |
| ·突变库的构建 | 第45-48页 |
| ·纤维素酶突变库的筛选 | 第48-49页 |
| 小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55页 |