中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-12页 |
第1章 绪论 | 第12-27页 |
·转基因植物的概述 | 第12-16页 |
·转基因植物的发展概况 | 第12-13页 |
·转基因植物的安全性评价 | 第13-14页 |
·转基因植物生物安全管理 | 第14-16页 |
·转基因植物检测技术的研究和应用现状 | 第16-20页 |
·聚合酶链式反应定性检测 | 第16-18页 |
·聚合酶链式反应检测技术 | 第16-17页 |
·多重聚合酶链式反应检测技术 | 第17页 |
·巢式和半巢式聚合酶链式反应检测技术 | 第17页 |
·电化学发光 PCR 技术 | 第17页 |
·热不对称交结 PCR(TAIL-PCR) | 第17-18页 |
·聚合酶链式反应定量检测 | 第18-19页 |
·PCR-ELISA | 第18页 |
·竞争性定量 PCR | 第18页 |
·实时荧光定量 PCR | 第18-19页 |
·酶联免疫吸附法检测 | 第19页 |
·基因芯片检测 | 第19-20页 |
·环介导等温扩增技术 | 第20-26页 |
·环介导等温扩增技术概况 | 第20-21页 |
·LAMP 的反应原理和特点 | 第21-23页 |
·LAMP 扩增产物的检测方法 | 第23-24页 |
·肉眼观察法 | 第23页 |
·染料法 | 第23-24页 |
·实时浊度法 | 第24页 |
·环介导等温扩增技术的应用 | 第24-26页 |
·LAMP 在检测病毒中的应用 | 第24-25页 |
·LAMP 在寄生虫检测中的应用 | 第25页 |
·LAMP 在细菌检测中的应用 | 第25-26页 |
·LAMP 在转基因检测中的应用 | 第26页 |
·研究内容和创新之处 | 第26-27页 |
第2章 材料与方法 | 第27-38页 |
·材料与试剂 | 第27-28页 |
·实验材料与设备 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·主要实验材料 | 第28页 |
·LAMP 方法检测油菜 RT73 品系 | 第28-34页 |
·油菜基因组的提取 | 第28页 |
·LAMP 引物的设计和处理 | 第28-31页 |
·模板 DNA 质量检测 | 第31页 |
·LAMP 反应体系的建立与引物的初筛 | 第31页 |
·LAMP 反应体系的优化 | 第31-32页 |
·不同 dNTP 浓度对 LAMP 扩增效率的影响 | 第32页 |
·不同 Mg2+浓度对 LAMP 扩增效率的影响 | 第32页 |
·不同 Bst DNA 聚合酶浓度对 LAMP 扩增效率的影响 | 第32页 |
·不同反应温度对 LAMP 扩增效率的影响 | 第32页 |
·加甜菜碱与否对 LAMP 扩增效率的影响 | 第32页 |
·LAMP 引物特异性实验 | 第32-33页 |
·LAMP 引物灵敏度实验 | 第33-34页 |
·LAMP 引物稳定性实验 | 第34页 |
·实时荧光 PCR 方法检测油菜 RT73 品系 | 第34-36页 |
·油菜基因组的提取 | 第34页 |
·实时荧光 PCR 引物和探针的设计和处理 | 第34页 |
·实时荧光 PCR 标准体系的建立 | 第34-35页 |
·实时荧光 PCR 引物特异性 | 第35页 |
·实时荧光 PCR 引物灵敏度 | 第35页 |
·实时荧光 PCR 体系的重复性 | 第35-36页 |
·LAMP 检测方法的室内验证 | 第36-38页 |
·模拟样品的配制 | 第36页 |
·LAMP 方法和实时荧光 PCR 方法稳定性的对比验证 | 第36页 |
·LAMP 方法和实时荧光 PCR 方法灵敏度的对比验证 | 第36页 |
·LAMP 方法和实时荧光 PCR 方法特异性的对比验证 | 第36-38页 |
第3章 实验结果 | 第38-68页 |
·油菜基因组 DNA 的质量检测 | 第38-39页 |
·引物的初筛选 | 第39-40页 |
·LAMP 反应条件的优化 | 第40-48页 |
·不同 dNTP 浓度对 LAMP 扩增效率的影响 | 第40-41页 |
·不同 Mg2+浓度对 LAMP 扩增效率的影响 | 第41-42页 |
·不同 Bst DNA 聚合酶浓度对 LAMP 扩增效率的影响 | 第42-44页 |
·不同反应温度对 LAMP 扩增效率的影响 | 第44-46页 |
·加甜菜碱与否对 LAMP 扩增效率的影响 | 第46-48页 |
·LAMP 引物特异性实验 | 第48-49页 |
·LAMP 引物灵敏度实验 | 第49-50页 |
·LAMP 引物稳定性实验 | 第50-52页 |
·实时荧光 PCR 体系的特异性 | 第52-53页 |
·实时荧光 PCR 体系的灵敏度 | 第53页 |
·实时荧光 PCR 体系的重复性 | 第53-54页 |
·LAMP 方法的室内验证 | 第54-68页 |
·LAMP 方法和实时荧光 PCR 稳定性对比分析 | 第54-61页 |
·LAMP 方法和实时荧光 PCR 灵敏度对比分析 | 第61-62页 |
·LAMP 方法和实时荧光 PCR 检测时间对比分析 | 第62页 |
·LAMP 方法和实时荧光 PCR 结果判读方法的对比分析 | 第62页 |
·LAMP 方法和实时荧光 PCR 方法特异性对比分析 | 第62-68页 |
第4章 讨论 | 第68-78页 |
·油菜基因组 DNA 的提取及质量检测 | 第68页 |
·靶基因的选择 | 第68-69页 |
·转基因油菜 RT73 内源基因序列的选择 | 第69页 |
·转基因油菜 RT73 外源基因序列的选择 | 第69页 |
·LAMP 检测中引物的设计 | 第69-70页 |
·LAMP 反应体系建立的各个影响因素 | 第70-72页 |
·Bst DNA 聚合酶 | 第70-71页 |
·Mg2+浓度和 dNTP 浓度 | 第71页 |
·甜菜碱 | 第71-72页 |
·反应温度 | 第72页 |
·反应时间 | 第72页 |
·LAMP 反应体系的特异性 | 第72-73页 |
·室内验证 | 第73-74页 |
·实时荧光 PCR 的优点和不足 | 第74-75页 |
·LAMP 技术的方法学评价 | 第75-76页 |
·污染因素及防治措施 | 第76-78页 |
第5章 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-89页 |
作者简介及在学期间取得的科研成果 | 第89-90页 |
致谢 | 第90页 |