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水稻抗病相关基因OsDRxoc1和OsDRxoc2的克隆和功能分析

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
1 前言第13-26页
   ·水稻细条病的研究概况第13-17页
     ·水稻细条病的发现及发病特点第13-14页
     ·病原菌的分类与文化第14-15页
     ·细条病抗性评价方法第15页
     ·水稻细条病的抗性鉴定与抗源筛选第15-16页
     ·水稻细条病的抗性生理研究第16-17页
   ·水稻细条病抗性遗传及抗性QTL和基因第17-19页
     ·水稻细条病抗性遗传第17页
     ·水稻细条病抗性QTL研究进展第17-18页
     ·水稻细条病抗性基因研究进展第18-19页
   ·植物抗病相关基因的研究方法第19-22页
     ·克隆植物抗病相关基因第19-20页
       ·鸟枪克隆法(Shotgun Cloning)第19页
       ·转座子标签法(Transposon Tagging)第19页
       ·图位克隆法(Map-based cloning)第19-20页
     ·寻找有表达差异的基因第20-22页
       ·mRNA差异显示技术(mRNA differential display)第20页
       ·mRNA表达谱分析第20页
       ·扣除性cDNA杂交法(subtractive cDNA hybridization)第20-21页
       ·抑制性扣除杂交法(suppression subtractive hybridization,SSH)第21页
       ·DNA微阵列(DNA microarray)第21-22页
     ·生物信息学的方法用于抗病基因的发现和鉴定第22页
   ·植物MYB转录因子基因的研究现状第22-24页
     ·在植物方面已经研究出来的MYB基因及相关功能第22-24页
       ·参与苯丙素代谢途径第22-23页
       ·参与细胞分化、形态建成的发育调控第23页
       ·参与植物对激素的应答第23页
       ·参与植物对生物和非生物胁迫的应答第23-24页
       ·参与细胞周期的调控第24页
       ·作为一种端粒结合蛋白对染色体起保护作用第24页
   ·本研究的目的与意义第24-26页
2 材料与方法第26-34页
   ·水稻品种和来源第26页
   ·菌株和载体第26页
   ·引物设计第26-27页
   ·OsDRxoc1和OsDRxoc2基因序列PCR扩增第27-29页
     ·PCR产物纯化第28-29页
   ·水稻超量表达载体和抑制表达载体的构建第29页
   ·农杆菌介导的水稻遗传转化第29-30页
   ·超量表达转基因植株GUS染色第30页
   ·转基因植株PCR检测第30-31页
   ·细条病接种和病情鉴定第31页
   ·白叶枯病接种和病情鉴定第31页
   ·OsDRxoc2转基因植株干旱胁迫处理第31页
   ·OsDRxoc2转基因植株盐胁迫处理第31页
   ·转基因植株基因表达荧光定量PCR分析第31-34页
     ·植物总RNA的提取第32页
     ·RT-PCR第32-33页
     ·转基因植株基因表达荧光定量PCR分析第33页
     ·分光光度法测定OsDRxoc1转基因植株叶片的叶绿素含量第33-34页
3 结果与分析第34-53页
   ·基因OsDRxoc1和OsDRxoc2结构与功能预测第34-36页
   ·基因OsDRxoc1和OsDRxoc2超量表达和抑制表达片段的扩增第36-37页
   ·水稻超量表达载体和抑制表达载体的构建第37-40页
     ·pU1301-OsDRxoc2植物超量表达载体的构建第37页
     ·ds1301-OsDRxoc2植物抑制表达载体的构建第37-39页
     ·pU1301-OsDRxoc1植物超量表达载体的构建第39-40页
     ·ds1301-OsDRxoc1植物抑制表达载体的构建第40页
   ·水稻遗传转化再生体系的建立第40-41页
   ·T0代超量表达转基因植株GUS染色分析第41页
   ·T0代转基因植株PCR检测第41-42页
   ·T0代超量表达和抑制表达转基因植株表型分折第42-43页
   ·转基因植株病原接种鉴定和分析第43-48页
     ·OsDRxoc2 T1代水稻转基因植株病原接种鉴定和分析第43-45页
     ·OsDRxoc1转基因植株病原接种鉴定和分析第45-48页
   ·OsDRxoc2转基因植株干旱和盐胁迫处理第48-50页
     ·OsDRxoc2转基因植株的盐胁迫处理第48-49页
     ·OsDRxoc2转基因植株干旱胁迫处理第49-50页
     ·OsDRxoc1转基因植株叶片的叶绿素含量测定第50-51页
   ·荧光定量RT-PCR分析第51-53页
4 讨论第53-55页
   ·关于OsDRxoc1和OsDRxoc2基因第53页
   ·MYB蛋白可能参与了水稻与细条病菌的互作反应第53-54页
   ·抗病相关基因的鉴定对植物抗病研究的贡献第54-55页
5 结论第55-57页
   ·OsDRxoc1的超量表达提高了水稻植株对细条病菌RS105的抗性第55页
   ·OsDRxoc1的超量表达影响了水稻植株正常生长发育第55-56页
   ·超量表达OsDRxoc2提高了水稻植株对白叶枯病菌PXO99的抗性第56页
   ·OsDRxoc2的超量表达提高了水稻植株对干旱胁迫的抗性第56-57页
参考文献第57-69页
附录第69-76页
致谢第76-77页
攻读学位期间发表论文情况第77页

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