摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-18页 |
引言 | 第10页 |
1. 植物MAPK级联成份 | 第10-12页 |
·MAPKKK | 第11页 |
·MAPKK | 第11-12页 |
·MAPK | 第12页 |
2. 植物中MAPK级联途径研究进展 | 第12-14页 |
·拟南芥中的MAP激酶级联途径 | 第13页 |
·烟草中的MAP激酶级联途径 | 第13-14页 |
·苜蓿中的MAP激酶级联途径 | 第14页 |
·水稻中的MAPK级联途径 | 第14页 |
3 番茄中MAPKs研究进展 | 第14-15页 |
4 本研究的目的和意义 | 第15-18页 |
第二章 Lempk1/2基因表达载体的构建及其转化番茄的研究 | 第18-46页 |
引言 | 第18-19页 |
1 材料与方法 | 第19-35页 |
·实验材料 | 第19-21页 |
·番茄品种 | 第19页 |
·菌株 | 第19-20页 |
·质粒 | 第20页 |
·实验所用引物 | 第20-21页 |
·主要实验仪器和试剂盒 | 第21-22页 |
·实验仪器 | 第21-22页 |
·试剂盒 | 第22页 |
·试剂 | 第22-23页 |
·抗生素 | 第22页 |
·植物激素 | 第22页 |
·细菌感受态细胞制备试剂 | 第22页 |
·DNA marker | 第22页 |
·限制型内切酶 | 第22-23页 |
·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
·其它试剂 | 第23页 |
·培养基 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-35页 |
·番茄总RNA的提取 | 第23-24页 |
·RT-PCR反应 | 第24页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
·大肠杆菌的转化 | 第25页 |
·重组质粒的初步鉴定 | 第25-26页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
·农杆菌的转化 | 第26页 |
·质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
·DNA琼脂糖凝胶回收 | 第27-28页 |
·DNA片段与载体的连接 | 第28页 |
·PCR反应 | 第28页 |
·限制性内切酶反应 | 第28-29页 |
·植物表达载体PA7-YFP-LeMPK1和PA7-YFP-LeMPK2的构建 | 第29页 |
·小量法植物基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
·农杆菌介导番茄的遗传转化 | 第30-31页 |
·转基因植株的检测 | 第31-32页 |
·烟草的原生质体转化 | 第32-35页 |
2. 结果与分析 | 第35-43页 |
·LeMPK1/2基因表达载体的构建 | 第35-38页 |
·LeMPK1/2基因目的片段PCR扩增结果 | 第35-36页 |
·LeMPK1/2插入KS后重组子的单酶切鉴定 | 第36-37页 |
·LeMPK1/2插入YFP载体后的BamH1和Spe1双酶切鉴定 | 第37-38页 |
·农杆菌介导的番茄的PBI121-eMPK1、PBI121-LeMPK2的遗传转化 | 第38-42页 |
·农杆菌侵染后的愈伤组织的生长过程 | 第38-39页 |
·转基因植株的生长过程 | 第39-40页 |
·转化植株PCR检测的结果与分析 | 第40-42页 |
·1479番茄LeMPK1/2基因时空表达模式分析 | 第42-43页 |
·基因LeMPK1/2的时间表达模式分析 | 第42页 |
·基因LeMPK1/2的空间表达模式分析 | 第42-43页 |
3. 讨论 | 第43-44页 |
·LeMPK1/2瞬时表达载体的构建 | 第43页 |
·植物双元表达载体构建 | 第43页 |
·农杆菌的鉴定 | 第43页 |
·农杆菌介导的番茄的遗传转化 | 第43-44页 |
·番茄LeMPK1/2基因的时空表达模式分析 | 第44页 |
4. 存在问题与展望 | 第44-46页 |
第三章 全文结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第53-54页 |