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LeMPK1/2基因表达载体的构建及其转化番茄的初步研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
缩略词表第9-10页
第1章 文献综述第10-18页
 引言第10页
 1. 植物MAPK级联成份第10-12页
   ·MAPKKK第11页
   ·MAPKK第11-12页
   ·MAPK第12页
 2. 植物中MAPK级联途径研究进展第12-14页
   ·拟南芥中的MAP激酶级联途径第13页
   ·烟草中的MAP激酶级联途径第13-14页
   ·苜蓿中的MAP激酶级联途径第14页
   ·水稻中的MAPK级联途径第14页
 3 番茄中MAPKs研究进展第14-15页
 4 本研究的目的和意义第15-18页
第二章 Lempk1/2基因表达载体的构建及其转化番茄的研究第18-46页
 引言第18-19页
 1 材料与方法第19-35页
   ·实验材料第19-21页
     ·番茄品种第19页
     ·菌株第19-20页
     ·质粒第20页
     ·实验所用引物第20-21页
   ·主要实验仪器和试剂盒第21-22页
     ·实验仪器第21-22页
     ·试剂盒第22页
   ·试剂第22-23页
     ·抗生素第22页
     ·植物激素第22页
     ·细菌感受态细胞制备试剂第22页
     ·DNA marker第22页
     ·限制型内切酶第22-23页
     ·DNA琼脂糖凝胶电泳第23页
     ·其它试剂第23页
   ·培养基第23页
   ·实验方法第23-35页
     ·番茄总RNA的提取第23-24页
     ·RT-PCR反应第24页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第24-25页
     ·大肠杆菌的转化第25页
     ·重组质粒的初步鉴定第25-26页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第26页
     ·农杆菌的转化第26页
     ·质粒DNA的提取第26-27页
     ·DNA琼脂糖凝胶回收第27-28页
     ·DNA片段与载体的连接第28页
     ·PCR反应第28页
     ·限制性内切酶反应第28-29页
     ·植物表达载体PA7-YFP-LeMPK1和PA7-YFP-LeMPK2的构建第29页
     ·小量法植物基因组DNA的提取第29-30页
     ·农杆菌介导番茄的遗传转化第30-31页
     ·转基因植株的检测第31-32页
     ·烟草的原生质体转化第32-35页
 2. 结果与分析第35-43页
   ·LeMPK1/2基因表达载体的构建第35-38页
     ·LeMPK1/2基因目的片段PCR扩增结果第35-36页
     ·LeMPK1/2插入KS后重组子的单酶切鉴定第36-37页
     ·LeMPK1/2插入YFP载体后的BamH1和Spe1双酶切鉴定第37-38页
   ·农杆菌介导的番茄的PBI121-eMPK1、PBI121-LeMPK2的遗传转化第38-42页
     ·农杆菌侵染后的愈伤组织的生长过程第38-39页
     ·转基因植株的生长过程第39-40页
     ·转化植株PCR检测的结果与分析第40-42页
   ·1479番茄LeMPK1/2基因时空表达模式分析第42-43页
     ·基因LeMPK1/2的时间表达模式分析第42页
     ·基因LeMPK1/2的空间表达模式分析第42-43页
 3. 讨论第43-44页
   ·LeMPK1/2瞬时表达载体的构建第43页
     ·植物双元表达载体构建第43页
     ·农杆菌的鉴定第43页
   ·农杆菌介导的番茄的遗传转化第43-44页
   ·番茄LeMPK1/2基因的时空表达模式分析第44页
 4. 存在问题与展望第44-46页
第三章 全文结论第46-47页
参考文献第47-52页
致谢第52-53页
攻读学位期间发表的学术论文目录第53-54页

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