| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一部分 前言 | 第12-23页 |
| ·全细胞催化简介 | 第12页 |
| ·酵母表面展示技术 | 第12-14页 |
| ·酵母表面展示系统概述 | 第12-13页 |
| ·酵母细胞表面展示表达系统类型 | 第13-14页 |
| ·凝集素展示表达系统 | 第13页 |
| ·絮凝素展示表达系统 | 第13-14页 |
| ·酵母表面展示的应用 | 第14-15页 |
| ·展示表达各种酶蛋白作为全细胞生物催化剂 | 第14页 |
| ·环境污染的生物修复 | 第14-15页 |
| ·构建多肽文库 | 第15页 |
| ·生产疫苗 | 第15页 |
| ·解脂耶氏酵母表达系统 | 第15-16页 |
| ·解脂耶氏酵母在油脂废水处理中的应用 | 第16页 |
| ·油脂废水的危害及处理方法 | 第16-21页 |
| ·油脂废水来源及危害 | 第16页 |
| ·油脂废水处理方法 | 第16-21页 |
| ·厌氧生物处理工艺 | 第17页 |
| ·好氧生物处理工艺 | 第17-19页 |
| ·脂肪酶水解 | 第19页 |
| ·微生物菌剂处理工艺 | 第19-20页 |
| ·生物强化技术在油脂废水处理中的应用 | 第20-21页 |
| ·研究内容和意义 | 第21-23页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·质粒 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·主要引物 | 第24页 |
| ·主要酶和试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器和设备 | 第25页 |
| ·主要缓冲液 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-35页 |
| ·SDS碱裂解法制备质粒DNA(小量制备) | 第26页 |
| ·NaCl法抽提酵母基因组DNA | 第26-27页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第27页 |
| ·凝胶回收目的DNA片段 | 第27-28页 |
| ·载体和片段的连接 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌重组子的筛选 | 第29页 |
| ·解脂耶氏酵母感受态细胞的制备及转化 | 第29页 |
| ·解脂耶氏酵母重组菌株筛选 | 第29页 |
| ·重组菌株摇瓶表达 | 第29-30页 |
| ·表面展示脂肪酶的免疫荧光检测 | 第30页 |
| ·分光光度法测定全细胞脂肪酶的活性 | 第30-31页 |
| ·绘制标准曲线 | 第30-31页 |
| ·酶活测定体系 | 第31页 |
| ·全细胞脂肪酶处理油脂废水 | 第31-33页 |
| ·活性污泥的驯化 | 第31-32页 |
| ·全细胞脂肪酶的制备 | 第32页 |
| ·全细胞脂肪酶处理油脂废水小试 | 第32页 |
| ·全细胞脂肪酶处理油脂废水中试 | 第32-33页 |
| ·油脂去除率和COD去除率的测定方法 | 第33-35页 |
| ·国标法测定油脂含量 | 第33-34页 |
| ·微波消解法测定COD | 第34-35页 |
| 第三部分 实验结果与讨论 | 第35-49页 |
| ·脂肪酶展示表达载体的构建 | 第35-40页 |
| ·解脂耶氏酵母po1g重组表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·絮凝蛋白基因FLO和脂肪酶基因LipRS的克隆 | 第35页 |
| ·FLO-LipRS融合片段的获得 | 第35-36页 |
| ·构建重组载体pINA1296-F-LipRS | 第36-37页 |
| ·重组载体pINA1296-F-LipRS的验证 | 第37页 |
| ·解脂耶氏酵母po1h重组表达载体的构建 | 第37-40页 |
| ·絮凝蛋白基因FLO和脂肪酶基因LipY7、LipY8的克隆 | 第37-38页 |
| ·FLO-LipY7和FLO-LipY8融合片段的获得 | 第38页 |
| ·构建重组载体pINA1297-F-LipY7和pINA1297-F-LipY8 | 第38-39页 |
| ·重组载体pINA1297-F-LipY7和pINA1297-F-LipY8的验证 | 第39-40页 |
| ·解脂耶氏酵母转化及重组菌株筛选 | 第40-41页 |
| ·全细胞脂肪酶免疫荧光检测 | 第41-42页 |
| ·全细胞脂肪酶活性测定 | 第42页 |
| ·全细胞脂肪酶处理油脂废水效果分析 | 第42-49页 |
| ·活性污泥的驯化 | 第42-43页 |
| ·全细胞脂肪酶处理油脂废水小试 | 第43页 |
| ·全细胞脂肪酶处理油脂废水中试 | 第43-49页 |
| 第四部分 结论与展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
