摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
主要缩略词 | 第12-13页 |
1 绪论 | 第13-29页 |
·问题的提出及研究意义 | 第13-23页 |
·纳米材料在生物医学领域的研究现状 | 第13-14页 |
·纳米材料的毒性效应 | 第14-15页 |
·纳米颗粒的摄入途径 | 第15页 |
·纳米颗粒进入细胞的内吞机制 | 第15-23页 |
·二氧化钛纳米材料 | 第23-27页 |
·二氧化钛纳米材料的研究现状 | 第23-26页 |
·二氧化钛纳米材料应用普遍存在的问题 | 第26-27页 |
·研究思路及主要研究内容 | 第27-28页 |
·研究思路 | 第27页 |
·研究内容 | 第27-28页 |
·本文的创新点 | 第28-29页 |
2 不同尺度二氧化钛纳米颗粒的合成 | 第29-35页 |
·前言 | 第29页 |
·实验部分 | 第29-30页 |
·实验材料与设备 | 第29-30页 |
·不同尺度的 TiO_2纳米颗粒的制备 | 第30页 |
·不同尺度的 TiO_2纳米颗粒的表征 | 第30页 |
·结果与讨论 | 第30-34页 |
·不同尺度的 TiO_2纳米颗粒形貌的表征 | 第30-32页 |
·不同尺度的 TiO_2纳米颗粒的粒径分布 | 第32页 |
·不同尺度 TiO_2纳米颗粒的晶相 | 第32-33页 |
·颗粒尺度与酸碱度/反应时间的相关性 | 第33-34页 |
·小结 | 第34-35页 |
3 200 纳米以下不同尺度二氧化钛颗粒的细胞毒性与其尺度的相关性 | 第35-55页 |
·前言 | 第35页 |
·实验部分 | 第35-41页 |
·实验材料及设备 | 第35-37页 |
·不同尺度 TiO_2纳米颗粒的表征 | 第37页 |
·不同尺度 TiO_2纳米颗粒的荧光标记 | 第37页 |
·成骨细胞的原代培养及鉴定 | 第37-38页 |
·细胞活性检测 | 第38页 |
·TiO_2纳米颗粒在细胞中的分布 | 第38-40页 |
·成骨细胞与纳米颗粒的相互作用机理 | 第40页 |
·碱性磷酸酶活性的检测 | 第40-41页 |
·RT-PCR | 第41页 |
·明胶酶谱法测定基质金属蛋白酶 | 第41页 |
·结果与讨论 | 第41-54页 |
·不同尺度 TiO_2纳米颗粒的表征 | 第41-43页 |
·成骨细胞的原代培养及鉴定 | 第43页 |
·细胞活性 | 第43-45页 |
·TiO_2纳米颗粒在细胞中的分布 | 第45-48页 |
·成骨细胞与纳米颗粒的相互作用机理 | 第48-50页 |
·碱性磷酸酶活性 | 第50-51页 |
·RT-PCR | 第51-52页 |
·基质金属蛋白酶表达 | 第52-53页 |
·细胞与纳米颗粒的凋亡作用机理 | 第53-54页 |
·小结 | 第54-55页 |
4 不同尺度二氧化钛纳米颗粒对骨髓间充质干细胞粘附、增殖、迁移和分化的影响 | 第55-73页 |
·前言 | 第55-56页 |
·实验部分 | 第56-62页 |
·实验材料与设备 | 第56-57页 |
·纳米颗粒的表征 | 第57页 |
·骨髓间充质干细胞(MSCs)的原代培养及鉴定 | 第57-58页 |
·细胞活力检测 | 第58页 |
·流式细胞仪检测细胞周期 | 第58-59页 |
·纳米颗粒的内化检测 | 第59页 |
·细胞粘附检测 | 第59-60页 |
·伤口愈合实验 | 第60页 |
·Transwell 小室侵袭实验 | 第60页 |
·碱性磷酸酶活性测定 | 第60-61页 |
·细胞矿化的鉴定与定量检测 | 第61页 |
·骨钙素(OC)及骨桥蛋白(OPN)mRNA 的表达水平 | 第61-62页 |
·结果与讨论 | 第62-72页 |
·TiO_2纳米颗粒的形貌表征 | 第62页 |
·骨髓间充质干细胞的原代培养及鉴定 | 第62-63页 |
·细胞活性 | 第63-65页 |
·细胞周期 | 第65-66页 |
·纳米颗粒的内化及细胞粘附 | 第66-68页 |
·细胞迁移 (伤口愈合法) | 第68页 |
·Transwell 小室检测细胞的迁移 | 第68-69页 |
·碱性磷酸酶活性 | 第69-70页 |
·细胞矿化 | 第70-71页 |
·骨钙素(OC)及骨桥蛋白(OPN)mRNA 的表达水平 | 第71-72页 |
·小结 | 第72-73页 |
5 不同纳米颗粒的表面特征及化学性质对内皮细胞功能的影响 | 第73-91页 |
·前言 | 第73页 |
·实验部分 | 第73-78页 |
·实验材料与设备 | 第73-75页 |
·不同纳米颗粒的合成 | 第75页 |
·纳米颗粒的表征 | 第75页 |
·纳米颗粒的荧光标记 | 第75-76页 |
·内皮细胞的体外培养 | 第76页 |
·纳米颗粒的剂量和时间依赖效应 | 第76页 |
·细胞膜的完整性检测 | 第76页 |
·细胞对纳米颗粒的吞噬检测 | 第76-77页 |
·免疫荧光观察 | 第77页 |
·活细胞线粒体的荧光染色 | 第77页 |
·ROS 水平的测量 | 第77页 |
·GSH 检测 | 第77页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第77-78页 |
·统计分析 | 第78页 |
·结果与讨论 | 第78-89页 |
·纳米颗粒的合成与表征 | 第78-79页 |
·剂量依赖效应 | 第79-80页 |
·时间依赖效应 | 第80-81页 |
·细胞膜的完整性 | 第81-82页 |
·不同纳米颗粒的吞噬 | 第82-83页 |
·纳米颗粒对细胞骨架的影响 | 第83-85页 |
·活细胞的荧光强度和线粒体的完整性检测 | 第85-86页 |
·ROS 表达 | 第86-87页 |
·GSH 表达 | 第87-88页 |
·细胞凋亡 | 第88-89页 |
·小结 | 第89-91页 |
6 主要结论与后续建议 | 第91-93页 |
·主要结论 | 第91-92页 |
·后续工作建议 | 第92-93页 |
致谢 | 第93-95页 |
参考文献 | 第95-115页 |
附录 | 第115-116页 |
A. 作者攻读学位期间发表的文章 | 第115-116页 |
B. 作者攻读学位期间参加的科研项目 | 第116页 |