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不同尺度二氧化钛纳米颗粒的细胞毒性及其机制研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
主要缩略词第12-13页
1 绪论第13-29页
   ·问题的提出及研究意义第13-23页
     ·纳米材料在生物医学领域的研究现状第13-14页
     ·纳米材料的毒性效应第14-15页
     ·纳米颗粒的摄入途径第15页
     ·纳米颗粒进入细胞的内吞机制第15-23页
   ·二氧化钛纳米材料第23-27页
     ·二氧化钛纳米材料的研究现状第23-26页
     ·二氧化钛纳米材料应用普遍存在的问题第26-27页
   ·研究思路及主要研究内容第27-28页
     ·研究思路第27页
     ·研究内容第27-28页
   ·本文的创新点第28-29页
2 不同尺度二氧化钛纳米颗粒的合成第29-35页
   ·前言第29页
   ·实验部分第29-30页
     ·实验材料与设备第29-30页
     ·不同尺度的 TiO_2纳米颗粒的制备第30页
     ·不同尺度的 TiO_2纳米颗粒的表征第30页
   ·结果与讨论第30-34页
     ·不同尺度的 TiO_2纳米颗粒形貌的表征第30-32页
     ·不同尺度的 TiO_2纳米颗粒的粒径分布第32页
     ·不同尺度 TiO_2纳米颗粒的晶相第32-33页
     ·颗粒尺度与酸碱度/反应时间的相关性第33-34页
   ·小结第34-35页
3 200 纳米以下不同尺度二氧化钛颗粒的细胞毒性与其尺度的相关性第35-55页
   ·前言第35页
   ·实验部分第35-41页
     ·实验材料及设备第35-37页
     ·不同尺度 TiO_2纳米颗粒的表征第37页
     ·不同尺度 TiO_2纳米颗粒的荧光标记第37页
     ·成骨细胞的原代培养及鉴定第37-38页
     ·细胞活性检测第38页
     ·TiO_2纳米颗粒在细胞中的分布第38-40页
     ·成骨细胞与纳米颗粒的相互作用机理第40页
     ·碱性磷酸酶活性的检测第40-41页
     ·RT-PCR第41页
     ·明胶酶谱法测定基质金属蛋白酶第41页
   ·结果与讨论第41-54页
     ·不同尺度 TiO_2纳米颗粒的表征第41-43页
     ·成骨细胞的原代培养及鉴定第43页
     ·细胞活性第43-45页
     ·TiO_2纳米颗粒在细胞中的分布第45-48页
     ·成骨细胞与纳米颗粒的相互作用机理第48-50页
     ·碱性磷酸酶活性第50-51页
     ·RT-PCR第51-52页
     ·基质金属蛋白酶表达第52-53页
     ·细胞与纳米颗粒的凋亡作用机理第53-54页
   ·小结第54-55页
4 不同尺度二氧化钛纳米颗粒对骨髓间充质干细胞粘附、增殖、迁移和分化的影响第55-73页
   ·前言第55-56页
   ·实验部分第56-62页
     ·实验材料与设备第56-57页
     ·纳米颗粒的表征第57页
     ·骨髓间充质干细胞(MSCs)的原代培养及鉴定第57-58页
     ·细胞活力检测第58页
     ·流式细胞仪检测细胞周期第58-59页
     ·纳米颗粒的内化检测第59页
     ·细胞粘附检测第59-60页
     ·伤口愈合实验第60页
     ·Transwell 小室侵袭实验第60页
     ·碱性磷酸酶活性测定第60-61页
     ·细胞矿化的鉴定与定量检测第61页
     ·骨钙素(OC)及骨桥蛋白(OPN)mRNA 的表达水平第61-62页
   ·结果与讨论第62-72页
     ·TiO_2纳米颗粒的形貌表征第62页
     ·骨髓间充质干细胞的原代培养及鉴定第62-63页
     ·细胞活性第63-65页
     ·细胞周期第65-66页
     ·纳米颗粒的内化及细胞粘附第66-68页
     ·细胞迁移 (伤口愈合法)第68页
     ·Transwell 小室检测细胞的迁移第68-69页
     ·碱性磷酸酶活性第69-70页
     ·细胞矿化第70-71页
     ·骨钙素(OC)及骨桥蛋白(OPN)mRNA 的表达水平第71-72页
   ·小结第72-73页
5 不同纳米颗粒的表面特征及化学性质对内皮细胞功能的影响第73-91页
   ·前言第73页
   ·实验部分第73-78页
     ·实验材料与设备第73-75页
     ·不同纳米颗粒的合成第75页
     ·纳米颗粒的表征第75页
     ·纳米颗粒的荧光标记第75-76页
     ·内皮细胞的体外培养第76页
     ·纳米颗粒的剂量和时间依赖效应第76页
     ·细胞膜的完整性检测第76页
     ·细胞对纳米颗粒的吞噬检测第76-77页
     ·免疫荧光观察第77页
     ·活细胞线粒体的荧光染色第77页
     ·ROS 水平的测量第77页
     ·GSH 检测第77页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡第77-78页
     ·统计分析第78页
   ·结果与讨论第78-89页
     ·纳米颗粒的合成与表征第78-79页
     ·剂量依赖效应第79-80页
     ·时间依赖效应第80-81页
     ·细胞膜的完整性第81-82页
     ·不同纳米颗粒的吞噬第82-83页
     ·纳米颗粒对细胞骨架的影响第83-85页
     ·活细胞的荧光强度和线粒体的完整性检测第85-86页
     ·ROS 表达第86-87页
     ·GSH 表达第87-88页
     ·细胞凋亡第88-89页
   ·小结第89-91页
6 主要结论与后续建议第91-93页
   ·主要结论第91-92页
   ·后续工作建议第92-93页
致谢第93-95页
参考文献第95-115页
附录第115-116页
 A. 作者攻读学位期间发表的文章第115-116页
 B. 作者攻读学位期间参加的科研项目第116页

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