致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-18页 |
·木聚糖酶研究 | 第8-11页 |
·木聚糖 | 第8页 |
·木聚糖酶概述 | 第8-9页 |
·木聚糖酶的分类 | 第9页 |
·木聚糖酶的应用 | 第9-11页 |
·木聚糖酶抑制蛋白 | 第11-15页 |
·TAXI 型抑制蛋白 | 第12-14页 |
·XIP 型抑制蛋白 | 第14-15页 |
·TLXI 型抑制蛋白 | 第15页 |
·木聚糖酶抑制蛋白的研究意义 | 第15-18页 |
·木聚糖酶抑制蛋白对小麦食品加工过程的影响 | 第15-16页 |
·木聚糖酶抑制蛋白在饲料行业的作用及研究意义 | 第16页 |
·木聚糖酶抑制蛋白在植物防御反应中的作用及研究意义 | 第16-18页 |
2 引言 | 第18-19页 |
3 材料与方法 | 第19-29页 |
·材料 | 第19-20页 |
·小麦品种 | 第19页 |
·菌株和载体 | 第19页 |
·试剂与药品 | 第19页 |
·培养基 | 第19-20页 |
·仪器设备 | 第20页 |
·有关试验的操作流程 | 第20-22页 |
·小麦叶、幼嫩籽粒中粗蛋白提取 | 第20-21页 |
·小麦木聚糖酶抑制蛋白基因xip-hn 的克隆 | 第21页 |
·小麦木聚糖酶抑制蛋白基因在大肠杆菌中的表达、纯化及酶学性质分析 | 第21-22页 |
·小麦木聚糖酶抑制蛋白基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质分析 | 第22页 |
·试验方法 | 第22-29页 |
·小麦叶和籽粒中粗蛋白提取 | 第22-23页 |
·小麦叶和籽粒中木聚糖酶活性的测定 | 第23页 |
·木聚糖酶指示酶液的制备 | 第23-24页 |
·总RNA 的提取 | 第24页 |
·RT-PCR | 第24-26页 |
·重组载体的构建 | 第26页 |
·大肠杆菌阳性转化子的获得 | 第26-27页 |
·目的基因在大肠杆菌中的表达检测 | 第27页 |
·毕赤酵母感受态细胞的制备 | 第27页 |
·毕赤酵母细胞的电击转化 | 第27-28页 |
·转化子表型鉴定 | 第28页 |
·G418 压力筛选高拷贝转化子 | 第28页 |
·目的基因在毕赤酵母中的表达检测 | 第28-29页 |
4 结果与分析 | 第29-39页 |
·小麦不同生育期木聚糖酶抑制活性及木聚糖酶活性的变化 | 第29-30页 |
·小麦不同生育期叶和籽粒中木聚糖酶抑制活性的变化 | 第29页 |
·小麦不同生育期叶和籽粒中木聚糖酶活性的变化 | 第29-30页 |
·木聚糖酶抑制蛋白基因的克隆 | 第30-35页 |
·小麦幼胚总RNA | 第30-31页 |
·RT-PCR 扩增xip-hn 基因 | 第31页 |
·xip-hn 基因的TA 克隆及序列分析 | 第31-35页 |
·木聚糖酶抑制蛋白基因的原核表达 | 第35-37页 |
·pET21a-xip-hn 重组载体的构建 | 第35-36页 |
·pET21a-xip-hn 表达产物检测结果 | 第36-37页 |
·木聚糖酶抑制蛋白基因的真核表达 | 第37页 |
·pPIC9K-xip-hn 重组载体的构建 | 第37页 |
·pPIC9K-xip-hn 转化毕赤酵母G5115 | 第37页 |
·xip 基因的稀有密码子分析 | 第37-39页 |
5 结论与讨论 | 第39-41页 |
·小麦不同生育期叶和籽粒中的木聚糖酶抑制活性 | 第39页 |
·XIP-HN 基因的功能证实 | 第39-41页 |
·XIP-HN 基因的功能证实 | 第39页 |
·通过外源表达证明其功能 | 第39-40页 |
·XIP-HN 基因在大肠杆菌和毕赤酵母表达策略 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
ABSTRACT | 第45页 |