| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号、缩略语表 | 第10-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-26页 |
| ·油菜产业现状 | 第12页 |
| ·研究控制重要农艺性状基因的方法概述 | 第12-13页 |
| ·反向遗传学 | 第13-17页 |
| ·反义RNA抑制和插入突变技术 | 第14页 |
| ·TILLING的研究进展与优缺点 | 第14-17页 |
| ·油脂代谢调控的研究进展 | 第17-21页 |
| ·脂肪酸链的合成 | 第17页 |
| ·脂肪酸链合成的终止、释放、脱饱和 | 第17-18页 |
| ·TAG的生物合成 | 第18-19页 |
| ·所涉及的酶类和研究进展 | 第19-20页 |
| ·乙酰辅酶A羧化酶Acetyl-CoACarboxylase，ACCase | 第19页 |
| ·脂肪酸合成酶系fattyacidsynthetase（FAS） | 第19-20页 |
| ·含油量调控相关的转录因子 | 第20-21页 |
| ·GL2基因研究进展 | 第21-24页 |
| ·本研究目的和意义 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 GL2基因在大豆、油菜、花生、芝麻种子中的表达差异 | 第26-37页 |
| ·实验仪器与材料 | 第26-28页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·仪器与试剂 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-31页 |
| ·改良的RNA提取方法 | 第28-29页 |
| ·RNA完整性检测 | 第29页 |
| ·荧光定量PCR | 第29-30页 |
| ·RNA反转录为cDNA | 第30页 |
| ·荧光定量PCR | 第30-31页 |
| ·PCR反应体系 | 第30页 |
| ·PCR反应程序 | 第30页 |
| ·荧光定量PCR数据处理 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-35页 |
| ·四种作物RNA提取的结果分析 | 第31-33页 |
| ·GL2在大豆、油菜、花生、芝麻四中作物中的表达差异分析 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 TILLING技术筛选EMS突变体库 | 第37-63页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·方法 | 第38-48页 |
| ·取材 | 第38页 |
| ·DNA提取 | 第38页 |
| ·CEL－I酶的提取 | 第38-39页 |
| ·CEL－I酶分离与检测 | 第39-40页 |
| ·SDS－PAGE | 第39-40页 |
| ·电泳程序 | 第40页 |
| ·染色 | 第40页 |
| ·脱色检测 | 第40页 |
| ·突变体库DNA浓度标定 | 第40页 |
| ·PCR扩增 | 第40-42页 |
| ·荧光引物混合 | 第40页 |
| ·PCR体系 | 第40-41页 |
| ·PCR程序 | 第41-42页 |
| ·CEL－I酶切 | 第42页 |
| ·酶切体系 | 第42页 |
| ·酶切反应程序 | 第42页 |
| ·CEL－I酶切反应终止 | 第42页 |
| ·酶切产物纯化 | 第42页 |
| ·纯化产物的浓缩 | 第42-43页 |
| ·SNP电泳检测 | 第43页 |
| ·PAGE胶的制备 | 第43页 |
| ·电泳检测 | 第43页 |
| ·SNP图像分析 | 第43-44页 |
| ·SNP样品测序分析 | 第44-48页 |
| ·PCR扩增 | 第44-45页 |
| ·PCR扩增产物纯化与回收 | 第45页 |
| ·连接T－载体 | 第45-46页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备（CaCl2法） | 第46页 |
| ·转化转接产物 | 第46页 |
| ·阳性单克隆的PCR鉴定 | 第46-48页 |
| ·重组质粒的提取及测序 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-60页 |
| ·突变体库的构建 | 第48-49页 |
| ·突变体库质量检测 | 第49-50页 |
| ·目的基因扩增条件优化 | 第50-51页 |
| ·目的基因结构和区域预测 | 第50-51页 |
| ·目的基因引物设计和条件优化 | 第51页 |
| ·CEL－I酶活性分析 | 第51-54页 |
| ·CEL－I酶提取检测结果 | 第51-52页 |
| ·酶活性分析与酶切条件优化 | 第52-54页 |
| ·SNP检测结果与分析 | 第54-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| ·结论 | 第62-63页 |
| 附录1 | 第63-65页 |
| 主要溶液配制 | 第63-65页 |
| 附录2 | 第65-69页 |
| 主要序列信息 | 第65-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 已发表和正在整理的与本研究相关的文章 | 第80-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
