青岛地区兔皮肤病原真菌的分离鉴定及其基本生物学特性的研究
中文摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
1 引言 | 第15-34页 |
·兔皮肤真菌病的概述 | 第15-16页 |
·常见皮肤病原真菌的分类 | 第16-22页 |
·小孢子菌属(microsporum) | 第16-18页 |
·犬小孢子菌(M.canis) | 第16-17页 |
·石膏样小孢子菌(M.gypseum) | 第17页 |
·铁锈色小孢子菌(M.ferrugeneum) | 第17页 |
·奥杜盎小孢子菌(M.audouinii) | 第17-18页 |
·毛癣菌属(Trichophyton) | 第18-21页 |
·红毛癣菌(T. rubrum) | 第18-19页 |
·须癣毛癣菌(T. mentagrophyte) | 第19页 |
·断发毛癣菌(T. tonsurans) | 第19-20页 |
·紫色毛癣菌(T. violaceum) | 第20页 |
·其他毛癣菌 | 第20-21页 |
·表皮癣菌属(Epidermophyton) | 第21-22页 |
·常用的实验室诊断方法 | 第22-28页 |
·传统的形态学方法 | 第22-23页 |
·直接镜检 | 第22页 |
·分离培养 | 第22-23页 |
·免疫学诊断方法 | 第23页 |
·分子生物学方法 | 第23-28页 |
·DNA碱基组成比例(G+C mol%)的测定 | 第23-24页 |
·序列分析 | 第24页 |
·实时荧光定量PCR | 第24-25页 |
·核酸杂交技术 | 第25页 |
·限制性片段长度多态性(RFLP)分析 | 第25-26页 |
·任意引物PCR(AP-RCR) | 第26页 |
·随机扩增多态性 DNA(RAPD)分析 | 第26-27页 |
·微卫星引物 PCR | 第27-28页 |
·抗真菌药物 | 第28-29页 |
·多烯类药物 | 第28页 |
·唑类药物 | 第28-29页 |
·国内外研究现状 | 第29-31页 |
·本研究的目的及意义 | 第31-33页 |
·技术路线 | 第33-34页 |
2 材料与方法 | 第34-44页 |
·试验材料 | 第34-37页 |
·兔场的基本情况 | 第34页 |
·实验菌株 | 第34页 |
·实验动物 | 第34页 |
·病料来源 | 第34页 |
·主要试剂及配制 | 第34-36页 |
·沙堡弱培养基 | 第34页 |
·改良马丁培养基 | 第34-35页 |
·麦芽抽提培养基 | 第35页 |
·YEPD培养基 | 第35页 |
·燕麦琼脂培养基 | 第35页 |
·药敏纸片 | 第35页 |
·试验用药 | 第35-36页 |
·染色液 | 第36页 |
·试验仪器及用品 | 第36-37页 |
·试验方法 | 第37-44页 |
·病料的采集和培养 | 第37页 |
·病原的形态学鉴定 | 第37页 |
·分子生物学鉴定 | 第37-41页 |
·CTAB法提取DNA | 第37-38页 |
·DNA纯度、质量浓度测定 | 第38页 |
·PCR扩增 | 第38-39页 |
·PCR产物电泳琼脂糖电泳分析 | 第39页 |
·PCR产物的纯化回收 | 第39页 |
·纯化产物与克隆载体的连接 | 第39页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第39-40页 |
·阳性克隆的筛选及质粒提取 | 第40页 |
·重组质粒的鉴定 | 第40-41页 |
·序列测定与分析 | 第41页 |
·数据的统计分析 | 第41页 |
·微卫星引物 PCR | 第41-42页 |
·DNA提取及纯化 | 第41页 |
·微卫星引物 PCR 扩增 | 第41页 |
·PCR结果分析 | 第41-42页 |
·三种皮肤真菌生长速率的检测 | 第42页 |
·菌落直径的检测 | 第42页 |
·菌丝生长情况的检测及生长曲线的绘制 | 第42页 |
·分生孢子最适培养基的选择 | 第42-43页 |
·常用抗真菌药物敏感性检测 | 第43页 |
·菌悬液的制备 | 第43页 |
·药敏试验 | 第43页 |
·结果判定标准 | 第43页 |
·三种常见皮肤病原真菌致病性研究 | 第43-44页 |
·接种用真菌悬液的制备 | 第43页 |
·实验动物预处理 | 第43-44页 |
·接种菌液 | 第44页 |
·结果观察 | 第44页 |
3 结果与分析 | 第44-57页 |
·病料的分离鉴定结果 | 第44-46页 |
·菌落观察 | 第45页 |
·镜检观察结果 | 第45-46页 |
·分子生物学鉴定结果 | 第46-47页 |
·PCR扩增结果 | 第46页 |
·重组质粒的鉴定 | 第46-47页 |
·测序结果(见附录) | 第47页 |
·统计学分析结果 | 第47-48页 |
·微卫星引物PCR结果分析 | 第48-50页 |
·标准菌株的特异性 | 第48页 |
·分离菌株的鉴定及聚类分析结果 | 第48-50页 |
·三种皮肤真菌生长速率的检测结果 | 第50-53页 |
·菌落直径检测结果 | 第50页 |
·菌丝生长情况的检测及生长曲线的绘制 | 第50-53页 |
·分生孢子最适培养基的选择 | 第53-54页 |
·药敏试验结果 | 第54-55页 |
·三种常见皮肤病原真菌致病性试验结果 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-60页 |
·流行病学调查结果 | 第57-58页 |
·快速检测兔皮肤病原真菌方法的建立 | 第58-59页 |
·不同培养基中 3 种病原真菌生长速率的检测 | 第59页 |
·3种病原真菌分生孢子最适培养基的选择 | 第59-60页 |
·敏感性药物的筛选 | 第60页 |
·3病原真菌的人畜共患性及致病性 | 第60页 |
5 结论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
附录 | 第70-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读学位期间发表的论文及获奖情况 | 第73页 |