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青岛地区兔皮肤病原真菌的分离鉴定及其基本生物学特性的研究

中文摘要第1-13页
Abstract第13-15页
1 引言第15-34页
   ·兔皮肤真菌病的概述第15-16页
   ·常见皮肤病原真菌的分类第16-22页
     ·小孢子菌属(microsporum)第16-18页
       ·犬小孢子菌(M.canis)第16-17页
       ·石膏样小孢子菌(M.gypseum)第17页
       ·铁锈色小孢子菌(M.ferrugeneum)第17页
       ·奥杜盎小孢子菌(M.audouinii)第17-18页
     ·毛癣菌属(Trichophyton)第18-21页
       ·红毛癣菌(T. rubrum)第18-19页
       ·须癣毛癣菌(T. mentagrophyte)第19页
       ·断发毛癣菌(T. tonsurans)第19-20页
       ·紫色毛癣菌(T. violaceum)第20页
       ·其他毛癣菌第20-21页
     ·表皮癣菌属(Epidermophyton)第21-22页
   ·常用的实验室诊断方法第22-28页
     ·传统的形态学方法第22-23页
       ·直接镜检第22页
       ·分离培养第22-23页
     ·免疫学诊断方法第23页
     ·分子生物学方法第23-28页
       ·DNA碱基组成比例(G+C mol%)的测定第23-24页
       ·序列分析第24页
       ·实时荧光定量PCR第24-25页
       ·核酸杂交技术第25页
       ·限制性片段长度多态性(RFLP)分析第25-26页
       ·任意引物PCR(AP-RCR)第26页
       ·随机扩增多态性 DNA(RAPD)分析第26-27页
       ·微卫星引物 PCR第27-28页
   ·抗真菌药物第28-29页
     ·多烯类药物第28页
     ·唑类药物第28-29页
   ·国内外研究现状第29-31页
   ·本研究的目的及意义第31-33页
   ·技术路线第33-34页
2 材料与方法第34-44页
   ·试验材料第34-37页
     ·兔场的基本情况第34页
     ·实验菌株第34页
     ·实验动物第34页
     ·病料来源第34页
     ·主要试剂及配制第34-36页
       ·沙堡弱培养基第34页
       ·改良马丁培养基第34-35页
       ·麦芽抽提培养基第35页
       ·YEPD培养基第35页
       ·燕麦琼脂培养基第35页
       ·药敏纸片第35页
       ·试验用药第35-36页
       ·染色液第36页
     ·试验仪器及用品第36-37页
   ·试验方法第37-44页
     ·病料的采集和培养第37页
     ·病原的形态学鉴定第37页
     ·分子生物学鉴定第37-41页
       ·CTAB法提取DNA第37-38页
       ·DNA纯度、质量浓度测定第38页
       ·PCR扩增第38-39页
       ·PCR产物电泳琼脂糖电泳分析第39页
       ·PCR产物的纯化回收第39页
       ·纯化产物与克隆载体的连接第39页
       ·连接产物转化感受态细胞第39-40页
       ·阳性克隆的筛选及质粒提取第40页
       ·重组质粒的鉴定第40-41页
       ·序列测定与分析第41页
     ·数据的统计分析第41页
     ·微卫星引物 PCR第41-42页
       ·DNA提取及纯化第41页
       ·微卫星引物 PCR 扩增第41页
       ·PCR结果分析第41-42页
     ·三种皮肤真菌生长速率的检测第42页
       ·菌落直径的检测第42页
       ·菌丝生长情况的检测及生长曲线的绘制第42页
     ·分生孢子最适培养基的选择第42-43页
     ·常用抗真菌药物敏感性检测第43页
       ·菌悬液的制备第43页
       ·药敏试验第43页
       ·结果判定标准第43页
     ·三种常见皮肤病原真菌致病性研究第43-44页
       ·接种用真菌悬液的制备第43页
       ·实验动物预处理第43-44页
       ·接种菌液第44页
       ·结果观察第44页
3 结果与分析第44-57页
   ·病料的分离鉴定结果第44-46页
     ·菌落观察第45页
     ·镜检观察结果第45-46页
   ·分子生物学鉴定结果第46-47页
     ·PCR扩增结果第46页
     ·重组质粒的鉴定第46-47页
     ·测序结果(见附录)第47页
   ·统计学分析结果第47-48页
   ·微卫星引物PCR结果分析第48-50页
     ·标准菌株的特异性第48页
     ·分离菌株的鉴定及聚类分析结果第48-50页
   ·三种皮肤真菌生长速率的检测结果第50-53页
     ·菌落直径检测结果第50页
     ·菌丝生长情况的检测及生长曲线的绘制第50-53页
   ·分生孢子最适培养基的选择第53-54页
   ·药敏试验结果第54-55页
   ·三种常见皮肤病原真菌致病性试验结果第55-57页
4 讨论第57-60页
   ·流行病学调查结果第57-58页
   ·快速检测兔皮肤病原真菌方法的建立第58-59页
   ·不同培养基中 3 种病原真菌生长速率的检测第59页
   ·3种病原真菌分生孢子最适培养基的选择第59-60页
   ·敏感性药物的筛选第60页
   ·3病原真菌的人畜共患性及致病性第60页
5 结论第60-62页
参考文献第62-70页
附录第70-72页
致谢第72-73页
攻读学位期间发表的论文及获奖情况第73页

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