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球毛壳菌chi及glu基因表达和特性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第1章 绪论第11-24页
   ·课题研究的目的和意义第11-12页
   ·国内外研究现状第12-23页
     ·植物病害生物防治发展动态第12-15页
     ·毛壳菌在生物防治中的应用及生防机制第15-17页
     ·几丁质酶研究进展第17-21页
     ·β-1,3-葡聚糖酶研究进展第21-23页
   ·课题来源及主要研究内容第23-24页
     ·课题来源第23页
     ·主要研究内容第23-24页
第2章 材料与方法第24-34页
   ·实验材料第24-26页
     ·菌株第24页
     ·培养基第24-25页
     ·酶与试剂第25页
     ·定量引物设计第25页
     ·常用贮液第25-26页
     ·仪器设备第26页
   ·实验方法第26-34页
     ·实时荧光定量PCR方法检测第26-29页
     ·不同病原菌细胞壁诱导下几丁质酶与葡聚糖酶活性变化第29-31页
     ·重组几丁质酶发酵液的浓缩第31页
     ·重组几丁质酶粗酶液抑菌试验第31-34页
第3章 几丁质酶与葡聚糖酶基因诱导表达第34-43页
   ·诱导后球毛壳菌总RNA的提取与纯化第34页
   ·反转录PCR及其检测第34-35页
   ·实时荧光定量PCR检测第35-40页
     ·几丁质酶基因chi46 在转录水平上的表达变化第35-37页
     ·葡聚糖酶基因glu在转录水平上表达的变化第37-40页
   ·关于细胞壁诱导条件下chi46 和glu变化的讨论第40-41页
     ·总RNA提取过程中存在的问题第40页
     ·实时荧光定量PCR读板温度的确定第40页
     ·实时荧光定量PCR内参的选择第40-41页
     ·几丁质酶基因chi46 定量结果分析第41页
     ·葡聚糖酶基因glu定量结果分析第41页
     ·大豆疫霉诱导试验结果分析第41页
   ·本章小结第41-43页
第4章 几丁质酶与葡聚糖酶诱导活性变化第43-54页
   ·几丁质酶酶活测定第43-48页
     ·几丁质酶活标准曲线测定第43-44页
     ·六种病原菌细胞壁诱导下的几丁质酶活性比较第44-46页
     ·几丁质衍生物诱导下几丁质酶活性比较第46-48页
   ·葡聚糖酶酶活测定第48-51页
     ·葡聚糖酶活标准曲线测定第48-49页
     ·六种病原菌细胞壁诱导下葡聚糖酶活性比较第49-51页
   ·关于细胞壁诱导下CHI和GLU酶活变化的讨论第51-53页
     ·病原菌的培养与细胞壁的处理第51页
     ·关于几丁质酶的活力测定方法的选择第51-52页
     ·几丁质酶活测定结果分析第52-53页
     ·葡聚糖酶活测定结果分析第53页
   ·本章小结第53-54页
第5章 重组几丁质酶发酵液的抑菌试验第54-60页
   ·重组 CHI46 发酵液的浓缩第54页
   ·重组 CHI46 粗酶液抑菌试验第54-58页
     ·抑制稻瘟病菌落生长分析第54-55页
     ·抑制稻瘟病菌产生分生孢子分析第55-56页
     ·抑制稻瘟病芽管伸长的分析第56-58页
   ·关于分离纯化与重组酶抑菌试验的讨论第58-59页
     ·纯化过程中遇到的问题及解决方法第58-59页
     ·非重组蛋白粗酶液抑菌作用的探索第59页
     ·稻瘟病菌芽管形成条件第59页
   ·本章小结第59-60页
结论第60-62页
参考文献第62-67页
攻读学位期间发表的学术论文第67-69页
致谢第69页

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