乙酰胆碱酯酶荧光生物传感器的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-21页 |
| ·课题背景 | 第10-11页 |
| ·国内外研究现状及分析 | 第11-19页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的提取纯化 | 第11-13页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的功能、结构及水解机理 | 第13-14页 |
| ·乙酰胆碱酯酶固定化研究现状 | 第14-17页 |
| ·Trichlorfon农药特性及残留标准 | 第17-18页 |
| ·荧光生物传感器的研究现状 | 第18-19页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第19页 |
| ·本课题主要研究内容 | 第19-21页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第21-31页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·实验原料 | 第21页 |
| ·实验试剂 | 第21-22页 |
| ·实验仪器与设备 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-31页 |
| ·实验测定方法 | 第22-23页 |
| ·实验材料的确定 | 第23-24页 |
| ·鲫鱼脑乙酰胆碱酯酶提取工艺研究 | 第24-25页 |
| ·鲫鱼脑乙酰胆碱酯酶的纯化 | 第25-26页 |
| ·已纯化的AChE纯度检测 | 第26页 |
| ·已纯化的AChE活性测定条件单因素优化实验 | 第26-27页 |
| ·已纯化的AChE的固定化 | 第27-29页 |
| ·壳聚糖膜为载体固定化酶与游离酶的比较 | 第29-30页 |
| ·荧光生物传感器的研究 | 第30-31页 |
| 第3章 乙酰胆碱酯酶的分离纯化研究 | 第31-48页 |
| ·Tris-HC1 浸提条件确定 | 第31-40页 |
| ·Tris-HC1 浸提单因素实验 | 第31-34页 |
| ·Tris-HC1 浸提响应面优化实验 | 第34-40页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 | 第40-41页 |
| ·硫酸铵分级盐析纯化AChE效果分析 | 第41页 |
| ·凝胶层析纯化AChE效果分析 | 第41-42页 |
| ·已纯化的乙酰胆碱酯酶纯度检测 | 第42-44页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第42-43页 |
| ·已纯化的AChE特异性分析和抑制性作用 | 第43-44页 |
| ·已纯化的AChE活性测定条件单因素实验 | 第44-47页 |
| ·活性测定体系pH值对AChE活力影响 | 第44-45页 |
| ·活性测定体系底物浓度对AChE活力影响 | 第45-46页 |
| ·活性测定体系温度对AChE活力影响 | 第46页 |
| ·活性测定体系保温时间对AChE活力影响 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第4章 固定化乙酰胆碱酯酶膜的制备 | 第48-63页 |
| ·AChE固定化方法和载体筛选 | 第48-50页 |
| ·AChE固定化方法筛选 | 第48-49页 |
| ·AChE固定化载体筛选 | 第49-50页 |
| ·壳聚糖吸附-交联法固定化AChE单因素实验 | 第50-56页 |
| ·壳聚糖浓度对固定化酶活力的影响 | 第50-51页 |
| ·吸附时间对固定化酶活力的影响 | 第51页 |
| ·吸附温度对固定化酶活力的影响 | 第51-52页 |
| ·戊二醛浓度对固定化酶活力的影响 | 第52-53页 |
| ·戊二醛交联时间对固定化酶活力的影响 | 第53页 |
| ·戊二醛交联温度对固定化酶活力的影响 | 第53-55页 |
| ·给酶量对固定化酶活力的影响 | 第55-56页 |
| ·壳聚糖吸附-交联法固定化AChE正交优化实验 | 第56-58页 |
| ·壳聚糖膜为载体固定化酶与游离酶的比较 | 第58-62页 |
| ·固定化酶和游离酶的最适pH值比较 | 第58-59页 |
| ·固定化酶和游离酶的温度稳定性比较 | 第59-60页 |
| ·固定化酶和游离酶的动力学模型的比较 | 第60-61页 |
| ·固定化酶和游离酶保存特性的比较 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第5章 乙酰胆碱酯酶荧光生物传感器的研究 | 第63-71页 |
| ·固定化酶反应体系最佳激发波长确定 | 第63-64页 |
| ·最佳激发波长相对标准偏差确定 | 第64页 |
| ·最小二乘法拟合和最低检测限确定 | 第64-68页 |
| ·荧光传感器重现性 | 第68-70页 |
| ·本章小结 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
