中文摘要 | 第1-16页 |
英文摘要 | 第16-19页 |
文献综述 | 第19-30页 |
1 微生物气溶胶的概述 | 第19页 |
·微生物气溶胶的概念 | 第19页 |
·真菌气溶胶的概念 | 第19页 |
·可吸入真菌气溶胶 | 第19页 |
·气载真菌毒素 | 第19页 |
2 真菌气溶胶的危害 | 第19-21页 |
·真菌病 | 第19页 |
·真菌感染 | 第19-20页 |
·过敏 | 第20-21页 |
·炎症反应 | 第21页 |
3 真菌气溶胶的检测 | 第21-25页 |
·惯性撞击类 | 第21-24页 |
·自然沉降法 | 第21-22页 |
·射流撞击式采样器(裂隙式采样器) | 第22-23页 |
·离心撞击式采样器 | 第23-24页 |
·过滤阻留类 | 第24页 |
·静电沉着类 | 第24页 |
·温差迫降类 | 第24-25页 |
·生物类 | 第25页 |
·采样器的选择 | 第25页 |
·空气微生物采样发展趋势 | 第25页 |
4 微生物气溶胶学的应用 | 第25-26页 |
·应用于动物疫病防治方面 | 第25-26页 |
·应用于植物疫病防治方面 | 第26页 |
5 微生物气溶胶传播机制的研究 | 第26-27页 |
6 微生物气溶胶的研究现状 | 第27-28页 |
·微生物气溶胶的国内研究现状 | 第27页 |
·微生物气溶胶的国外研究现状 | 第27-28页 |
7 研究的目的及意义 | 第28-29页 |
8 本论文的整体构思和体系结构 | 第29-30页 |
第一部分 不同结构兔舍环境真菌气溶胶的组成、含量变化及其优势菌属 | 第30-54页 |
1 引言 | 第30-35页 |
·捕获空气中真菌的方法 | 第30页 |
·Andersen-6 级生物采样器概述 | 第30-31页 |
·工作原理 | 第31-32页 |
·Andersen 采样器特点 | 第32页 |
·采集粒谱广 | 第32页 |
·采集效率高 | 第32页 |
·真菌气溶胶的浓度 | 第32-34页 |
·真菌气溶胶浓度受环境因素的影响 | 第32-33页 |
·真菌气溶胶危害与浓度密切相关 | 第33页 |
·真菌气溶胶的组成 | 第33-34页 |
·真菌气溶胶的危害 | 第34-35页 |
2. 材料与方法 | 第35-37页 |
·材料和仪器 | 第35页 |
·动物舍情况 | 第35页 |
·沙堡弱培养基 | 第35页 |
·主要仪器和设备 | 第35页 |
·方法 | 第35-37页 |
·实验设计 | 第35-36页 |
·兔舍内外环境中空气样品的采集 | 第36页 |
·空气中真菌浓度计算 | 第36页 |
·优势空气真菌的鉴定 | 第36页 |
·空气真菌粒径分布 | 第36页 |
·数据统计 | 第36-37页 |
3. 结果 | 第37-51页 |
·半封闭式兔舍环境中气载真菌的特点 | 第37页 |
·封闭式兔舍环境中气载真菌的特点 | 第37-38页 |
·气载真菌的组成 | 第38-40页 |
·真菌粒径的分布特征 | 第40-41页 |
·真菌气溶胶种级形态特征 | 第41-51页 |
4. 讨论 | 第51-53页 |
·养殖环境的真菌是大气重要污染源之一 | 第51-52页 |
·优势真菌类群的潜在危害 | 第52页 |
·真菌气溶胶浓度的变化 | 第52页 |
·真菌粒子比细菌更易进入呼吸道深部 | 第52-53页 |
5. 结论 | 第53-54页 |
第二部分 利用 ERIC-PCR 比较不同结构兔舍环境的真菌气溶胶的 组成 | 第54-62页 |
1 引言 | 第54-58页 |
·AGI-30 采样仪器工作原理与结构 | 第54页 |
·AGI-30 采样器特点 | 第54页 |
·ERIC 序列 | 第54-55页 |
·ERIC 结构特征及功能 | 第55页 |
·ERIC-PCR 的原理及特点 | 第55-56页 |
·ERIC-PCR 产物形成规律 | 第56页 |
·ERIC-PCR 技术的应用 | 第56-57页 |
·存在的问题和展望 | 第57页 |
·研究的目的及意义 | 第57-58页 |
2. 材料和方法 | 第58-60页 |
·试验仪器 | 第58页 |
·实验试剂 | 第58页 |
·DNA 提取液 | 第58-59页 |
·方法 | 第59-60页 |
·ERIC-PCR 引物序列 | 第59页 |
·ERIC-PCR 反应体系 | 第59页 |
·最佳扩增程序 | 第59页 |
·ERIC-PCR 图谱的试验数据处理 | 第59-60页 |
3 结果 | 第60-61页 |
·ERIC-PCR 结果 | 第60页 |
·聚类分析结果 | 第60-61页 |
4 讨论 | 第61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
第三部分 通过ITS 序列对兔舍环境中气载须癣毛癣菌气源性传播的推测 | 第62-72页 |
1 引言 | 第62-66页 |
·兔皮肤真菌病 | 第62页 |
·兔皮肤真菌病在国内外的流行情况 | 第62-63页 |
·国内外对兔皮肤真菌病的研究重点 | 第63页 |
·国内外对兔皮肤真菌病传播途径的研究 | 第63-64页 |
·气源性传播存在的可能性 | 第64页 |
·传统的真菌分类鉴定 | 第64页 |
·分子生物学技术在真菌分类中的应用 | 第64-65页 |
·核糖体RNA 基因间隔区ITS 在真菌分子生物学鉴定和分型中的应用 | 第65-66页 |
·研究的目的及意义 | 第66页 |
2. 材料和方法 | 第66-69页 |
·材料 | 第66-67页 |
·实验真菌菌株 | 第66页 |
·培养基 | 第66页 |
·试剂 | 第66-67页 |
·方法 | 第67-69页 |
·氯化苄法提取DNA | 第67-68页 |
·PCR 扩增ITS 序列及其测定 | 第68-69页 |
3 结果 | 第69-70页 |
·PCR 扩增结果 | 第69页 |
·PCR 产物测序结果 | 第69-70页 |
4. 讨论 | 第70-71页 |
·选择ITS 区域进行同源性比对的依据 | 第70页 |
·兔舍环境中须癣毛癣菌气溶胶的传播 | 第70-71页 |
5. 结论 | 第71-72页 |
第四部分:荧光定量PCR 检测兔舍环境中气载烟曲霉的含量 | 第72-86页 |
1. 引言 | 第72-74页 |
·气载烟曲霉的危害 | 第72页 |
·检测气载真菌的传统方法 | 第72-73页 |
·荧光定量PCR | 第73页 |
·实验的目的和意义 | 第73-74页 |
2. 材料和方法 | 第74-82页 |
·材料 | 第74-76页 |
·动物舍情况 | 第74页 |
·标准菌株 | 第74页 |
·主要实验设备 | 第74页 |
·主要试剂 | 第74-75页 |
·常用实验试剂的配制 | 第75-76页 |
·方法 | 第76-82页 |
·空气样品的收集 | 第76页 |
·研磨法快速提取液体中真菌DNA 的步骤 | 第76-77页 |
·真菌菌落DNA 的提取 | 第77页 |
·引物设计与合成 | 第77-78页 |
·质粒标准品的构建 | 第78-81页 |
·制作标准曲线 | 第81-82页 |
·样品的检测 | 第82页 |
3. 结果 | 第82-83页 |
·外围引物扩增Mt01 基因产物的鉴定 | 第82页 |
·测序鉴定 | 第82-83页 |
·标准曲线 | 第83页 |
·气载烟曲霉的浓度 | 第83页 |
4. 讨论 | 第83-85页 |
·荧光定量PCR 方法的优势 | 第83-84页 |
·两种方法所测结果的比较 | 第84-85页 |
·荧光定量PCR 检测结果的风险评估 | 第85页 |
5. 结论 | 第85-86页 |
结论 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-98页 |
附录1 采样仪器及部分采样动物舍情况 | 第98-100页 |
附录2 部分真菌图片 | 第100-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
博士在读期间发表学术论文 | 第104页 |