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HPV16E6E7致敏树突状细胞方法的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
主要英文缩写词第6-10页
第1章 绪论第10-24页
   ·HPV 与宫颈癌的关系第10-17页
     ·宫颈癌的发生机制第10-14页
     ·基于 HPV 的宫颈癌疫苗的研究进展第14-17页
   ·基于树突状细胞的免疫治疗第17-21页
     ·树突状细胞第17-19页
     ·树突状细胞的致敏第19-21页
   ·本课题的研究内容第21-22页
   ·本课题研究技术路线第22-24页
第2章 体外转录 HPV16 E6E7 融合基因系统的建立第24-34页
   ·实验材料第24-26页
     ·菌株和质粒第24页
     ·工具酶和试剂第24页
     ·主要仪器设备第24-25页
     ·配制溶液第25页
     ·引物第25-26页
   ·实验方法第26-31页
     ·体外转录质粒 3.1M 的构建第26-28页
     ·3.1M-EGFP 质粒的构建第28-29页
     ·3.1M-HPV16 E6E7 质粒的构建第29-31页
   ·实验结果第31-32页
     ·质粒 3.1M 的构建第31-32页
     ·3.1M-EGFP,3.1M-HPV16 E6E7 质粒的构建第32页
   ·讨论第32-33页
   ·本章小结第33-34页
第3章 含 HPV16 E6E7 基因的重组腺病毒的构建及鉴定第34-44页
   ·实验材料第34-35页
     ·菌株和质粒第34页
     ·细胞株第34页
     ·工具酶和试剂第34页
     ·血清与抗体第34-35页
     ·主要仪器设备第35页
     ·引物第35页
   ·实验方法第35-40页
     ·大提重组表达质粒 pVR-HPV16 E6E726第35-36页
     ·穿梭质粒 pDC315-HPV16 E6E7 的构建重组腺病毒的包装第36-37页
     ·重组腺病毒的传代和大量扩增第37页
     ·重组腺病毒的鉴定第37-38页
     ·重组腺病毒的纯化与滴度测定第38-40页
   ·实验结果第40-41页
     ·重组质粒 pDC315-HPV16 E6E7 的酶切鉴定结果第40页
     ·重组腺病毒的鉴定结果第40-41页
     ·重组腺病毒滴度的测定第41页
   ·讨论第41-42页
   ·本章小结第42-44页
第4章 树突状细胞的分离培养第44-50页
   ·第44-45页
     ·实验动物第44页
     ·主要仪器设备第44页
     ·主要试剂第44-45页
   ·实验方法第45-46页
     ·小鼠骨髓细胞分离、采集第45页
     ·小鼠骨髓细胞的培养第45-46页
     ·流式细胞仪检测第46页
   ·实验结果第46-48页
     ·DC 形态的观察第46-47页
     ·DC 流式细胞仪检测结果第47-48页
   ·讨论第48页
   ·本章小结第48-50页
第5章 致敏树突状细胞的研究第50-58页
   ·实验材料第50-51页
     ·细胞第50页
     ·主要仪器第50页
     ·主要试剂第50-51页
   ·实验方法第51-53页
     ·体外转录得到 EGFP 和 HPV16 E6E7 的 mRNA第51-52页
     ·用 EGFP 和 HPV16 E6E7 的 mRNA 转染 293T 细胞和 DC 细胞第52页
     ·用重组腺病毒感染 DC第52页
     ·检测感染后蛋白的表达第52-53页
     ·用电穿孔法致敏 DC第53页
   ·实验结果第53-56页
     ·质粒 3.1M-EGFP 及 3.1M-HPV16 E6E7 的体外转录第53-54页
     ·EGFP mRNA 转染 293T 细胞第54页
     ·重组腺病毒感染 DC第54-55页
     ·EGFP mRNA 电转 293T 细胞和 DC第55-56页
     ·WB 检测 rAd-E6E7 感染 DC 的效果第56页
   ·讨论第56-57页
   ·本章小结第57-58页
结论第58-60页
参考文献第60-64页
攻读硕士学位期间所发表的学术论文第64-66页
致谢第66页

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