摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
主要英文缩写词 | 第6-10页 |
第1章 绪论 | 第10-24页 |
·HPV 与宫颈癌的关系 | 第10-17页 |
·宫颈癌的发生机制 | 第10-14页 |
·基于 HPV 的宫颈癌疫苗的研究进展 | 第14-17页 |
·基于树突状细胞的免疫治疗 | 第17-21页 |
·树突状细胞 | 第17-19页 |
·树突状细胞的致敏 | 第19-21页 |
·本课题的研究内容 | 第21-22页 |
·本课题研究技术路线 | 第22-24页 |
第2章 体外转录 HPV16 E6E7 融合基因系统的建立 | 第24-34页 |
·实验材料 | 第24-26页 |
·菌株和质粒 | 第24页 |
·工具酶和试剂 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·配制溶液 | 第25页 |
·引物 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-31页 |
·体外转录质粒 3.1M 的构建 | 第26-28页 |
·3.1M-EGFP 质粒的构建 | 第28-29页 |
·3.1M-HPV16 E6E7 质粒的构建 | 第29-31页 |
·实验结果 | 第31-32页 |
·质粒 3.1M 的构建 | 第31-32页 |
·3.1M-EGFP,3.1M-HPV16 E6E7 质粒的构建 | 第32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
·本章小结 | 第33-34页 |
第3章 含 HPV16 E6E7 基因的重组腺病毒的构建及鉴定 | 第34-44页 |
·实验材料 | 第34-35页 |
·菌株和质粒 | 第34页 |
·细胞株 | 第34页 |
·工具酶和试剂 | 第34页 |
·血清与抗体 | 第34-35页 |
·主要仪器设备 | 第35页 |
·引物 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-40页 |
·大提重组表达质粒 pVR-HPV16 E6E726 | 第35-36页 |
·穿梭质粒 pDC315-HPV16 E6E7 的构建重组腺病毒的包装 | 第36-37页 |
·重组腺病毒的传代和大量扩增 | 第37页 |
·重组腺病毒的鉴定 | 第37-38页 |
·重组腺病毒的纯化与滴度测定 | 第38-40页 |
·实验结果 | 第40-41页 |
·重组质粒 pDC315-HPV16 E6E7 的酶切鉴定结果 | 第40页 |
·重组腺病毒的鉴定结果 | 第40-41页 |
·重组腺病毒滴度的测定 | 第41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
·本章小结 | 第42-44页 |
第4章 树突状细胞的分离培养 | 第44-50页 |
· | 第44-45页 |
·实验动物 | 第44页 |
·主要仪器设备 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-46页 |
·小鼠骨髓细胞分离、采集 | 第45页 |
·小鼠骨髓细胞的培养 | 第45-46页 |
·流式细胞仪检测 | 第46页 |
·实验结果 | 第46-48页 |
·DC 形态的观察 | 第46-47页 |
·DC 流式细胞仪检测结果 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48页 |
·本章小结 | 第48-50页 |
第5章 致敏树突状细胞的研究 | 第50-58页 |
·实验材料 | 第50-51页 |
·细胞 | 第50页 |
·主要仪器 | 第50页 |
·主要试剂 | 第50-51页 |
·实验方法 | 第51-53页 |
·体外转录得到 EGFP 和 HPV16 E6E7 的 mRNA | 第51-52页 |
·用 EGFP 和 HPV16 E6E7 的 mRNA 转染 293T 细胞和 DC 细胞 | 第52页 |
·用重组腺病毒感染 DC | 第52页 |
·检测感染后蛋白的表达 | 第52-53页 |
·用电穿孔法致敏 DC | 第53页 |
·实验结果 | 第53-56页 |
·质粒 3.1M-EGFP 及 3.1M-HPV16 E6E7 的体外转录 | 第53-54页 |
·EGFP mRNA 转染 293T 细胞 | 第54页 |
·重组腺病毒感染 DC | 第54-55页 |
·EGFP mRNA 电转 293T 细胞和 DC | 第55-56页 |
·WB 检测 rAd-E6E7 感染 DC 的效果 | 第56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·本章小结 | 第57-58页 |
结论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第64-66页 |
致谢 | 第66页 |