| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| ·植物花香的研究概况 | 第13-18页 |
| ·植物花香成分的分类 | 第13-14页 |
| ·萜烯类化合物 | 第13页 |
| ·苯丙酸类化合物/苯环型化合物 | 第13-14页 |
| ·脂肪酸衍生物 | 第14页 |
| ·植物花香的生物合成途径 | 第14-15页 |
| ·萜类化合物的生物合成途径 | 第14页 |
| ·苯基/苯丙烷类化合物的生物合成途径 | 第14页 |
| ·脂肪酸衍生物的生物合成途径 | 第14-15页 |
| ·植物花香的作用 | 第15-16页 |
| ·调节植物的生长发育 | 第15页 |
| ·吸引传粉者 | 第15页 |
| ·防止食草动物和病原体的伤害 | 第15-16页 |
| ·促进植株间的交流 | 第16页 |
| ·植物花香释放的调控因素 | 第16-17页 |
| ·时间的调控 | 第16页 |
| ·空间的调控 | 第16-17页 |
| ·植物花香的分析技术 | 第17页 |
| ·顶空分析法 | 第17页 |
| ·固相微萃取法 | 第17页 |
| ·植物花香的应用 | 第17-18页 |
| ·用于食品加工业 | 第17-18页 |
| ·用于医疗保健 | 第18页 |
| ·用于农业 | 第18页 |
| ·用于饲养业 | 第18页 |
| ·植物花香基因的研究进展 | 第18-20页 |
| ·植物花香的关键酶 | 第18-19页 |
| ·植物花香相关基因的克隆 | 第19页 |
| ·植物花香基因工程的研究状况 | 第19-20页 |
| ·转入新基因 | 第20页 |
| ·调控内源基因 | 第20页 |
| ·转入转录调控子 | 第20页 |
| ·月季花香基因的研究进展 | 第20-21页 |
| ·花香物质丁香酚的研究进展 | 第21-23页 |
| ·丁香酚的简介 | 第21-22页 |
| ·丁香酚的生物合成途径 | 第22页 |
| ·丁香酚合成酶基因的研究 | 第22-23页 |
| ·丁香酚合成酶基因的简介 | 第22-23页 |
| ·丁香酚合成酶基因的克隆 | 第23页 |
| ·丁香酚合成酶基因的表达模式 | 第23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 月月粉花香丁香酚合成酶基因RcEGSl的克隆 | 第24-45页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-36页 |
| ·总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·月月粉RcEGS1基因cDNA保守区域的克隆 | 第26-30页 |
| ·引物的设计,合成与稀释 | 第26页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·PCR产物切胶回收 | 第28页 |
| ·目的片段与T载体的连接反应 | 第28-29页 |
| ·连接产物的转化 | 第29页 |
| ·挑选单克隆、培养和PCR鉴定 | 第29-30页 |
| ·3'RACE | 第30-31页 |
| ·3'RACE引物的设计 | 第30页 |
| ·反转录反应 | 第30页 |
| ·套式PCR反应 | 第30-31页 |
| ·5'RACE | 第31-34页 |
| ·5'RACE引物的设计 | 第31-32页 |
| ·去磷酸化处理 | 第32页 |
| ·“去帽子”反应 | 第32-33页 |
| ·5'RACE Adaptor的连接 | 第33-34页 |
| ·反转录反应 | 第34页 |
| ·套式PCR反应 | 第34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第34页 |
| ·丁香酚合成酶基因全长的克隆 | 第34-35页 |
| ·引物设计 | 第34-35页 |
| ·基因全长的扩增 | 第35页 |
| ·目的片段的回收与克隆 | 第35页 |
| ·序列分析 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-43页 |
| ·月月粉总RNA的提取 | 第36页 |
| ·月月粉RcEGS1基因cDNA保守区域的克隆和序列分析 | 第36-38页 |
| ·月月粉RcEGS1基因cDNA的RACE克隆及序列分析 | 第38-40页 |
| ·月月粉RcEGS1基因cDNA的3'RACE克隆及序列分析 | 第38-39页 |
| ·月月粉RcEGS1基因cDNA的5'RACE克隆及序列分析 | 第39-40页 |
| ·全长基因片段的克隆 | 第40页 |
| ·月月粉花香RcEGS1基因全长的序列分析 | 第40-43页 |
| ·RcEGS1推导的氨基酸序列的同源性及系统进化分析 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·RNA质量对基因克隆的影响 | 第43-44页 |
| ·月月粉花香RcEGS1基因的序列分析 | 第44-45页 |
| 第三章 月月粉丁香酚合成酶基因RcEGS1的表达分析 | 第45-50页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·植物材料 | 第45-46页 |
| ·试剂和仪器 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-47页 |
| ·总RNA的提取 | 第46页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第46页 |
| ·引物的设计,合成与稀释 | 第46页 |
| ·RcEGS1基因Real-Time PCR扩增 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-48页 |
| ·RcEGS1基因在不同开放时期的表达分析 | 第47-48页 |
| ·RcEGS1基因在不同组织中的表达分析 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 丁香酚合成酶基因植物表达载体的构建 | 第50-58页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·菌株与载体 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·培养基 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-55页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第51-52页 |
| ·质粒的准备 | 第52页 |
| ·质粒pMD18-RcEGS1的准备 | 第52页 |
| ·质粒pBIA31的准备 | 第52页 |
| ·酶切反应 | 第52-55页 |
| ·HindⅢ酶切pMD18-RcEGS1 | 第52页 |
| ·重组质粒pMD18-RcEGS1和表达载体pBIA31的双酶切 | 第52-53页 |
| ·连接反应 | 第53页 |
| ·转化感受态细胞 | 第53-54页 |
| ·重组子进行PCR和双酶切鉴定 | 第54-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-57页 |
| ·HindⅢ酶切pMD18-RcEGS1 | 第55页 |
| ·双酶切反应 | 第55-56页 |
| ·重组子进行PCR和双酶切鉴定 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 第五章 月月粉丁香酚合成酶基因对矮牵牛的转化 | 第58-65页 |
| ·实验材料 | 第58-59页 |
| ·植物材料与载体 | 第58页 |
| ·载体 | 第58页 |
| ·溶液及培养基的配置 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59-62页 |
| ·矮牵牛转化受体系统的建立 | 第59页 |
| ·外植体灭菌及接种 | 第59页 |
| ·叶片外植体直接分化成苗 | 第59页 |
| ·根瘤农杆菌感受态细胞的制备、转化及鉴定 | 第59-60页 |
| ·根瘤农杆菌感受态细胞的制备 | 第59-60页 |
| ·质粒向农杆菌中的转化及鉴定 | 第60页 |
| ·农杆菌叶盘法转化矮牵牛 | 第60-61页 |
| ·受体材料预培养 | 第60页 |
| ·农杆菌培养 | 第60页 |
| ·侵染 | 第60-61页 |
| ·共培养 | 第61页 |
| ·选择培养 | 第61页 |
| ·继代选择培养 | 第61页 |
| ·生根培养 | 第61页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第61-62页 |
| ·矮牵牛叶片总DNA的提取 | 第61-62页 |
| ·PCR检测 | 第62页 |
| ·结果与分析 | 第62-63页 |
| ·农杆菌叶盘法转化 | 第62-63页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| ·农杆菌叶盘法转化矮牵牛 | 第63-64页 |
| ·转基因植株的检测 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 研究生在读期间论文发表情况 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
