摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
·课题提出 | 第11页 |
·赤霉素的研究进展 | 第11-20页 |
·赤霉素的生物合成途径 | 第11-13页 |
·赤霉素生物合成关键酶 | 第13-14页 |
·古巴焦磷酸合酶(CPS) | 第13页 |
·内根-贝壳杉烯合成酶(KS) | 第13页 |
·内根-贝壳杉烯氧化酶(KAO) | 第13-14页 |
·GA20-氧化酶 | 第14页 |
·赤霉素的信号传导途径研究 | 第14-16页 |
·GA反应突变体 | 第14页 |
·GA信号传导中的主要成分 | 第14-16页 |
·正向作用因子 | 第14-15页 |
·反向作用因子 | 第15-16页 |
·GA信号传导模式 | 第16-17页 |
·赤霉素受体 | 第17-19页 |
·赤霉素受体基因GID1的发现 | 第17页 |
·赤霉素受体基因GID1 | 第17-19页 |
·赤霉素受体基因GID1的研究 | 第17页 |
·GID1蛋白 | 第17-18页 |
·GID1识别GA的结构基础 | 第18-19页 |
·DELLA蛋白 | 第19页 |
·霉素受体基因GID1与DELLA蛋白的互作 | 第19-20页 |
·本研究目的和内容 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-35页 |
·材料 | 第21页 |
·植物材料 | 第21页 |
·菌种与质粒 | 第21页 |
·引物 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-24页 |
·各种酶类 | 第21页 |
·各种试剂盒 | 第21页 |
·抗生素 | 第21-22页 |
·质粒提取试剂 | 第22页 |
·DNA提取试剂 | 第22页 |
·RNA提取试剂 | 第22页 |
·反转录试剂 | 第22-23页 |
·培养基 | 第23-24页 |
·LB培养基 | 第23页 |
·YEB培养基 | 第23页 |
·MS培养基 | 第23页 |
·其他 | 第23-24页 |
·主要分析仪器设备 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-26页 |
·烟草农杆菌的转化,培养 | 第24-25页 |
·转基因烟草DNA提取 | 第25页 |
·转基因植株的PCR鉴定 | 第25-26页 |
·nptⅡ基因PCR鉴定 | 第25-26页 |
·目的基因CsGID1 PCR鉴定 | 第26页 |
·目的基因CsGID1的转化 | 第26-28页 |
·目的基因CsGID1质粒提取 | 第26-27页 |
·胶回收 | 第27页 |
·大肠杆菌转化 | 第27页 |
·农杆菌转化 | 第27-28页 |
·CsGID1基因的亚细胞定位 | 第28-30页 |
·CsGID1与GFP融合蛋白表达载体的构建 | 第28-30页 |
·农杆菌介导的洋葱表皮细胞的转化和观察 | 第30页 |
·农杆菌的转化和筛选 | 第30页 |
·洋葱表皮细胞的浸染与共培养 | 第30页 |
·定量PCR分析赤霉素受体基因CsGID1的表达 | 第30-32页 |
·RNA提取 | 第30-31页 |
·RNA纯化 | 第31页 |
·cDNA的合成及引物特异性检测 | 第31-32页 |
·定量PCR | 第32页 |
·转基因植株与对照植株叶片主脉导管观察 | 第32-33页 |
·植株生理指标的测定 | 第33-35页 |
·植株各项生理指标的测定 | 第33页 |
·激素处理 | 第33-34页 |
·转基因植株叶绿素含量的测定 | 第34页 |
·净光合速率测定 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-43页 |
·CsGID1序列分析 | 第35页 |
·CsGID1基因的亚细胞定位分析 | 第35-36页 |
·转基因植株的分子鉴定 | 第36页 |
·载体pMV-CsGID1的转基因植株nptⅡ的PCR检测 | 第36页 |
·载体pMV-CsGID1的转基因植株中CsGID1基因的PCR检测 | 第36页 |
·转基因植株木质素导管观察 | 第36-37页 |
·植株的形态检测 | 第37-40页 |
·植株株高,叶长,节间直径的测量 | 第37-38页 |
·不同激素处理下植株的生长状况 | 第38-39页 |
·转基因植株的光合特性分析 | 第39-40页 |
·不同处理株系叶绿素含量的测定 | 第39页 |
·不同处理株系光合速率的测定 | 第39-40页 |
·CsGID1基因的表达分析 | 第40-43页 |
·RNA质量的检测 | 第40页 |
·焚光定量PCR引物特异性检测 | 第40-41页 |
·目的基因CsGID1表达分析 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
·CsGID1对植株形态影响的分析 | 第43页 |
·CsGID1的表达分析 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录 | 第51-53页 |
致谢 | 第53页 |