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纽荷尔脐橙中赤霉素受体基因CsGID1的功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略词表第10-11页
1 前言第11-21页
   ·课题提出第11页
   ·赤霉素的研究进展第11-20页
     ·赤霉素的生物合成途径第11-13页
     ·赤霉素生物合成关键酶第13-14页
       ·古巴焦磷酸合酶(CPS)第13页
       ·内根-贝壳杉烯合成酶(KS)第13页
       ·内根-贝壳杉烯氧化酶(KAO)第13-14页
       ·GA20-氧化酶第14页
     ·赤霉素的信号传导途径研究第14-16页
       ·GA反应突变体第14页
       ·GA信号传导中的主要成分第14-16页
         ·正向作用因子第14-15页
         ·反向作用因子第15-16页
     ·GA信号传导模式第16-17页
     ·赤霉素受体第17-19页
       ·赤霉素受体基因GID1的发现第17页
       ·赤霉素受体基因GID1第17-19页
         ·赤霉素受体基因GID1的研究第17页
         ·GID1蛋白第17-18页
         ·GID1识别GA的结构基础第18-19页
     ·DELLA蛋白第19页
     ·霉素受体基因GID1与DELLA蛋白的互作第19-20页
   ·本研究目的和内容第20-21页
2 材料与方法第21-35页
   ·材料第21页
     ·植物材料第21页
     ·菌种与质粒第21页
     ·引物第21页
   ·主要试剂第21-24页
     ·各种酶类第21页
     ·各种试剂盒第21页
     ·抗生素第21-22页
     ·质粒提取试剂第22页
     ·DNA提取试剂第22页
     ·RNA提取试剂第22页
     ·反转录试剂第22-23页
     ·培养基第23-24页
       ·LB培养基第23页
       ·YEB培养基第23页
       ·MS培养基第23页
       ·其他第23-24页
   ·主要分析仪器设备第24页
   ·实验方法第24-26页
     ·烟草农杆菌的转化,培养第24-25页
     ·转基因烟草DNA提取第25页
     ·转基因植株的PCR鉴定第25-26页
       ·nptⅡ基因PCR鉴定第25-26页
       ·目的基因CsGID1 PCR鉴定第26页
   ·目的基因CsGID1的转化第26-28页
     ·目的基因CsGID1质粒提取第26-27页
     ·胶回收第27页
     ·大肠杆菌转化第27页
     ·农杆菌转化第27-28页
   ·CsGID1基因的亚细胞定位第28-30页
     ·CsGID1与GFP融合蛋白表达载体的构建第28-30页
     ·农杆菌介导的洋葱表皮细胞的转化和观察第30页
       ·农杆菌的转化和筛选第30页
       ·洋葱表皮细胞的浸染与共培养第30页
   ·定量PCR分析赤霉素受体基因CsGID1的表达第30-32页
     ·RNA提取第30-31页
     ·RNA纯化第31页
     ·cDNA的合成及引物特异性检测第31-32页
     ·定量PCR第32页
   ·转基因植株与对照植株叶片主脉导管观察第32-33页
   ·植株生理指标的测定第33-35页
     ·植株各项生理指标的测定第33页
     ·激素处理第33-34页
     ·转基因植株叶绿素含量的测定第34页
     ·净光合速率测定第34-35页
3 结果与分析第35-43页
   ·CsGID1序列分析第35页
   ·CsGID1基因的亚细胞定位分析第35-36页
   ·转基因植株的分子鉴定第36页
     ·载体pMV-CsGID1的转基因植株nptⅡ的PCR检测第36页
     ·载体pMV-CsGID1的转基因植株中CsGID1基因的PCR检测第36页
   ·转基因植株木质素导管观察第36-37页
   ·植株的形态检测第37-40页
     ·植株株高,叶长,节间直径的测量第37-38页
     ·不同激素处理下植株的生长状况第38-39页
     ·转基因植株的光合特性分析第39-40页
       ·不同处理株系叶绿素含量的测定第39页
       ·不同处理株系光合速率的测定第39-40页
   ·CsGID1基因的表达分析第40-43页
     ·RNA质量的检测第40页
     ·焚光定量PCR引物特异性检测第40-41页
     ·目的基因CsGID1表达分析第41-43页
4 讨论第43-45页
   ·CsGID1对植株形态影响的分析第43页
   ·CsGID1的表达分析第43-45页
参考文献第45-51页
附录第51-53页
致谢第53页

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