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生长素及ABP1对烟草BY2细胞膜泡运输的调控

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-22页
 1 生长素结合蛋白ABP1第13-18页
   ·ABP1的分布及亚细胞定位第13页
   ·ABP1的结构和性质第13-15页
   ·关于ABP1基因第15页
   ·ABP1作用的分子机制第15-18页
 2 植物细胞的膜泡运输第18-20页
   ·植物细胞的被膜小泡第18页
   ·植物细胞膜泡运输的途径第18-19页
   ·ABP1与细胞膜泡运输第19-20页
 3 分泌载体膜蛋白SCAMPs家族第20-22页
第二章 NtSCAMP2和NtABP1基因cDNA的克隆第22-35页
 1 材料与试剂第22-23页
   ·植物材料第22页
   ·菌株第22页
   ·酶与试剂盒第22页
   ·试剂第22-23页
 2 实验方法第23-30页
   ·烟草BY2细胞总RNA的提取第23页
   ·反转录RT-PCR第23-24页
   ·NtSCAMP2基因的克隆第24-28页
   ·NtABP1基因的克隆第28-30页
 3 结果与分析第30-35页
   ·烟草总RNA提取第30页
   ·NtSCAMP2基因的扩增以及检测第30-31页
   ·NtABP1基因的扩增以及检测第31-32页
   ·NtSCAMP2和NtABP1基因的序列分析第32-35页
第三章 转化载体的构建第35-48页
 1 材料与试剂第35-36页
   ·菌株与质粒第35页
   ·酶与试剂盒第35页
   ·试剂第35-36页
 2 实验方法第36-43页
   ·pEGAD-EGFP-NtSCAMP2载体的构建第36-38页
   ·pER16-NtABP1基因过表达及pER16-antiNtABP1干扰载体的构建第38-41页
   ·pER16-NtABP1重组载体中插入NOS终止子第41-43页
 3 结果与讨论第43-48页
   ·标记载体pEGAD-EGFP-NtSCAMP2的构建第43-44页
   ·pER16-NtABP、pER16-antiNtABP1载体的构建与验证第44-48页
第四章 BY-2细胞的转化第48-61页
 1 材料与试剂第48页
   ·植物材料第48页
   ·菌株第48页
   ·主要试剂第48页
 2 实验方法第48-53页
   ·农杆菌感受态细胞的制备第48-49页
   ·植物表达载体对根瘤农杆菌的转化第49页
   ·农杆菌的菌落PCR检测第49页
   ·烟草悬浮细胞系BY-2的培养第49-50页
   ·烟草悬浮细胞系BY-2的活体转化与抗性筛选第50-52页
   ·转基因BY2细胞的显微观察第52-53页
 4 结果与分析第53-60页
   ·BY2细胞悬浮培养第53页
   ·第一轮转化BY2细胞的抗性筛选第53-54页
   ·第二轮转化BY2细胞的抗性筛选第54页
   ·转基因分子检测第54-55页
   ·ABP1诱导过表达和干扰表达后荧光分布的结果分析第55-60页
 5 讨论第60-61页
第五章 结果与结论第61-64页
 1 结果归纳第61页
 2 结论第61-64页
参考文献第64-71页
附录A:主要试剂配置第71-73页
致谢第73-74页
作者简介第74页

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