摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1 生长素结合蛋白ABP1 | 第13-18页 |
·ABP1的分布及亚细胞定位 | 第13页 |
·ABP1的结构和性质 | 第13-15页 |
·关于ABP1基因 | 第15页 |
·ABP1作用的分子机制 | 第15-18页 |
2 植物细胞的膜泡运输 | 第18-20页 |
·植物细胞的被膜小泡 | 第18页 |
·植物细胞膜泡运输的途径 | 第18-19页 |
·ABP1与细胞膜泡运输 | 第19-20页 |
3 分泌载体膜蛋白SCAMPs家族 | 第20-22页 |
第二章 NtSCAMP2和NtABP1基因cDNA的克隆 | 第22-35页 |
1 材料与试剂 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株 | 第22页 |
·酶与试剂盒 | 第22页 |
·试剂 | 第22-23页 |
2 实验方法 | 第23-30页 |
·烟草BY2细胞总RNA的提取 | 第23页 |
·反转录RT-PCR | 第23-24页 |
·NtSCAMP2基因的克隆 | 第24-28页 |
·NtABP1基因的克隆 | 第28-30页 |
3 结果与分析 | 第30-35页 |
·烟草总RNA提取 | 第30页 |
·NtSCAMP2基因的扩增以及检测 | 第30-31页 |
·NtABP1基因的扩增以及检测 | 第31-32页 |
·NtSCAMP2和NtABP1基因的序列分析 | 第32-35页 |
第三章 转化载体的构建 | 第35-48页 |
1 材料与试剂 | 第35-36页 |
·菌株与质粒 | 第35页 |
·酶与试剂盒 | 第35页 |
·试剂 | 第35-36页 |
2 实验方法 | 第36-43页 |
·pEGAD-EGFP-NtSCAMP2载体的构建 | 第36-38页 |
·pER16-NtABP1基因过表达及pER16-antiNtABP1干扰载体的构建 | 第38-41页 |
·pER16-NtABP1重组载体中插入NOS终止子 | 第41-43页 |
3 结果与讨论 | 第43-48页 |
·标记载体pEGAD-EGFP-NtSCAMP2的构建 | 第43-44页 |
·pER16-NtABP、pER16-antiNtABP1载体的构建与验证 | 第44-48页 |
第四章 BY-2细胞的转化 | 第48-61页 |
1 材料与试剂 | 第48页 |
·植物材料 | 第48页 |
·菌株 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
2 实验方法 | 第48-53页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第48-49页 |
·植物表达载体对根瘤农杆菌的转化 | 第49页 |
·农杆菌的菌落PCR检测 | 第49页 |
·烟草悬浮细胞系BY-2的培养 | 第49-50页 |
·烟草悬浮细胞系BY-2的活体转化与抗性筛选 | 第50-52页 |
·转基因BY2细胞的显微观察 | 第52-53页 |
4 结果与分析 | 第53-60页 |
·BY2细胞悬浮培养 | 第53页 |
·第一轮转化BY2细胞的抗性筛选 | 第53-54页 |
·第二轮转化BY2细胞的抗性筛选 | 第54页 |
·转基因分子检测 | 第54-55页 |
·ABP1诱导过表达和干扰表达后荧光分布的结果分析 | 第55-60页 |
5 讨论 | 第60-61页 |
第五章 结果与结论 | 第61-64页 |
1 结果归纳 | 第61页 |
2 结论 | 第61-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录A:主要试剂配置 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简介 | 第74页 |