| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一部分 研究论文 | 第12-85页 |
| 第一章 绒山羊和绵羊Izum4和Tssk6 cDNA克隆 | 第12-34页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 1 材料与方法 | 第14-19页 |
| ·实验材料 | 第14-15页 |
| ·实验方法 | 第15-19页 |
| 2 结果 | 第19-33页 |
| ·绵羊和绒山羊睾丸组织总RNA的提取及cDNA检测 | 第19页 |
| ·绒山羊和绵羊Izumo4和Tssk6 RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第19-20页 |
| ·绒山羊和绵羊Izumo4和Tssk6 cDNA克隆与鉴定 | 第20-21页 |
| ·绒山羊和绵羊Izumo4和Tssk6 cDNA测序结果与分析 | 第21-23页 |
| ·绒山羊和绵羊Izumo4和Tssk6的氨基酸序列分析 | 第23-24页 |
| ·绒山羊Izumo4和TSSK6蛋白质的结构分析 | 第24-26页 |
| ·不同动物的Izumo4和TSSK6蛋白氨基酸序列的比较分析 | 第26-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 第二章 绒山羊HIS-Izumo4和HIS-TSSK6的原核表达与分离纯化 | 第34-46页 |
| 前言 | 第34-35页 |
| 1 材料和方法 | 第35-41页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·试验方法 | 第36-41页 |
| 2 结果 | 第41-45页 |
| ·pET-gIzumo4/Tssk6重组载体的构建与PCR和酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·绒山羊Izumo4和TSSK6在大肠杆菌中的诱导表达及纯化 | 第42-43页 |
| ·HIS-Izumo4/TSSK6融合蛋白质的可溶性及包涵体分析 | 第43页 |
| ·HIS-Izumo4/TSSK6融合蛋白的Western blot的鉴定 | 第43-44页 |
| ·HIS-Izumo4/TSSK6融合蛋白质的纯化与浓度测定 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 第三章 小鼠抗绒山羊Izumo4和TSSK6腹水多克隆抗体的制备及纯化 | 第46-54页 |
| 前言 | 第46-47页 |
| 1 材料和方法 | 第47-51页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-51页 |
| 2 结果 | 第51-53页 |
| ·小鼠抗绒山羊Izumo4和TSSK6腹水多克隆抗体的鉴定 | 第51-52页 |
| ·小鼠抗山羊CRISP2多克隆抗体的效价测定 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| 第四章 Izumo4和TSSK6在睾丸组织和精子中的定位检测 | 第54-62页 |
| 前言 | 第54-55页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| 2 结果 | 第58-61页 |
| ·绒山羊睾丸组织中Izumo4和TSSK6的定位 | 第58-59页 |
| ·绒山羊精子中Izumo4和TSSK6的定位 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 第五章 Izumo4和TSSK6与其它蛋白之间的相互作用研究 | 第62-85页 |
| 前言 | 第62-65页 |
| 1 材料与方法 | 第65-74页 |
| ·材料 | 第65-67页 |
| ·实验方法 | 第67-74页 |
| 2 结果 | 第74-82页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第74-76页 |
| ·免疫共沉淀及Western blot结果 | 第76-79页 |
| ·酵母双杂交结果 | 第79-82页 |
| 3 讨论 | 第82-85页 |
| 第二部分 文献综述 | 第85-94页 |
| 前言 | 第85-86页 |
| 1 Izumo家族 | 第86-87页 |
| ·发现和功能 | 第86页 |
| ·结构与分布 | 第86-87页 |
| 2 Pdia3蛋白二硫异构氧化还原酶 | 第87-88页 |
| ·结构与分布 | 第87页 |
| ·功能 | 第87-88页 |
| 3 Tssk6-睾丸特异性丝氨酸/苏氨酸激酶6 | 第88-90页 |
| ·发现与表达 | 第88页 |
| ·结构与功能 | 第88-90页 |
| 4 精卵融合蛋白相互作用的展望 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 攻读硕士期间参与的科研项目和发表的学术论文 | 第95页 |
