| 缩略词表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| ·果胶与果胶酶的特性及应用 | 第13-20页 |
| ·果胶 | 第13页 |
| ·果胶酶 | 第13-20页 |
| ·碱性果胶酶的生产 | 第20-21页 |
| ·果胶酶的分离纯化 | 第21-22页 |
| ·利用乳酸菌表面展示系统构建的口服疫苗 | 第22-26页 |
| ·研究内容 | 第26-28页 |
| 第二章 产果胶酶菌株的筛选和检测 | 第28-44页 |
| ·材料与试剂 | 第29-31页 |
| ·原料 | 第29页 |
| ·培养基及试剂 | 第29-31页 |
| ·方法 | 第31-37页 |
| ·筛选产果胶酶菌株 | 第31页 |
| ·测定果胶酶酶活 | 第31-32页 |
| ·测定9株菌的果胶酶酶活曲线 | 第32页 |
| ·大肠杆菌感受态制备,转化以及碱裂解法快速提质粒法 | 第32-33页 |
| ·菌株鉴定 | 第33-34页 |
| ·测定P2、P3和P6的果胶酶最适pH | 第34页 |
| ·测定P2、P6的酶活曲线 | 第34页 |
| ·测定P6的发酵液的酶系组成 | 第34-37页 |
| ·结果 | 第37-42页 |
| ·产果胶酶菌株的分离 | 第37-38页 |
| ·半乳糖醛酸标准曲线 | 第38-39页 |
| ·九株菌的果胶酶酶活曲线 | 第39页 |
| ·不同pH下P2、P3和P6的果胶酶最适pH | 第39-40页 |
| ·pH10下P2和P6的果胶酶酶活曲线 | 第40-41页 |
| ·P6菌株鉴定结果 | 第41页 |
| ·麦芽糖、酪氨酸、葡萄糖的标准曲线 | 第41-42页 |
| ·B.subtilis P6的发酵液的酶系组成 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 产果胶酶培养基的优化和果胶酶的分离纯化 | 第44-56页 |
| ·材料与试剂 | 第44-45页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·试剂与仪器 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·果胶酶酶活测定方法 | 第45页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第45页 |
| ·三氯乙酸(TCA)沉淀蛋白法 | 第45页 |
| ·层析技术分离纯化果胶酶 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-53页 |
| ·氮源优化 | 第46-48页 |
| ·碳源优化 | 第48页 |
| ·表面活性剂对产果胶酶的影响 | 第48-49页 |
| ·无机盐优化 | 第49页 |
| ·降低培养基成本 | 第49-50页 |
| ·果胶酶的分离纯化 | 第50-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| 第四章 癌胚抗原基因的克隆及在乳酸菌细胞表面的展示 | 第56-76页 |
| ·材料 | 第56-58页 |
| ·菌株、基因和实验动物 | 第56-57页 |
| ·培养基及试剂 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-65页 |
| ·大肠杆菌感受态制备、转化以及异源蛋白诱导表达和纯化 | 第58-59页 |
| ·乳酸乳球菌感受态的制备及电转条件 | 第59-60页 |
| ·CEA基因的克隆及测序 | 第60页 |
| ·质粒构建 | 第60-61页 |
| ·乳酸乳球菌nisin诱导蛋白表达以及蛋白提取 | 第61-62页 |
| ·His-tag蛋白纯化方法 | 第62-63页 |
| ·重组乳酸菌口服液的制备 | 第63页 |
| ·小鼠免疫试验 | 第63-65页 |
| ·结果 | 第65-73页 |
| ·CEA基因的克隆及验证 | 第65页 |
| ·CEA表达载体的构建 | 第65-67页 |
| ·癌胚抗原的表面展示及Western blotting验证 | 第67-68页 |
| ·CEA-His的表达与纯化 | 第68页 |
| ·小鼠免疫实验 | 第68-73页 |
| ·讨论 | 第73-76页 |
| 参考文献 | 第76-89页 |
| 致谢 | 第89-92页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第92页 |
