| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-33页 |
| ·亚洲玉米螟 | 第15页 |
| ·几丁质 | 第15-16页 |
| ·几丁质的结构 | 第15-16页 |
| ·几丁质在昆虫体内的分布 | 第16页 |
| ·几丁质的降解 | 第16-20页 |
| ·细菌几丁质降解系统 | 第17-18页 |
| ·昆虫几丁质降解系统 | 第18-20页 |
| ·β-N-乙酰己糖胺酶 | 第20-31页 |
| ·3家族β-N-乙酰己糖胺酶 | 第20-21页 |
| ·84家族β-N-乙酰己糖胺酶 | 第21-22页 |
| ·20家族β-N-乙酰己糖胺酶 | 第22-24页 |
| ·β-N-乙酰己糖胺酶的结构和催化机理 | 第24-28页 |
| ·β-N-乙酰己糖胺酶的抑制剂 | 第28-31页 |
| ·本论文的选题依据和研究内容 | 第31-33页 |
| ·选题依据 | 第31-32页 |
| ·研究内容 | 第32-33页 |
| 2 亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶基因克隆及转录水平研究 | 第33-55页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·实验材料与方法 | 第33-37页 |
| ·亚洲玉米螟的人工饲养 | 第33-34页 |
| ·总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶基因OfHEXl的克隆 | 第35-37页 |
| ·亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶基因转录水平分析 | 第37页 |
| ·实验结果 | 第37-53页 |
| ·亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶基因OfHEXl | 第37-38页 |
| ·亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶基因OfHEXl的生物信息学分析 | 第38-49页 |
| ·亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶基因OfHEXl转录水平研究 | 第49-53页 |
| ·讨论 | 第53页 |
| ·小结 | 第53-55页 |
| 3 亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶的分离纯化 | 第55-68页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·实验材料与方法 | 第55-59页 |
| ·蛋白定性、定量方法与酶活测定方法 | 第55-56页 |
| ·幼虫的饲养、处理以及酶的粗提 | 第56页 |
| ·小分子杂质的去除 | 第56-57页 |
| ·SOURCE30Q阴离子交换层析 | 第57页 |
| ·CHT羟基磷灰石层析 | 第57页 |
| ·MonoQ阴离子交换层析 | 第57页 |
| ·Superdex200凝胶过滤层析 | 第57-58页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第58页 |
| ·几丁质亲和层析 | 第58页 |
| ·产物类似物亲和层析 | 第58-59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-67页 |
| ·纯化策略 | 第59页 |
| ·常规分离纯化流程 | 第59-65页 |
| ·亲和层析探索 | 第65-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 4 亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶蛋白的性质鉴定 | 第68-82页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·实验材料与方法 | 第68-70页 |
| ·分子量测定 | 第68-69页 |
| ·二硫键分析 | 第69页 |
| ·等电点测定 | 第69页 |
| ·糖基化分析 | 第69-70页 |
| ·肽质量指纹图谱及氨基酸序列测定 | 第70页 |
| ·实验结果与讨论 | 第70-80页 |
| ·OfHexl的分子量和组成方式 | 第70-74页 |
| ·二聚体之间的相互作用力 | 第74-75页 |
| ·二硫键分析 | 第75-76页 |
| ·等电点测定 | 第76-77页 |
| ·糖基化分析 | 第77-79页 |
| ·氨基酸序列测定 | 第79-80页 |
| ·小结 | 第80-82页 |
| 5 亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶的酶学性质表征 | 第82-113页 |
| ·引言 | 第82页 |
| ·实验材料与方法 | 第82-86页 |
| ·温度和pH值对酶活力的影响 | 第82-83页 |
| ·金属离子和EDTA对酶活力的影响 | 第83页 |
| ·底物选择性,水解模式和催化动力学 | 第83-85页 |
| ·特定氨基酸的化学修饰 | 第85页 |
| ·抑制剂对酶活力的影响 | 第85-86页 |
| ·实验结果 | 第86-107页 |
| ·酶催化的最适条件 | 第86-88页 |
| ·OfHexl的底物谱 | 第88-90页 |
| ·OfHexl的作用机理 | 第90-97页 |
| ·OfHexl的抑制及机理 | 第97-107页 |
| ·讨论 | 第107-111页 |
| ·亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶的底物谱和生理功能 | 第107-108页 |
| ·亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶的作用机理 | 第108-110页 |
| ·亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶的小分子抑制剂 | 第110-111页 |
| ·小结 | 第111-113页 |
| 结论 | 第113-115页 |
| 创新点摘要 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-126页 |
| 附录A 质谱法测定氨基酸序列 | 第126-129页 |
| 附录B OfHEXl的cDNA序列与编码的氨基酸序列 | 第129-132页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第132-133页 |
| 攻读博士学位期间专利申请授权情况 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 作者简介 | 第135-136页 |
