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川泽泻(Alisma plantago-aquatica.Linn)块茎凝集素的分离纯化和性质研究

第一部分 川泽泻块茎凝集素(Alisma plantago-aquatica lectin)的分离、纯化和性质研究第1-90页
 中文摘要第8-11页
 英文摘要第11-14页
 1 引言第14-17页
 2 材料、试剂和仪器第17-19页
   ·材料第17页
   ·试剂第17-18页
   ·仪器第18-19页
 3 方法第19-27页
   ·泽泻凝集素的分离纯化第19-20页
     ·APL粗品的制备第19页
     ·凝集素 APL活性测定方法第19页
     ·CM-Sepharose F阳离子交换柱层析纯化 APL第19-20页
     ·DEA-Sepharose FF阴离子交换层析柱纯化 APL第20页
     ·甲壳素亲和层析柱纯化 APL第20页
     ·分子筛层析纯化 APL第20页
   ·凝集素蛋白浓度的测定第20-21页
     ·用 Folin-酚试剂测定,以牛血清蛋白作为标准第20-21页
     ·紫外吸收法第21页
   ·凝集素纯度鉴定第21页
   ·凝集素中性糖含量的测定第21页
   ·凝集素分子量的测定第21页
     ·Sephacryl S-100分子筛测定表观分子量第21页
     ·SDS-PAGE 测定凝集素亚基的分子量第21页
   ·APL等电点的测定第21-22页
   ·凝集素基本理化性质检测第22-25页
     ·泽泻凝集素凝血活性的测定第22页
     ·糖抑制实验第22页
     ·APL耐热性测定第22页
     ·APL耐酸碱的测定第22-23页
     ·金属离子对 APL凝血活性的影响第23页
     ·变性剂对APL凝血活性的影响第23页
       ·不同浓度盐酸胍对 APL凝血活性的影响第23页
       ·不同浓度脲对 APL凝血活性的影响第23页
       ·不同浓度 SDS对 APL凝血活性的影响第23页
     ·N-乙酰葡萄糖胺对 APL凝血活性的影响第23-24页
     ·APL的部分基团的特异性化学修饰第24-25页
       ·Ser/Thr的化学修饰第24页
       ·Tyr的化学修饰第24页
       ·Trp的化学修饰和数目测定第24页
       ·APL二硫键和巯基的修饰第24-25页
       ·Arg的化学修饰第25页
       ·Asp/Glu的化学修饰第25页
   ·APL的光谱学性质研究第25-27页
     ·APL的圆二色谱第25页
     ·APL的紫外光谱第25-26页
     ·APL的荧光光谱第26-27页
       ·天然态 APL样品内源荧光光谱的测定第26页
       ·不同温度处理对 APL荧光光谱的影响第26页
       ·不同pH对 APL荧光光谱的影响第26页
       ·氨基酸残基化学修饰后 APL的荧光光谱第26页
       ·变性剂处理后APL的荧光光谱第26页
       ·内源荧光淬灭研究第26-27页
         ·KI对 APL荧光的淬灭作用第27页
         ·丙烯酰胺对 APL荧光的淬灭作用第27页
         ·CsCl对 APL荧光的淬灭作用第27页
 4 结果与讨论第27-81页
   ·川泽泻凝集素的分离与纯化第27-30页
     ·凝集素的粗提第27-28页
     ·凝集素的分离纯化第28-30页
   ·APL纯度及分子量的测定第30-31页
   ·APL等电点和中性糖含量的测定第31页
   ·APL的性质研究结果第31-81页
     ·APL对血细胞凝集作用第31-32页
     ·糖或糖蛋白抑制实验结果第32-34页
       ·不同的糖或糖蛋白对APL活性的影响第32-33页
       ·N-乙酰葡萄糖胺对凝集活性的影响第33-34页
     ·温度对 APL凝集活性的影响第34-35页
     ·不同pH对 APL凝集活性的影响第35-36页
     ·金属离子对 APL凝集血细胞活性的影响第36-37页
     ·变性剂对 APL凝集活性的影响第37-39页
       ·不同浓度盐酸胍对 APL凝集活性的影响第37-38页
       ·脲对APL凝集活性的影响第38页
       ·SDS对 APL凝集活性的影响第38-39页
     ·泽泻凝集素部分基团特异性化学修饰对 APL凝集活性的影响第39-45页
       ·Trp的化学修饰与数目的测定第39-42页
       ·Ser/Thr的化学修饰第42页
       ·Tyr的化学修饰第42-43页
       ·Arg的化学修饰第43页
       ·ASP/Glu的化学修饰第43-44页
       ·疏基的化学修饰第44-45页
     ·凝集素APL的光谱学性质研究第45-81页
       ·天然 APL的紫外吸收光谱第45-48页
         ·Gu-HCl变性对APL紫外吸收光谱的影响第46页
         ·脲变性对 APL紫外吸收光谱的影响第46-48页
         ·不同pH对APL紫外吸收光谱的影响第48页
       ·天然 APL的圆二色谱第48-49页
       ·天然 APL的荧光光谱第49-67页
         ·不同温度处理的凝集素的荧光光谱第51-52页
         ·不同pH对荧光光谱的影响第52-53页
         ·N-乙酰葡萄糖胺对 APL荧光光谱的影响第53-55页
         ·不同氨基酸的化学修饰的荧光光谱第55-61页
         ·变性剂对凝集素内源荧光的影响第61-67页
       ·凝集素 APL的荧光淬灭研究第67-81页
 5 结论第81-84页
 参考文献第84-90页
第二部分 文献综述第90-132页
 一、凝集素的概念、发展和分类第90-94页
 二、凝集素的生物学特性第94-95页
 三、糖专一性和血型特异性的研究第95-97页
 四、凝集素的生理作用研究第97-104页
 五、凝集素的分离纯化第104页
 六、凝集素糖识别专一性的结构基础和机理第104-112页
 七、凝集素基因的克隆和转基因工程第112-114页
 八、凝集素的应用第114-117页
 九、凝集素研究展望第117-119页
 综述参考文献第119-132页
研究生期间发表的论文第132-134页
致谢第134-135页

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