第一部分 川泽泻块茎凝集素(Alisma plantago-aquatica lectin)的分离、纯化和性质研究 | 第1-90页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
1 引言 | 第14-17页 |
2 材料、试剂和仪器 | 第17-19页 |
·材料 | 第17页 |
·试剂 | 第17-18页 |
·仪器 | 第18-19页 |
3 方法 | 第19-27页 |
·泽泻凝集素的分离纯化 | 第19-20页 |
·APL粗品的制备 | 第19页 |
·凝集素 APL活性测定方法 | 第19页 |
·CM-Sepharose F阳离子交换柱层析纯化 APL | 第19-20页 |
·DEA-Sepharose FF阴离子交换层析柱纯化 APL | 第20页 |
·甲壳素亲和层析柱纯化 APL | 第20页 |
·分子筛层析纯化 APL | 第20页 |
·凝集素蛋白浓度的测定 | 第20-21页 |
·用 Folin-酚试剂测定,以牛血清蛋白作为标准 | 第20-21页 |
·紫外吸收法 | 第21页 |
·凝集素纯度鉴定 | 第21页 |
·凝集素中性糖含量的测定 | 第21页 |
·凝集素分子量的测定 | 第21页 |
·Sephacryl S-100分子筛测定表观分子量 | 第21页 |
·SDS-PAGE 测定凝集素亚基的分子量 | 第21页 |
·APL等电点的测定 | 第21-22页 |
·凝集素基本理化性质检测 | 第22-25页 |
·泽泻凝集素凝血活性的测定 | 第22页 |
·糖抑制实验 | 第22页 |
·APL耐热性测定 | 第22页 |
·APL耐酸碱的测定 | 第22-23页 |
·金属离子对 APL凝血活性的影响 | 第23页 |
·变性剂对APL凝血活性的影响 | 第23页 |
·不同浓度盐酸胍对 APL凝血活性的影响 | 第23页 |
·不同浓度脲对 APL凝血活性的影响 | 第23页 |
·不同浓度 SDS对 APL凝血活性的影响 | 第23页 |
·N-乙酰葡萄糖胺对 APL凝血活性的影响 | 第23-24页 |
·APL的部分基团的特异性化学修饰 | 第24-25页 |
·Ser/Thr的化学修饰 | 第24页 |
·Tyr的化学修饰 | 第24页 |
·Trp的化学修饰和数目测定 | 第24页 |
·APL二硫键和巯基的修饰 | 第24-25页 |
·Arg的化学修饰 | 第25页 |
·Asp/Glu的化学修饰 | 第25页 |
·APL的光谱学性质研究 | 第25-27页 |
·APL的圆二色谱 | 第25页 |
·APL的紫外光谱 | 第25-26页 |
·APL的荧光光谱 | 第26-27页 |
·天然态 APL样品内源荧光光谱的测定 | 第26页 |
·不同温度处理对 APL荧光光谱的影响 | 第26页 |
·不同pH对 APL荧光光谱的影响 | 第26页 |
·氨基酸残基化学修饰后 APL的荧光光谱 | 第26页 |
·变性剂处理后APL的荧光光谱 | 第26页 |
·内源荧光淬灭研究 | 第26-27页 |
·KI对 APL荧光的淬灭作用 | 第27页 |
·丙烯酰胺对 APL荧光的淬灭作用 | 第27页 |
·CsCl对 APL荧光的淬灭作用 | 第27页 |
4 结果与讨论 | 第27-81页 |
·川泽泻凝集素的分离与纯化 | 第27-30页 |
·凝集素的粗提 | 第27-28页 |
·凝集素的分离纯化 | 第28-30页 |
·APL纯度及分子量的测定 | 第30-31页 |
·APL等电点和中性糖含量的测定 | 第31页 |
·APL的性质研究结果 | 第31-81页 |
·APL对血细胞凝集作用 | 第31-32页 |
·糖或糖蛋白抑制实验结果 | 第32-34页 |
·不同的糖或糖蛋白对APL活性的影响 | 第32-33页 |
·N-乙酰葡萄糖胺对凝集活性的影响 | 第33-34页 |
·温度对 APL凝集活性的影响 | 第34-35页 |
·不同pH对 APL凝集活性的影响 | 第35-36页 |
·金属离子对 APL凝集血细胞活性的影响 | 第36-37页 |
·变性剂对 APL凝集活性的影响 | 第37-39页 |
·不同浓度盐酸胍对 APL凝集活性的影响 | 第37-38页 |
·脲对APL凝集活性的影响 | 第38页 |
·SDS对 APL凝集活性的影响 | 第38-39页 |
·泽泻凝集素部分基团特异性化学修饰对 APL凝集活性的影响 | 第39-45页 |
·Trp的化学修饰与数目的测定 | 第39-42页 |
·Ser/Thr的化学修饰 | 第42页 |
·Tyr的化学修饰 | 第42-43页 |
·Arg的化学修饰 | 第43页 |
·ASP/Glu的化学修饰 | 第43-44页 |
·疏基的化学修饰 | 第44-45页 |
·凝集素APL的光谱学性质研究 | 第45-81页 |
·天然 APL的紫外吸收光谱 | 第45-48页 |
·Gu-HCl变性对APL紫外吸收光谱的影响 | 第46页 |
·脲变性对 APL紫外吸收光谱的影响 | 第46-48页 |
·不同pH对APL紫外吸收光谱的影响 | 第48页 |
·天然 APL的圆二色谱 | 第48-49页 |
·天然 APL的荧光光谱 | 第49-67页 |
·不同温度处理的凝集素的荧光光谱 | 第51-52页 |
·不同pH对荧光光谱的影响 | 第52-53页 |
·N-乙酰葡萄糖胺对 APL荧光光谱的影响 | 第53-55页 |
·不同氨基酸的化学修饰的荧光光谱 | 第55-61页 |
·变性剂对凝集素内源荧光的影响 | 第61-67页 |
·凝集素 APL的荧光淬灭研究 | 第67-81页 |
5 结论 | 第81-84页 |
参考文献 | 第84-90页 |
第二部分 文献综述 | 第90-132页 |
一、凝集素的概念、发展和分类 | 第90-94页 |
二、凝集素的生物学特性 | 第94-95页 |
三、糖专一性和血型特异性的研究 | 第95-97页 |
四、凝集素的生理作用研究 | 第97-104页 |
五、凝集素的分离纯化 | 第104页 |
六、凝集素糖识别专一性的结构基础和机理 | 第104-112页 |
七、凝集素基因的克隆和转基因工程 | 第112-114页 |
八、凝集素的应用 | 第114-117页 |
九、凝集素研究展望 | 第117-119页 |
综述参考文献 | 第119-132页 |
研究生期间发表的论文 | 第132-134页 |
致谢 | 第134-135页 |