| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-32页 |
| ·棉纤维发育过程中基因表达的研究进展 | 第12-15页 |
| ·棉纤维发育过程概况 | 第12-13页 |
| ·纤维特异性基因及其表达 | 第13-15页 |
| ·基因工程在棉纤维品质改良中的应用现状 | 第15-16页 |
| ·利用角兔蛋白基因等改良棉纤维强度 | 第15页 |
| ·利用色素合成酶基因改变棉纤维的色泽 | 第15-16页 |
| ·利用 PHB 合成酶基因提高棉纤维品质的研究 | 第16页 |
| ·启动子研究概述 | 第16-20页 |
| ·启动子的一般特征 | 第16-17页 |
| ·植物启动子的分类 | 第17-20页 |
| ·组织特异性表达基因 CDNA 片段分离技术 | 第20-28页 |
| ·m RNA 差别显示技术 | 第21-25页 |
| ·差别筛选技术 | 第25页 |
| ·差减杂交法 | 第25-27页 |
| ·基因表达序列分析法 | 第27-28页 |
| ·应用 DNA 芯片技术筛选新基因 | 第28页 |
| ·组织特异性基因全长 CDNA 分离技术 | 第28-29页 |
| ·寡核苷酸帽法 | 第28页 |
| ·CAPture 法 | 第28-29页 |
| ·SMART 法 | 第29页 |
| ·m RNA 均一差减法 | 第29页 |
| ·植物表达基因启动子的克隆 | 第29-31页 |
| ·基因组文库 | 第30页 |
| ·接头连接 PCR | 第30页 |
| ·反向 PCR | 第30页 |
| ·随机引物 PCR | 第30-31页 |
| ·本研究的目的及技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-48页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·实验菌株和载体 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·主要酶和试剂 | 第32页 |
| ·所用引物 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-48页 |
| ·RNA 提取及鉴定 | 第33-34页 |
| ·m RNA 差异显示技术体系的建立 | 第34-35页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶的制备和电泳 | 第35-37页 |
| ·差异片段的反向 Northern 斑点杂交 | 第37-39页 |
| ·阳性片段的克隆 | 第39-41页 |
| ·差异片段全长的获得 | 第41-42页 |
| ·差异片段启动子的获得 | 第42-44页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第44-48页 |
| 第三章 结果 | 第48-60页 |
| ·总 RNA 纯度及完整性检测 | 第48页 |
| ·mRNA 差异显示体系的建立 | 第48-51页 |
| ·cDNA 的合成 | 第48-49页 |
| ·引物浓度对扩增产物的影响 | 第49页 |
| ·Mg~(2+) 浓度对扩增产物的影响 | 第49-50页 |
| ·dNTP 浓度对扩增产物的影响 | 第50-51页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第51页 |
| ·回收条带的再扩增 | 第51页 |
| ·差异片段的反向 Northern 斑点杂交 | 第51-52页 |
| ·阳性重组克隆的筛选与鉴定 | 第52页 |
| ·克隆片段的测序结果 | 第52-54页 |
| ·GhTIP 基因全长的获得 | 第54-57页 |
| ·GhTIP 基因 5′上游序列的获得 | 第57-58页 |
| ·用 GhTIP 基因 5′上游序列构建植物表达载体 | 第58-59页 |
| ·转基因烟草的 PCR 检测 | 第59页 |
| ·GUS 组织化学染色检测启动子的启动功能 | 第59-60页 |
| 第四章 讨论 | 第60-63页 |
| ·本实验采用 mRNA 差异显示技术的特点 | 第60-62页 |
| ·实验材料的选择 | 第60页 |
| ·总 RNA 提取及纯化处理 | 第60-61页 |
| ·逆转录和 PCR 扩增 | 第61页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术 | 第61页 |
| ·差异条带回收 | 第61页 |
| ·反向 Northern 斑点杂交 | 第61-62页 |
| ·棉花纤维特异表达 cDNA 片段的生物信息学分析 | 第62页 |
| ·本研究创新点 | 第62页 |
| ·后续工作思路 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简历 | 第72页 |