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日本落叶松×华北落叶松体细胞胚胎发生的生化机制和分子机理研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-34页
   ·引言第13-14页
     ·研究背景第13页
     ·研究目的和意义第13-14页
     ·项目来源与经费支持第14页
   ·植物体细胞胚胎发生的研究现状第14-25页
     ·针叶树体细胞胚胎的发生第16-20页
     ·植物体细胞胚胎发生的生理生化基础第20-22页
     ·植物体细胞胚胎发生过程中相关应答基因的研究概况第22-25页
   ·差异表达基因的研究方法第25-32页
     ·m RNA 差异显示技术(DDRT-PCR)第25-26页
     ·cDNA 差示分析或代表性差异分析(cDNA-RDA)第26-27页
     ·基因表达系列分析(SAGE)第27-28页
     ·cDNA-AFLP 技术第28-29页
     ·抑制性消减杂交(SSH)第29-32页
   ·研究目标和主要研究内容第32-33页
     ·研究目标第32页
     ·主要研究内容第32-33页
   ·研究技术路线第33-34页
第二章 落叶松体细胞胚不同发育时期的形态变化及生化差异第34-53页
   ·材料与方法第34-41页
     ·实验材料第34-35页
     ·试剂及配制方法第35-36页
     ·落叶松体细胞胚发生过程中的形态学观察第36页
     ·落叶松体细胞胚发生过程中几种生化指标的测定第36-41页
   ·实验结果第41-48页
     ·落叶松体细胞胚胎发生过程中的形态变化第41-43页
     ·落叶松体细胞胚胎不同发育时期生化指标测定结果第43-48页
   ·讨论第48-52页
     ·可溶性蛋白与落叶松体细胞胚胎发生的关系第48-49页
     ·可溶性糖和淀粉与落叶松体细胞胚胎发生的关系第49-50页
     ·抗氧化酶类与落叶松体细胞胚胎发生的关系第50-52页
   ·小结第52-53页
第三章 落叶松体细胞胚原胚团阶段和成熟阶段差异表达基因文库的构建与诠释第53-85页
   ·材料与方法第53-67页
     ·实验材料第53页
     ·试剂第53页
     ·引物第53-54页
     ·总RNA 提取第54-55页
     ·mRNA 分离纯化第55页
     ·消减文库的构建第55-65页
     ·消减文库的克隆第65-66页
     ·插入片段的PCR 鉴定第66-67页
     ·阳性克隆的测序和序列分析第67页
   ·实验结果第67-75页
     ·总RNA 的提取与mRNA 的纯化第67页
     ·双链cDNA 的合成和RsaⅠ酶切第67-68页
     ·接头连接效率分析第68-69页
     ·两轮PCR 扩增第69-70页
     ·消减效率的分析第70-71页
     ·差异表达cDNA 片段的克隆和PCR 鉴定第71-72页
     ·阳性克隆的cDNA 测序第72页
     ·消减文库的生物信息学诠释及功能分类第72-75页
   ·讨论第75-83页
     ·各类差异表达基因在落叶松体细胞胚胎不同发育阶段的分布第75-76页
     ·不同功能的基因在落叶松体细胞胚胎发生过程中的作用第76-83页
   ·小结第83-85页
第四章 部分ESTs 在落叶松体细胞胚不同发育时期的表达分析第85-103页
   ·材料与方法第85-88页
     ·实验材料第85页
     ·总RNA 提取第85页
     ·cDNA 第一链的合成第85-86页
     ·部分差异表达基因的表达分析第86-88页
   ·实验结果第88-98页
     ·部分差异表达基因的半定量PCR 分析第88-93页
     ·部分差异表达基因的定量PCR 分析第93-98页
   ·讨论第98-101页
     ·部分转录相关基因对落叶松体细胞胚胎发生的调控第98-99页
     ·部分信号转导相关基因对落叶松体细胞胚胎发生的调控第99页
     ·部分细胞生长分裂相关基因对落叶松体细胞胚胎发生的调控第99-100页
     ·部分发育相关基因对落叶松体细胞胚胎发生的调控第100页
     ·其它类型基因对落叶松体细胞胚胎发生的调控第100-101页
   ·小结第101-103页
第五章 结论第103-106页
   ·结论第103-105页
   ·讨论与展望第105-106页
参考文献第106-122页
缩写第122-123页
A 库UniESTs 序列比对结果第123-154页
在读期间的学术研究第154-155页
致谢第155页

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