| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略符号表 | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·柑橘衰退病的危害 | 第12页 |
| ·CTV的生物学特性 | 第12-14页 |
| ·CTV的分类学地位 | 第12页 |
| ·寄主范围和敏感性 | 第12页 |
| ·CTV的侵染症状和株系分化 | 第12-13页 |
| ·CTV的传播 | 第13-14页 |
| ·CTV的分子生物学特性 | 第14-16页 |
| ·CTV的检测 | 第16-22页 |
| ·生物学检测 | 第16页 |
| ·分子生物学检测 | 第16-21页 |
| ·血清学检测 | 第21-22页 |
| ·内含体电镜检测 | 第22页 |
| ·CTV的防治策略及弱毒株交叉保护(MSCP) | 第22页 |
| ·小结 | 第22-24页 |
| 第2章 引言 | 第24-26页 |
| 第3章 CTV的实时荧光RT-qPCR检测体系的建立 | 第26-44页 |
| ·试验材料 | 第26-28页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·常用储备液及缓冲液 | 第27-28页 |
| ·试验方法 | 第28-33页 |
| ·总核酸的制备 | 第28-29页 |
| ·引物的设计与合成 | 第29页 |
| ·cDNA合成 | 第29页 |
| ·PCR反应 | 第29页 |
| ·PCR产物的回收 | 第29页 |
| ·重组质粒pGEM-T Easy-p25的构建 | 第29-32页 |
| ·定量PCR条件的优化和标准曲线的建立 | 第32-33页 |
| ·反应体系的方法学测试 | 第33页 |
| ·田间样品检测 | 第33页 |
| ·试验结果 | 第33-40页 |
| ·RT-PCR法扩增获得的CTVp25基因的插入用目的片段 | 第33-34页 |
| ·CTVp25基因的插入用目的片段重组质粒的筛选 | 第34页 |
| ·CTV标准品重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·定量反应体系和条件的优化 | 第35-36页 |
| ·方法学评价结果 | 第36-39页 |
| ·田间样品的CTV mRNA含量检测 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·小结 | 第42-44页 |
| 第4章 运用实时荧光RT-qPCR技术检测弱毒株对强毒株的拮抗作用 | 第44-68页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·CTV分离株毒源 | 第44页 |
| ·供试蚜虫 | 第44页 |
| ·试验试剂 | 第44页 |
| ·试验设备 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-47页 |
| ·CTV毒源的接种和检测 | 第44-45页 |
| ·拮抗试验 | 第45页 |
| ·检测强毒分离株的实时荧光RT-qPCR体系的建立 | 第45-46页 |
| ·强弱株系的检测 | 第46页 |
| ·实时荧光RT-qPCR检测CT14与CT11的表达量 | 第46-47页 |
| ·试验结果 | 第47-65页 |
| ·锦橙实生苗嫁接传毒的DTBIA检测结果 | 第47页 |
| ·CT14的T3K17、ACT2和18S rRNA基因片段的RT-PCR结果 | 第47-48页 |
| ·CT14的T3K17、ACT2和18S rRNA标准品重组质粒的筛选 | 第48页 |
| ·CT14的T3K17、ACT2和18S rRNA标准品重组质粒的鉴定 | 第48-49页 |
| ·定量反应体系和条件的优化 | 第49-51页 |
| ·实时荧光RT-qPCR检测CT11对CT14的拮抗作用 | 第51-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 第5章 展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 附录 | 第78-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 参与课题与发表文章目录 | 第84页 |
