| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-22页 |
| ·Rab族蛋白及其功能的多样性 | 第11-17页 |
| ·Rab族蛋白的概述 | 第11-13页 |
| ·Rab族蛋白的结构 | 第13-15页 |
| ·Rab蛋白的功能 | 第15-17页 |
| ·研究Rab蛋白的意义 | 第17-19页 |
| ·Rab参与生物体内蛋白质的定向运输 | 第17-18页 |
| ·Rab蛋白参与信号转导、受体下调、胞吞作用等 | 第18-19页 |
| ·研究稻瘟病菌Rab蛋白的意义 | 第19页 |
| ·稻瘟病和稻瘟病菌 | 第19-22页 |
| ·稻瘟病的流行和危害 | 第19-20页 |
| ·稻瘟病菌及其侵染循环 | 第20-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-38页 |
| ·供试菌株、质粒、试剂和培养基等材料 | 第22-24页 |
| ·供试菌株 | 第22页 |
| ·供试质粒 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·生化试剂 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-38页 |
| ·蛋白序列获得和分析 | 第24页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA的提取及提取质量的检测 | 第24页 |
| ·DNA琼脂糖电泳 | 第24-25页 |
| ·常规PCR扩增目的片断 | 第25-26页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第26-27页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第27页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·质粒酶切与连接 | 第28页 |
| ·稻瘟病菌原生质体的制备 | 第28-29页 |
| ·稻瘟病菌原生质体转化 | 第29页 |
| ·敲除突变体基因的互补 | 第29页 |
| ·稻瘟病菌总RNA的提取和分析 | 第29-31页 |
| ·稻瘟病菌总RNA的提取 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR | 第30-31页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA Southern杂交(DIG) | 第31-35页 |
| ·DNA转印 | 第31页 |
| ·探针的扩增 | 第31-32页 |
| ·探针的标记 | 第32页 |
| ·探针标记效价的检测 | 第32-34页 |
| ·Southern杂交和洗膜 | 第34-35页 |
| ·免疫显色 | 第35页 |
| ·稻瘟病菌突变体的表型观察 | 第35-38页 |
| ·生长速率测定与菌落颜色 | 第35-36页 |
| ·产孢量测定 | 第36页 |
| ·孢子萌发及附着胞形成实验 | 第36页 |
| ·洋葱表皮内侵染结构的观察 | 第36页 |
| ·致病性鉴定 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-56页 |
| ·稻瘟病菌MgRab8基因编码蛋白分析及系统进化关系 | 第38-40页 |
| ·稻瘟病菌MgRab8基因克隆及编码蛋白分析 | 第38页 |
| ·真菌中RAB8蛋白的系统演化关系 | 第38-40页 |
| ·同源重组获得MgRab8敲除突变体 | 第40-44页 |
| ·敲除载体的构建 | 第40-41页 |
| ·原生质体转化及突变体筛选与验证 | 第41-43页 |
| ·RT-PCR分析突变体中MgRab8的表达 | 第43-44页 |
| ·Mgrab8缺失突变体的互补 | 第44-46页 |
| ·MgRab8功能分析 | 第46-53页 |
| ·Mgrab8缺失引起菌丝生长显著减缓、产孢量显著减少 | 第46-48页 |
| ·MgRab8敲除突变体的孢子萌发率及附着胞形成率不受影响 | 第48-50页 |
| ·MgRab8敲除突变体的致病性明显减弱 | 第50-53页 |
| ·MgRab8互补菌株的筛选及其表型观察 | 第53-56页 |
| 4 结论和讨论 | 第56-59页 |
| ·稻瘟病菌Rab8是真菌中一种典型的Rab GTPase | 第56页 |
| ·稻瘟病菌Rab8可能参与调控营养生长、无性繁殖以及细胞的极性生长过程 | 第56-57页 |
| ·Rab8与稻瘟病菌对植物的侵染致病相关 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
