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对鞘翅目害虫有活性Bt菌株的筛选及cry8Ea2基因的克隆、表达和活性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
1 前言第10-20页
   ·苏云金芽胞杆菌第10-17页
     ·苏云金芽胞杆菌的形态特征第10页
     ·苏云金芽胞杆菌的分类第10-11页
     ·苏云金芽胞杆菌的生态学分布第11页
     ·苏云金芽胞杆菌的杀虫毒素第11-17页
   ·鞘翅目害虫的危害第17页
   ·对鞘翅目害虫有活性的cry8类基因的研究进展第17-19页
   ·本研究的目的与意义第19-20页
2 试验材料与方法第20-30页
   ·试验材料第20-22页
     ·供试菌株和质粒(见表2)第20页
     ·培养基第20页
     ·试剂及溶液的配制第20-21页
     ·供试昆虫第21-22页
     ·土样第22页
     ·仪器设备第22页
   ·试验方法第22-30页
     ·Bt菌株的分离第22-23页
     ·Bt菌株的基因型鉴定和杀虫晶体蛋白SDS-PAGE分析第23页
     ·野生型菌株的杀虫活性测定第23-24页
     ·杀虫晶体蛋白基因型的鉴定第24-26页
     ·cry8基因的克隆和序列分析第26-28页
     ·cry8Ea2基因的表达第28-29页
     ·cry8Ea2基因表达产物的杀虫活性测定第29-30页
3 结果与分析第30-44页
   ·苏云金芽胞杆菌菌株的分离第30-33页
   ·Bt菌株cry3、cry8基因型的鉴定第33页
   ·B-DLL和B-JJX菌株杀虫晶体蛋白SDS-PAGE分析第33-34页
   ·B-DLL和B-JJX菌株的杀虫生物活性测定第34-36页
   ·cry8基因的克隆、序列测定和分析第36-39页
     ·cry8基因的克隆第36-38页
     ·cry8基因的序列测定和分析第38-39页
   ·cry8Ea2基因的表达第39-42页
     ·构建重组表达载体第39-41页
     ·cry8Ea2基因的表达第41-42页
   ·Cry8Ea2蛋白的杀虫活性测定第42-44页
4 讨论第44-46页
 1 苏云金芽胞杆菌的分离第44页
 2 PCR反应鉴定基因型第44页
 3 苏云金杆菌中cry基因的克隆、表达和表达产物的杀虫活性测定第44-45页
 4 Cry8Ea2蛋白的分析第45页
 5 苏云金芽胞杆菌的抗性治理第45-46页
5 结论第46-55页
附录1 缩略词第55-56页
附录2 GenBank登记资料第56-59页
在读期间发表的学术论文第59-60页
作者简历第60-61页
致谢第61页

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