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Delftia tsuruhatensis AD9邻苯二酚2,3-双加氧酶基因的表达和功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-11页
第一章 引言第11-29页
   ·苯胺降解微生物的研究进展第11-13页
     ·苯胺特性第11页
     ·苯胺微生物降解的特点第11-12页
     ·苯胺降解细菌第12-13页
   ·苯胺降解途径的研究进展第13-16页
     ·苯胺降解基因簇的克隆第13-15页
     ·苯胺降解代谢途径第15-16页
   ·邻苯二酚双加氧酶的研究进展第16-23页
     ·邻苯二酚1,2-双加氧酶第16-18页
     ·邻苯二酚2,3-双加氧酶第18页
     ·邻苯二酚2,3-双加氧酶结构第18页
     ·不同来源的邻苯二酚2,3-双加氧酶及其性质第18-20页
     ·邻苯二酚2,3-双加氧酶的反应机制第20-22页
     ·邻苯二酚2,3-双加氧酶的应用第22页
     ·邻苯二酚的间位裂解途径第22-23页
   ·苯胺降解菌Delftia tsuruhatensis AD9的研究进展第23-27页
     ·苯胺降解菌Delftia tsuruhatensis AD9的分离第23页
     ·苯胺降解菌Delftia tsuruhatensis AD9的生理生化特性第23页
     ·Delftia tsuruhatensis AD9苯胺降解基因簇的结构及功能第23-27页
   ·立题依据和研究目的意义第27-28页
   ·技术路线第28-29页
第二章 实验材料与方法第29-37页
   ·菌株和质粒第29页
   ·生物化学试剂第29页
   ·酶和试剂盒第29页
   ·培养基第29-30页
   ·序列分析及蛋白结构预测第30页
   ·邻苯二酚含量的测定(p-aminophenol方法)第30页
   ·提取 RNA第30页
   ·反转录 PCR第30-31页
   ·邻苯二酚双加氧酶基因的克隆第31-32页
   ·PCR基因片段的回收第32页
   ·pET28a表达载体的构建第32-34页
   ·感受态细胞的制备第34页
   ·表达载体的转化及筛选第34页
   ·转化子的鉴定第34页
   ·SDS-PAGE蛋白电泳第34-37页
第三章 结果与讨论第37-48页
   ·实验结果第37-45页
     ·两个基因的序列分析及蛋白结构比较第37-38页
     ·AD9以苯胺和邻苯二酚为唯一碳源的生长情况第38-39页
     ·RT-PCR研究基因在不同诱导物诱导条件下的表达情况第39-42页
     ·原核表达载体pETC1和pETC2的构建第42-43页
     ·原核表达载体pETCI和pETC2表达产物的SDS-PAGE分析第43-44页
     ·C2,3O酶活的测定第44-45页
   ·讨论第45-48页
     ·AD9苯胺代谢途径的特点及其邻苯二酚双加氧酶在代谢途径中的作用第45-46页
     ·AD9苯胺降解基因簇中调控机制的研究第46-48页
第四章 结论第48-49页
参考文献第49-59页
附录第59-61页
致谢第61-62页
个人简历第62页

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